一種羅漢果醇的提純制備方法，其特征在于，包括如下步驟： ?。ǎ保┫葘⒘_漢果粉碎，加入乙醇回流提取得醇浸膏?！ 。ǎ玻⒉襟E（１）中的醇浸膏懸浮于水，乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯浸膏，取母液?！ 。ǎ常┠敢褐屑尤臌}酸溶液和乙酸乙酯，加熱進行酸水解；水解后分取乙酸乙酯層，用堿液調節至中性，分離乙酸乙酯，減壓回收溶劑，得到含羅漢果醇的浸膏?！ 。ǎ矗⒉襟E（３）中的含羅漢果醇的浸膏進行硅膠柱層析，氯仿洗脫，回收氯仿，棄去氯仿洗脫物；繼續用氯仿－甲醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，得羅漢果醇粗品。 ?。ǎ担┤×_漢果醇粗品進行重結晶，即得純度大于９５％以上的羅漢果醇。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于高純度物質的提純制備方法，具體說是一種。
技術介紹
羅漢果醇為葫蘆烷型四環三萜類化合物，目前僅局限分布在葫蘆科植物羅漢果Momordica grosvenori Swingle的干燥果實中。其結構式如下圖所示 羅漢果醇為羅漢果屬植物的特征性成分，高純度的羅漢果醇可作為化學對照品用于羅漢果藥材及含羅漢果制劑的鑒別及質量控制。羅漢果醇具有抗腫瘤等藥理作用，同時羅漢果醇可通過結構修飾合成高甜度的羅漢果苷，如羅漢果苷V、羅漢果苷IV等一系列甜味劑，因此制備羅漢果醇具有重要意義。羅漢果醇雖然存在于羅漢果中，但含量低微，難以分離純化和大量制備。如直接從羅漢果中分離羅漢果醇，則工藝復雜，收率低，成本高，難以工業化生產。經對現有技術文獻檢索發現，《農業與食品化學》(《J Agric Food Chem.》)于2002年11月，6710頁-6715頁，名稱為“羅漢果葫蘆烷型皂苷及其他三萜類成分對促癌劑12-O-十四?；?佛波醇-13-乙酸酯誘導的早期EB病毒抗原的抑制作用”(“Inhibitory effects of cucurbitane glycosides and other triterpenoids fromthe fruit of Momordica grosvenori on epstein-barr virus early antigen induced bytumor promoter 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate”)公開了一種從羅漢果直接分離羅漢果醇的方法，羅漢果用99％的乙醇回流提取后得醇提物，醇提物用乙酸乙酯萃取，萃取物經大孔樹脂層析后再用制備型高效液相分離后得到羅漢果醇。這種方法收率非常低，不到十萬分之五，且操作繁瑣，成本高，不利于大量制備羅漢果醇。
技術實現思路
本專利技術的目的在于克服現有技術中的不足，提供一種，通過酸水解制備高純度羅漢果醇的簡便方法，具有純度高、得率高、工藝簡單、成本低等優點。本專利技術是通過以下技術方案實現的，包括如下步驟(1)先將羅漢果粉碎，加入70％～95％的乙醇回流提取得醇浸膏。(2)將步驟(1)中的醇浸膏懸浮于水，乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯浸膏，取母液。(3)母液中加入鹽酸溶液和乙酸乙酯，加熱進行酸水解；水解后分取乙酸乙酯層，用堿液調節至中性，分離乙酸乙酯，減壓回收溶劑，得到含羅漢果醇的浸膏。(4)將步驟(3)中的含羅漢果醇的浸膏進行硅膠柱層析(硅膠用量為浸膏重量的50～100倍)，氯仿洗脫，回收氯仿，棄去氯仿洗脫物；繼續用氯仿-甲醇(100∶2～100∶5)洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，得羅漢果醇粗品。(5)取羅漢果醇粗品進行重結晶，即得純度大于95％以上的羅漢果醇。其中中和用堿可選用NaOH、碳酸鈉或氨水。鹽酸水解時其濃度為5％～15％。本專利技術所得化合物為白色鱗片狀結晶或白色針狀結晶。本專利技術有益效果(1)通過用乙醇從羅漢果中提取總苷，然后通過酸水解，水解液用乙酸乙酯抽提得到苷元，然后將苷元通過一次硅膠柱層析的方法就可得到高純度羅漢果醇。采用上述方法分離制備的羅漢果醇，純度高，均在95％以上；工藝簡便、得率高，可達1％以上。(2)采用乙醇加熱回流提取的方法，無毒副作用且溶劑可回收利用，同時也提高了提取的效率。(3)采用乙酸乙酯萃取的方法既去除了提取物中大部分脂溶性成分(如油脂、蠟質、黃酮)，乙酸乙酯又可回收反復使用，節約了成本。(4)水解時加入乙酸乙酯，使水解后產生的目標產物羅漢果醇及時進入乙酸乙酯層，既避免了長時間與酸接觸可能產生的化學變化，同時又使水解和萃取兩步操作一步完成，大大簡化了工藝。同時加入乙酸乙酯萃取，也避免了水解液中大量糖分的干擾，因而通過一次常壓硅膠柱層析即可得到純品。(5)采用去雜后的水溶液進行酸水解，大大提高的羅漢果醇的收率。具體實施例方式下面對本專利技術的實施例作詳細說明本實施例在以本專利技術技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但本專利技術的保護范圍不限于下述的實施例。實施例1本實施例1是在以下實施條件和技術要求條件下實施的1)羅漢果干果100g，粉碎成極粗粉，加入600mL 70％的工業乙醇回流提取3h，濾過，濾液回收乙醇(可再次用于藥材提取)，得醇浸膏9.5g。2)取醇浸膏，加入100mL的水懸浮，然后用50mL水體積的水飽和的乙酸乙酯萃取，分離乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯(可再次用于萃取)，得乙酸乙酯浸膏1.1g。3)乙酸乙酯萃取后的水溶液加入鹽酸溶液使鹽酸的濃度達5％，然后加入乙酸乙酯100mL，加熱回流8h。冷卻至室溫，分取乙酸乙酯液，向乙酸乙酯液中加入NAOH溶液，調節pH至7后，分離乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯(可反復使用)，得含羅漢果醇的浸膏1.9g。4).將含羅漢果醇的浸膏進行硅膠柱層析(硅膠300-400目，用量95g；(柱直徑3.5cm，干法裝柱，干法上樣)，800mL氯仿洗脫，回收氯仿(可反復使用)，棄去氯仿洗脫物；1500mL氯仿-甲醇(100∶2)洗脫，流速5mL/min，收集洗脫液，減壓回收溶劑，得羅漢果醇粗品1.2g。5)羅漢果醇粗品用甲醇重結晶1次，得羅漢醇針狀結晶950mg，經檢驗其純度為97.1％。實施例2本實施例2是在以下實施條件和技術要求條件下實施的1)羅漢果干果100g，粉碎成粗粉，加入800mL 95％的工業乙醇回流提取6h，濾過，濾液回收乙醇(可再次用于藥材提取)，得浸膏。重復上述操作，合并兩次提取所得浸膏，得醇浸膏17.2g。2)取醇浸膏，加入200mL的水懸浮，然后用150mL的水飽和的乙酸乙酯萃取，分離乙酸乙酯層，回收乙酸乙酯(可再次用于萃取)，得浸膏。重復上述操作1次，合并兩次萃取所得浸膏，得乙酸乙酯浸膏2.2g。3)乙酸乙酯萃取后的水溶液加入鹽酸溶液使鹽酸的濃度達15％，然后加入乙酸乙酯100mL，加熱回流4h。冷卻至室溫，分取乙酸乙酯液，向乙酸乙酯液中加入碳酸鈉溶液，調節pH至7后，分離乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯(可反復使用)，得含羅漢果醇的浸膏2.7g。4)將含羅漢果醇的浸膏進行硅膠柱層析(硅膠100-200目，用量為270g，柱直徑4.5cm，濕法裝柱，干法上樣)，1000mL氯仿洗脫，回收氯仿(可反復使用)，棄去氯仿洗脫物；1200mL氯仿-甲醇(100∶5)洗脫，流速8mL/min，收集洗脫液，減壓回收溶劑，得羅漢果醇粗品1.7g。5)取羅漢果醇粗品用丙酮重結晶1次，得鱗片狀羅漢果醇結晶1260mg，經檢驗其純度為99.1％。實施例3本實施例3是在以下實施條件和技術要求條件下實施的1)羅漢果干果100g，粉碎成極粗粉，加入750mL 80％的工業乙醇回流提取4h，濾過，濾液回收乙醇(可再次用于藥材提取)，得浸膏。重復上述操作1次，合并兩次提取所得浸膏，得醇浸膏13.0g。2)取醇浸膏，加入100mL的水懸浮，然后用100mL的水飽和的乙酸乙酯萃取，分離乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯(可再次用于萃取)，得浸膏。重復上述操作1次，合并兩次萃取所得浸膏，得乙酸乙酯浸膏1.6g。3)乙酸乙酯萃取后的水溶液加入鹽酸溶液使鹽酸的濃度達10％，然后加入乙酸乙酯100mL，加熱回流6h。冷卻至室溫，本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種羅漢果醇的提純制備方法，其特征在于，包括如下步驟：（１）先將羅漢果粉碎，加入乙醇回流提取得醇浸膏。（２）將步驟（１）中的醇浸膏懸浮于水，乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯浸膏，取母液。（３）母液中加入鹽酸溶液和乙酸乙酯，加熱進行酸水解；水解后分取乙酸乙酯層，用堿液調節至中性，分離乙酸乙酯，減壓回收溶劑，得到含羅漢果醇的浸膏。（４）將步驟（３）中的含羅漢果醇的浸膏進行硅膠柱層析，氯仿洗脫，回收氯仿，棄去氯仿洗脫物；繼續用氯仿－甲醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，得羅漢果醇粗品。（５）取羅漢果醇粗品進行重結晶，即得純度大于９５％以上的羅漢果醇。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：李曉波，王夢月，
申請(專利權)人：上海交通大學，
類型：發明
國別省市：31
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