腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法及其對(duì)三七灰霉病的防治作用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，包括以下步驟，步驟一、取500～600份腫節(jié)風(fēng)的葉和莖，加入5000～6000份水，水蒸氣蒸餾得到第一混合物；步驟二、按體積比1:1～2向步驟一中的第一混合物中加入溶劑，萃取，去除溶劑后得揮發(fā)油；步驟三、按體積比1:0.05～0.1:0.05～0.1向步驟二中的揮發(fā)油加入吐溫和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％的魔芋粉溶液，采用磁力攪拌器攪拌，直至混合物呈乳化狀態(tài)，然后按質(zhì)量比1:0.02～0.04向混合物中加入β?環(huán)糊精，繼續(xù)用磁力攪拌器攪拌，直至混合物呈黏稠狀，即得。本發(fā)明專利技術(shù)具有對(duì)環(huán)境影響小，易保藏，有效藥期長(zhǎng)，減少施藥用量，節(jié)約成本及對(duì)三七灰霉病防治效果好的有益效果。

Preparation method of Sarcandra glabra essential oil and its control effect on 37 Botrytis cinerea

The invention discloses a preparation method of Zhongjiefeng volatile oil, which includes the following steps: step one, 500 to 600 portions of Sarcandra glabra leaves and stems with 5000 to 6000 parts of water, steam distillation from the first mixture; step two, according to the volume ratio of 1:1 to 2 in the first step to a mixture in addition of solvent extraction, solvent removal after volatile oil; step three, according to the volume ratio of 1:0.05 ~ 0.1:0.05 ~ 0.1 to the volatile oil by the step 2 joined Twain and the mass fraction of konjac powder solution 15%, using magnetic stirrer, until the mixture is in the emulsion state, and according to the mass ratio of 1:0.02 to 0.04 is added to the mixture beta cyclodextrin, continue stirring with a magnetic stirrer, until the mixture was thick like, that is. The invention has the advantages of little influence on environment, easy preservation, long effective drug period, reducing application amount, saving cost and good control effect on 37 gray mold.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及揮發(fā)油制備領(lǐng)域。更具體地說(shuō)，本專利技術(shù)涉及一種腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法及其對(duì)三七灰霉病的防治作用。
技術(shù)介紹
三七具有顯著的活血化瘀、消腫定痛功效，是一種中國(guó)傳統(tǒng)名貴藥材。近年來(lái)，對(duì)三七原材料的需求日益增長(zhǎng)，但是栽培過(guò)程中的真菌病害嚴(yán)重影響了三七生長(zhǎng)。三七灰霉病以危害葉為主，多從下部老葉的葉尖或近地部分葉柄發(fā)病，灰褐色病斑，腐爛。在廣西三七的傳統(tǒng)產(chǎn)區(qū)，由于低海拔及高溫多濕的氣象條件，這種病害往往更嚴(yán)重，造成了三七的大量減產(chǎn)甚至絕收，給種植戶帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，在三七種植上，防治真菌病害過(guò)度依賴化學(xué)農(nóng)藥，大量化學(xué)農(nóng)藥的使用不僅影響了三七的品質(zhì)，也造成了三七藥材的大量農(nóng)藥殘留。因此，借鑒中醫(yī)藥研究成果，可望從藥用植物中篩選出抗植物病原真菌的天然活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)可直接作為天然殺菌劑，效果良好，對(duì)三七產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展是非常迫切和必要的。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的一個(gè)目的是解決至少上述問(wèn)題，并提供至少后面將說(shuō)明的優(yōu)點(diǎn)。本專利技術(shù)還有一個(gè)目的是提供一種腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，此方法簡(jiǎn)單易行，成本低，得率高，用量少；本專利技術(shù)還有一個(gè)目的是提供腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的用途，對(duì)三七灰霉病的防治作用強(qiáng)，對(duì)環(huán)境影響小，且藥劑藥效期長(zhǎng)。為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本專利技術(shù)的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，提供了一種腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，包括以下步驟，以下原料按重量份數(shù)計(jì)：步驟一、取500～600份腫節(jié)風(fēng)的葉和莖，加入5000～6000份水，水蒸氣蒸餾得到第一混合物；步驟二、按體積比1:1～2向步驟一中的第一混合物中加入溶劑，萃取，去除溶劑后得揮發(fā)油。優(yōu)選的是，步驟一中的腫節(jié)風(fēng)的葉和莖蒸餾前處理：將500～600份腫節(jié)風(fēng)的葉和莖置于超微粉碎機(jī)中粉碎，取出加入500～600份水，置于超聲波中以60kHz的頻率處理20～30min，取出加入15～20份半胱氨酸和25～30份纖維素酶，調(diào)節(jié)pH值至5～6，于60℃下酶解24～36h，加入10～15份司班和70～80份吐溫，攪拌均勻。優(yōu)選的是，步驟一中的第一混合物萃取前處理：向步驟一中的第一混合物加入100～120份質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3％的氯化鈉溶液和1～1.5份乙酸，混合均勻后放入-18℃環(huán)境中冰凍1～1.5h，取出融化。優(yōu)選的是，步驟二中的揮發(fā)油后處理：按體積比1:0.05～0.1:0.05～0.1向步驟二中的揮發(fā)油加入吐溫和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％的魔芋粉溶液，采用磁力攪拌器攪拌，直至混合物呈乳化狀態(tài)；然后按質(zhì)量比1:0.02～0.04向混合物中加入β-環(huán)糊精，繼續(xù)用磁力攪拌器攪拌，直至混合物呈黏稠狀，即得。本專利技術(shù)還提供了一種由上述的制備方法獲得的腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的應(yīng)用，對(duì)三七灰霉病的防治作用。優(yōu)選的是，揮發(fā)油應(yīng)用于抑制三七灰霉病病原菌菌絲的生長(zhǎng)。優(yōu)選的是，用于抑制三七灰霉病病原菌菌絲生長(zhǎng)的揮發(fā)油的濃度≥0.5g/L。優(yōu)選的是，揮發(fā)油應(yīng)用于抑制三七灰霉病病原菌孢子的萌發(fā)。優(yōu)選的是，用于抑制三七灰霉病病原菌孢子萌發(fā)的揮發(fā)油的濃度為≥0.5g/L。優(yōu)選的是，揮發(fā)油用于三七灰霉病田間防治的使用方法具體為：a按質(zhì)量體積比為0.5～1g:1000ml將揮發(fā)油溶解于稀釋劑中，得第一溶解液，稀釋劑由吐溫和水按體積比為1:3組成；b按體積比為100:1～2向a中的第一溶解液中加入薄荷漿液，攪拌均勻得藥液；其中薄荷漿液的制備方法：將10～15份新鮮薄荷和10～15份乙酸乙酯置于研缽中研碎后，過(guò)濾即得。本專利技術(shù)至少包括以下有益效果：第一、腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油，屬于生物農(nóng)藥，與化學(xué)農(nóng)藥比對(duì)環(huán)境影響?。坏诙⒗贸⒎鬯槭侄螌⒛[節(jié)風(fēng)的葉和莖粉碎至10～25μm以下，且在粉碎過(guò)程中不會(huì)產(chǎn)生局部過(guò)熱現(xiàn)象，速度快，瞬間即可完成，因而最大限度地保留腫節(jié)風(fēng)的生物活性成分；第三、利用超聲波的機(jī)械作用促使10～25μm以下的腫節(jié)風(fēng)的葉和莖中的活性物質(zhì)乳化，有助于其分散至水中；第四、腫節(jié)風(fēng)細(xì)胞壁主要是纖維素、半纖維素和果膠類組成，利用纖維素酶酶解其主要組成成分，可破壞其細(xì)胞壁，使腫節(jié)風(fēng)的生物活性成分更易流出；第五、植物組織中含有天然的纖維素酶抑制劑，如重金屬離子和酚類物質(zhì)等，半胱氨酸能消除它們的抑制作用，甚至進(jìn)一步激活纖維素酶，從而縮短腫節(jié)風(fēng)細(xì)胞壁酶解時(shí)間，提高酶解效率；第六、吐溫是一種乳化劑，可以使精油即腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油乳化后溶解于水液體中，促進(jìn)腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油從其組織中流出，吐溫與其他乳化劑司班合用，可增加乳化劑的穩(wěn)定性。第七、萃取時(shí)油相與水相的界面不清，呈一定強(qiáng)度的乳化區(qū)，對(duì)腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的得率影響很大，少量無(wú)機(jī)鹽會(huì)使乳化作用增強(qiáng)，但當(dāng)無(wú)機(jī)鹽含量高時(shí)，可導(dǎo)致乳化區(qū)作用力減弱，導(dǎo)致油水分離，為此加入高濃度的氯化鈉溶液和乙酸，可消除腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油乳化現(xiàn)象，達(dá)到兩相快速有效分離；第八、-18℃凍結(jié)可使水形成冰晶，腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油結(jié)晶，使油/水型乳濁液分離，故解凍后，兩相分離，有利于腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的萃??；第九、得到腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油后，加入吐溫使腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油乳化后溶解于水液體中，使體系更穩(wěn)定，再加入魔芋粉溶液，在其乳化區(qū)形成一層保護(hù)膜層，減緩腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的揮發(fā)速度，然后加入β-環(huán)糊精，并充分?jǐn)嚢柚寥榛癄顟B(tài)，即形成腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油包合物，使其更易保藏，延長(zhǎng)其有效期；第十、將腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油用于防治三七灰霉病時(shí)，用吐溫、水和新鮮薄荷漿液稀釋，薄荷中含有豐富的黃酮類物質(zhì)，其具有較強(qiáng)的抗菌作用，與腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油一起具有協(xié)同作用，相互增強(qiáng)其對(duì)三七灰霉病的防治作用，減少施藥用量和次數(shù)，節(jié)約成本。本專利技術(shù)的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過(guò)下面的說(shuō)明體現(xiàn)，部分還將通過(guò)對(duì)本專利技術(shù)的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本專利技術(shù)做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書文字能夠據(jù)以實(shí)施。<實(shí)施例1>腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，包括以下步驟：步驟一、稱取500g腫節(jié)風(fēng)的葉和莖放入蒸餾燒瓶中，加入5000g水和8粒沸石，再將蒸餾燒瓶與加熱器、冷凝管、接液管和接液器等連接組成蒸餾裝置，冷凝管通入自來(lái)水，使蒸餾燒瓶?jī)?nèi)液體保持微沸狀態(tài)，蒸餾5h后，接液器收集到的油水混合物，即為第一混合物；步驟二、按體積比1:1.5向步驟一中的第一混合物中加入乙醚萃取，分離乙醚層，剩下的水層再按體積比為1:1.5加入乙醚萃取，分離乙醚層，共萃取2次，將乙醚層合并揮發(fā)去除乙醚后得揮發(fā)油，置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?lt;實(shí)施例2>腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，包括以下步驟：步驟一、稱取600g腫節(jié)風(fēng)的葉和莖放入蒸餾燒瓶中，加入6000g水和12粒沸石，再將蒸餾燒瓶與加熱器、冷凝管、接液管和接液器等連接組成蒸餾裝置，冷凝管通入自來(lái)水，使蒸餾燒瓶?jī)?nèi)液體保持微沸狀態(tài)，蒸餾6h后，接液器收集到的油水混合物，即為第一混合物；步驟二、按體積比1:2向步驟一中的第一混合物中加入丙酮萃取，分離丙酮層，剩下的水層再按體積比為1:2加入丙酮萃取，分離丙酮層，共萃取2次，將丙酮層揮發(fā)去除丙酮后得揮發(fā)油，置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?lt;實(shí)施例3>腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，包括以下步驟：步驟一、稱取500g腫節(jié)風(fēng)的葉和莖放入蒸餾燒瓶中，加入5000g水和8粒沸石，再將蒸餾燒瓶與加熱器、冷凝管、接液管和接液器等連接組成蒸餾裝置，冷凝管通入自來(lái)水，使蒸餾燒瓶?jī)?nèi)液體保持微沸狀態(tài)，蒸餾5h后，接液器收集到的油水混合物，即為第一混合物；步驟二本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，其特征在于，包括以下步驟，以下原料按重量份數(shù)計(jì)：步驟一、取500～600份腫節(jié)風(fēng)的葉和莖，加入5000～6000份水，水蒸氣蒸餾得到第一混合物；步驟二、按體積比1:1～2向步驟一中的第一混合物中加入溶劑，萃取，去除溶劑后得揮發(fā)油。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，其特征在于，包括以下步驟，以下原料按重量份數(shù)計(jì)：步驟一、取500～600份腫節(jié)風(fēng)的葉和莖，加入5000～6000份水，水蒸氣蒸餾得到第一混合物；步驟二、按體積比1:1～2向步驟一中的第一混合物中加入溶劑，萃取，去除溶劑后得揮發(fā)油。2.如權(quán)利要求1所述的腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，其特征在于，步驟一中的腫節(jié)風(fēng)的葉和莖蒸餾前處理：將500～600份腫節(jié)風(fēng)的葉和莖置于超微粉碎機(jī)中粉碎，取出加入500～600份水，置于超聲波中以60kHz的頻率處理20～30min，取出加入15～20份半胱氨酸和25～30份纖維素酶，調(diào)節(jié)pH值至5～6，于60℃下酶解24～36h，加入10～15份司班和70～80份吐溫，攪拌均勻。3.如權(quán)利要求1所述的腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，其特征在于，步驟一中的第一混合物萃取前處理：向步驟一中的第一混合物加入100～120份質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3％的氯化鈉溶液和1～1.5份乙酸，混合均勻后放入-18℃環(huán)境中冰凍1～1.5h，取出融化。4.如權(quán)利要求1所述的腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的制備方法，其特征在于，步驟二中的揮發(fā)油后處理：按體積比1:0.05～0.1:0.05～0.1向步驟二中的揮發(fā)油加入吐溫和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％的魔芋粉溶液，采用磁力攪拌...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：蔣妮，韋范，繆劍華，陳乾平，馮世鑫，翟勇進(jìn)，韋樹根，白隆華，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：廣西壯族自治區(qū)藥用植物園，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：廣西;45