一種從柿葉中提取活性成分熊果酸的方法技術

本發明專利技術公開了一種從柿葉中提取活性成分熊果酸的方法。它是將粉碎過的柿葉用低極性溶劑脫去脂溶性成分，脫脂后的柿葉粉用中等極性的溶劑浸取，回收溶劑得到黃綠色浸取物，該浸取物用低極性溶劑脫去脂溶性成分后，溶于低碳鏈醇中用活性炭脫色，過濾，濾液經回收溶劑得到熊果酸粗提物，熊果酸粗提物再用低碳鏈醇重結晶幾次后得到無色針狀結晶的熊果酸精品。本發明專利技術所用原料廉價易得，對環境基本不產生污染，工藝簡單易行、快捷，所獲得的熊果酸成本較低、純度高，所以適合工業規模化生產。（*該技術在2024年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬天然藥物領域，尤其涉及。
技術介紹
柿科(the family Ebenaceae)柿屬植物，全世界總共有240多種，它們主要廣泛地分布于熱帶有亞熱帶地區，溫帶偶有分布。我國大約有56種，產于西南部至東南部，北至遼寧(侯寬昭編，中國種子植物科屬詞典，第二版，北京科技出版社，1984，159)。此專利技術所用柿葉，是柿樹的干燥葉，其味苦、酸、澀，性涼，具有清肺止咳、涼血、降血壓之功效。主要用于咳喘、肺氣腫、各種內出血、高血壓等病癥。現代研究表明，柿葉含有豐富的黃酮類、鞣質、樹脂、維生素C、內脂香豆素類、揮發油及熊果酸、齊墩果酸等三萜酸，世界各地的柿葉都含有熊果酸(Row L.Ramachandra et al，Indian Journal of chemistry，1969，7204-206；Mallavadhani U.V.et al，Biochemical Systematics and Ecology，1998，26941-942；甄漢深等，中藥材，2001，24(3)182；Mallavadhani U.V.et al，Pharmaceutical Biology，2001，39(1)20-24；Chen Guang et al，Clinica ChimicaActa 2002，32011-16)。熊果酸具有廣泛的藥用價值(Liu Jie，Journal of Ethnopharmacology，1995，4957-68)，如抗高血壓、抗動脈粥樣硬化、抗氧化等作用(Somova L.I.etal，Journal of Ethnopharmacology，2003，84299-305)，且它對多種致癌細胞具有細胞毒、誘導分化及抗血管形成作用，其防癌抗癌作用已引起重視，成為現代腫瘤藥研究的新熱點(Chiang Lien-Chai et al，The American Journal ofChinese Medicine，2003，31(1)37-46；夏國豪等，國外醫學腫瘤學分冊，2002，29(6)420-422)，熊果酸也有可能成為抗HIV的潛在藥物(Quéré Luc et al，Biochemical and Biophysical Research Communications 1996，227484-488)。熊果酸(Ursolic acid)又名烏蘇酸或烏索酸，屬三萜類化合物，分子式為C30H18O3，化學名稱為3β-羥基-熊果烷-12-烯-28-羧酸，為無色針狀晶體。熊果酸溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮等，易溶于1，4-二氧六環、吡啶，不溶于水及石油醚。
技術實現思路
本專利技術目的在于提供一種簡單、低成本、高產率、較適合工業生產的從柿葉中提取活性成分熊果酸的方法。一種從柿葉中提取熊果酸的方法將粉碎過的柿葉用低極性溶劑脫去脂溶性成分，脫脂后的柿葉粉用中等極性的溶劑浸取，回收溶劑得到黃綠色浸取物，該浸取物用低極性溶劑脫去脂溶性成分后，溶于低碳鏈醇中用活性炭脫色，過濾，濾液經回收溶劑得到熊果酸粗提物，熊果酸粗提物再用低碳鏈醇重結晶幾次后得到無色針狀結晶的熊果酸精品。另一種從柿葉中提取熊果酸的方法將粉碎過的柿葉用低碳鏈醇浸取，回收溶劑得到浸膏，浸膏用低極性溶劑脫脂后再用中等極性溶劑浸取，回收溶劑得到浸取物，該浸取物用低極性溶劑脫去脂溶性成分后，溶于低碳鏈醇中用活性炭脫色，過濾，濾液經回收溶劑得到白色的熊果酸粗提物，熊果酸粗提物再用低碳鏈醇重結晶幾次可得到無色針狀結晶的熊果酸精品又一種從柿葉中提取熊果酸的方法將粉碎過的柿葉用低極性溶劑脫去脂溶性成分，脫脂后的柿葉粉用中等極性的溶劑浸取，回收溶劑得到黃綠色浸取物，該浸取物用低極性溶劑脫去脂溶性成分后，溶于低碳鏈醇中用活性炭脫色，過濾，濾液經回收溶劑得到熊果酸粗提物，熊果酸粗品用低碳鏈醇溶解，濃縮，加堿溶液調pH至10～11，再活性炭脫色，過濾，濾液加酸溶液調pH至1～2，并過濾，干燥，再用低碳鏈醇重結晶就可得到熊果酸精品。或者將粉碎過的柿葉用低碳鏈醇浸取，回收溶劑得到浸膏，浸膏用低極性溶劑脫脂后再用中等極性溶劑浸取，回收溶劑得到浸取物，該浸取物用低極性溶劑脫去脂溶性成分后，溶于低碳鏈醇中用活性炭脫色，過濾，濾液經回收溶劑得到白色的熊果酸粗提物，熊果酸粗品用低碳鏈醇溶解，濃縮，加堿溶液調pH至10～11，再活性炭脫色，過濾，濾液加酸溶液調pH至1～2，并過濾，干燥，再用低碳鏈醇重結晶就可得到熊果酸精品。本專利技術的優點是所用柿葉在我國分布廣泛，但柿葉往往被當作廢料扔掉或燒掉，因此本專利技術柿葉原料易得；所用各種化學試劑都很常見，容易大批量購買；所用有機溶劑都可回收再用，提取后柿葉廢渣可用作肥料，又一種從柿葉中提取熊果酸的方法中，過濾后得到的酸液可以作為下一批次生產所需的酸溶液，因此“三廢”處理量小且容易，對環境基本上不產生污染；采用脫脂過程，使得到的浸取物因含很少脂類物質而不會產生粘稠狀物，為后續步驟處理帶來了方便；采用脫色過程，使粗產品的中熊果酸純度進一步提高，有利于后續步驟中形成晶體且使晶體純度提高；文獻方法中從柿葉里提取熊果酸都用到柱色譜方法，而本專利技術不需用柱色譜技術，因此本專利技術操作簡單，快捷。綜上所述，本專利技術所用原料廉價易得，對環境基本不產生污染，工藝簡單易行、快捷，所獲得的熊果酸成本較低、純度高，所以適合工業規模化生產。具體實施例方式實施例1將柿葉(采自浙江省)自然晾干，粉碎，取柿葉粉，用8倍量石油醚(沸點60-90℃)4次脫去脂溶性成分(每次2小時，60℃，800r/min)。脫脂后的柿葉用8倍量乙酸乙酯浸取3次(每次3小時，70℃，800r/min)，常壓蒸餾回收乙酸乙酯得到黃綠色固體。乙酸乙酯浸取物用20倍量的石油醚(沸點60-90℃)脫去脂溶性成分(4次，每次3小時，60℃，800r/min)，再將脫脂后的固體溶于乙醇中用活性炭脫色4次(每次1小時，70℃，500r/min)至濾液無色，濾液減壓蒸餾回收乙醇后得到白色的熊果酸粗提物。熊果酸粗提物用無水乙醇重結晶得到無色針狀結晶的熊果酸精品，得率約0.51％(以干燥柿葉計)。實施例2將柿葉自然晾干，粉碎，取柿葉粉，用4倍量正己烷4次脫去脂溶性成分(每次2小時，60℃，800r/min)。脫脂后的柿葉用8倍量二氯甲烷室溫浸取3次(每次8小時，800r/min)，常壓蒸餾回收二氯甲烷得到黃綠色固體。二氯甲烷浸取物在索氏抽提裝置中用正己烷脫去脂溶性成分，再將脫脂后的固體溶于甲醇中用活性炭脫色4次(每次2小時，室溫，500r/m)至濾液無色，濾液減壓蒸餾回收甲醇后得到白色的熊果酸粗提物。熊果酸粗提物用甲醇重結晶得到無色針狀結晶的熊果酸精品，得率約0.42％(以干燥柿葉計)。實施例3將柿葉自然晾干，粉碎，取柿葉粉，用8倍量環己烷4次脫去脂溶性成分(每次3小時，70℃，500r/m)。脫脂后的柿葉用三氯甲烷在滲漉裝置中提取，減壓蒸餾回收三氯甲烷得到黃綠色固體。三氯甲烷浸取物在索氏抽提裝置中用環己烷脫去脂溶性成分，再將脫脂后的固體溶于乙醇中用活性炭脫色4次(每次1小時，70℃，400r/min)至濾液無色，濾液減壓蒸餾回收乙醇后得到白色的熊果酸粗提物。熊果酸粗提物用乙醇重結晶得到無色針狀結晶的本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種從柿葉中提取活性成分熊果酸的方法，其特征在于：將粉碎過的柿葉用低極性溶劑脫去脂溶性成分，脫脂后的柿葉粉用中等極性的溶劑浸取，回收溶劑得到黃綠色浸取物，該浸取物用低極性溶劑脫去脂溶性成分后，溶于低碳鏈醇中用活性炭脫色，過濾，濾液經回收溶劑得到熊果酸粗提物，熊果酸粗提物再用低碳鏈醇重結晶幾次后得到無色針狀結晶的熊果酸精品。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：何潮洪，范杰平，
申請(專利權)人：浙江大學，
類型：發明
國別省市：86[中國|杭州]