馬尾松枝椏中一種烏蘇烷型三萜皂苷及其制備工藝制造技術

本發明專利技術屬于林業剩余物的次生代謝成分清潔高效制備領域，具體涉及一種文獻中從未報道過的烏蘇烷型三萜皂苷即烏蘇酸3?O?β?D?吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β?D?吡喃葡萄糖基(1″′→3′))?β?D?吡喃葡萄糖醛酸基?28?O?β?D?吡喃葡萄糖苷及其制備工藝。本發明專利技術提出的制備工藝具有簡單規范易于操作、制備過程清潔高效、制備產物成分不被破壞且純度高、原料成本低等優點。

A Ursane type of Masson pine branches in three triterpenoid saponins and its preparation process

The invention belongs to the forestry residue of secondary metabolites of clean and efficient preparation field, in particular to a literature has never been reported Ursane type three: ursolic acid saponins 3 O beta D glucopyranosyl (1 'to 2' (beta D) glucopyranosyl (1 \'to 3')) D pyran beta glucuronyl 28 O beta D glucopyranoside and its preparation process. The preparation process of the invention has the advantages of simple specification, easy operation, clean and efficient preparation process, no damage of the component of the prepared product, high purity and low cost of raw material.

【技術實現步驟摘要】
馬尾松枝椏中一種烏蘇烷型三萜皂苷及其制備工藝
本專利技術屬于林木加工剩余物的次生代謝成分制備領域，具體涉及一種文獻中從未報道過的烏蘇烷型三萜皂苷即烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(其對應英文名為ursolicacid3-O-β-D-glucopyranosyl(1″→2′)(β-D-glucopyranosyl(1″′→3′))-β-D-glucuronopyranosyl-28-O-β-D-glucopyranoside)及其清潔高效制備工藝。
技術介紹
馬尾松(PinusmassonianaLamb.)為松科(Pinaceae)常綠喬木，其擁有寬大圓形樹冠，樹高可達25～45米。馬尾松廣泛分布于我國南方各省區，在秦嶺以南的廣大地域尤為常見，是我國最重要的松科樹木之一。馬尾松的松樹皮、松花粉、松樹針等在我國民間廣泛入藥，用以祛風活血、明目安神、活血止痛、解毒、止癢、舒筋等。此外，馬尾松原料在保健品、食品、添加劑等方面應用廣泛。現代藥理研究也充分表明馬尾松化學成分具有顯著的抗腫瘤、抗炎、抗氧化、祛痰、抗突變、止咳、鎮靜、調血脂、平喘、鎮痛、抑菌等作用(肖云川，等，中草藥，2015，46(23)：3460～3465)。三萜皂苷是由三萜皂苷元和糖、糖醛酸或其他有機酸組成，至今已發現至少30余種類型，除了個別是無環三萜、二環三萜及三環三萜外，三萜皂苷主要是四環三萜和五環三萜兩大類。三萜皂苷目前已成為天然產物研究中進展最快和最活躍的領域。三萜皂苷在植物中分布廣泛，且具有多種重要的生物活性和廣泛的藥理作用，如抗腫瘤，抗炎、降低膽固醇、抗病毒、抗過敏、治療白血病、降血糖、防治心腦血管疾病等(張云峰，等，中成藥，2006，28(9)，1349～1353)。研究表明三萜皂苷廣泛分布于商陸科、葫蘆科、七葉樹科、傘形科、山茶科、五加科、桔梗科、木犀科、豆科、遠志科等植物中，許多常用中藥如人參、合歡、甘草、麥冬、知母、夏枯草、黃芪、三七、牛膝、天師栗、白頭翁、柴胡、絞股藍等都含有三萜皂苷化合物(陳穎，等，中國野生植物資，2012，31(6)，15～17)。本專利技術利用液液萃取、柱色譜分離及重結晶技術從馬尾松枝椏中制備得到一種文獻中從未報道過的烏蘇烷型三萜皂苷化合物，制備工藝清潔高效。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種文獻中從未報道過的烏蘇烷型三萜皂苷，即烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，該烏蘇烷型三萜皂苷對應的英文化學名為ursolicacid3-O-β-D-glucopyranosyl(1″→2′)(β-D-glucopyranosyl(1″′→3′))-β-D-glucuronopyranosyl-28-O-β-D-glucopyranoside。本專利技術的第二個目的是提供從馬尾松枝椏中清潔高效制備烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的工藝。本專利技術的技術方案概述如下：下述結構式為烏蘇烷型三萜皂苷化合物烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷：從馬尾松枝椏中清潔高效制備烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的工藝，包括如下步驟：步驟1：取干燥并粉碎的馬尾松枝椏，按質量比為1∶1～1∶6加入體積百分濃度為80％～99％的二氯甲烷水溶液，常溫提取或加熱提取或超聲波輔助提取1～5次，每次1～100h，過濾，濾液減壓濃縮至原體積的2％～10％，得粗提物；步驟2：加入粗提物質量1～5倍的水，攪拌，加入粗提物質量1～5倍的正丁醇萃取1～5次，分離掉正丁醇層，向剩余水層中加入粗提物質量1～5倍的石油醚萃取1～5次，分離掉石油醚層，向剩余水層中加入粗提物質量1～5倍的乙酸乙酯萃取1～5次，分離出乙酸乙酯層，將乙酸乙酯層減壓濃縮得乙酸乙酯萃取相；步驟3：乙酸乙酯萃取相經硅膠柱層析或SephadexLH-20柱層析之至少一種并結合ODS真空柱層析制備得到烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷粗分；步驟4：烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷粗分經重結晶精制后得到烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。實驗表明本專利技術的烏蘇烷型三萜皂苷的分子式為C54H86O24，化學名為烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，其對應的英文名為ursolicacid3-O-β-D-glucopyranosyl(1″→2′)(β-D-glucopyranosyl(1″′→3′))-β-D-glucuronopyranosyl-28-O-β-D-glucopyranoside。本專利技術的烏蘇烷型三萜皂苷化合物為微黃色，其熔點為198～200℃，旋光度為-10.6°(c，0.5，MeOH)。MALDI-TOFMS：[M+Na]+為m/z1141，[M+K]+為m/z1157，[2M+Na]+為m/z2259。表1.烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的1H(400MHz)及13CNMR(100MHz)數據(DMSO-d6)本專利技術提出的制備工藝具有簡單規范易于操作、制備過程清潔高效、制備產物成分不被破壞且純度高、原料成本低等優點。具體實施方式參考下列實施例將更全面、更容易地理解本專利技術，給出實施例是為了更清楚地闡明本專利技術，而不是以任何方式限制本專利技術。實施例1：從馬尾松枝椏中制備烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷步驟1：取干燥并粉碎的馬尾松枝椏，按質量比為1∶5加入體積百分濃度為85％的二氯甲烷水溶液，常溫提取4次，每次96h，過濾，濾液減壓濃縮至原體積的3％，得粗提物；步驟2：加入粗提物質量4倍的水，攪拌，加入粗提物質量4倍的正丁醇萃取2次，分離掉正丁醇層，向剩余水層中加入粗提物質量4倍的石油醚萃取2次，分離掉石油醚層，向剩余水層中加入粗提物質量4倍的乙酸乙酯萃取2次，分離出乙酸乙酯層，將乙酸乙酯層減壓濃縮得乙酸乙酯萃取相；步驟3：乙酸乙酯萃取相經硅膠柱層析并結合ODS真空柱層析制本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種烏蘇烷型三萜皂苷化合物烏蘇酸3?O?β?D?吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β?D?吡喃葡萄糖基(1″′→3′))?β?D?吡喃葡萄糖醛酸基?28?O?β?D?吡喃葡萄糖苷的制備工藝，其特征是包括如下步驟：步驟1：取干燥并粉碎的馬尾松枝椏，按質量比為1∶1～1∶6加入體積百分濃度為80％～99％的二氯甲烷水溶液，常溫提取或加熱提取或超聲波輔助提取1～5次，每次1～100h，過濾，濾液減壓濃縮至原體積的2％～10％，得粗提物；步驟2：加入粗提物質量1～5倍的水，攪拌，加入粗提物質量1～5倍的正丁醇萃取1～5次，分離掉正丁醇層，向剩余水層中加入粗提物質量1～5倍的石油醚萃取1～5次，分離掉石油醚層，向剩余水層中加入粗提物質量1～5倍的乙酸乙酯萃取1～5次，分離出乙酸乙酯層，將乙酸乙酯層減壓濃縮得乙酸乙酯萃取相；步驟3：乙酸乙酯萃取相經硅膠柱層析或Sephadex?LH?20柱層析之至少一種并結合ODS真空柱層析制備得到烏蘇酸3?O?β?D?吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β?D?吡喃葡萄糖基(1″′→3′))?β?D?吡喃葡萄糖醛酸基?28?O?β?D?吡喃葡萄糖苷粗分；步驟4：烏蘇酸3?O?β?D?吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β?D?吡喃葡萄糖基(1″′→3′))?β?D?吡喃葡萄糖醛酸基?28?O?β?D?吡喃葡萄糖苷粗分經重結晶精制后得到烏蘇酸3?O?β?D?吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β?D?吡喃葡萄糖基(1″′→3′))?β?D?吡喃葡萄糖醛酸基?28?O?β?D?吡喃葡萄糖苷。...

【技術特征摘要】
1.一種烏蘇烷型三萜皂苷化合物烏蘇酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1″→2′)(β-D-吡喃葡萄糖基(1″′→3′))-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的制備工藝，其特征是包括如下步驟：步驟1：取干燥并粉碎的馬尾松枝椏，按質量比為1∶1～1∶6加入體積百分濃度為80％～99％的二氯甲烷水溶液，常溫提取或加熱提取或超聲波輔助提取1～5次，每次1～100h，過濾，濾液減壓濃縮至原體積的2％～10％，得粗提物；步驟2：加入粗提物質量1～5倍的水，攪拌，加入粗提物質量1～5倍的正丁醇萃取1～5次，分離掉正丁醇層，向剩余水層中加入粗提物質量1～5倍的石油醚萃取1～5次，分離掉石油醚層，向剩余水層中加入粗提物質量1～5倍的乙酸乙酯萃取1～5次，分離出乙酸乙酯層，將乙酸乙酯層減壓濃縮得乙酸乙酯萃取相；步驟3：乙酸乙酯萃取相經硅膠柱層析或SephadexLH-20柱層析之至少一種并結合ODS真空柱層析制備得到烏...

【專利技術屬性】
技術研發人員：司傳領，胡立球，高月，
申請(專利權)人：天津科技大學，
類型：發明
國別省市：天津,12