一種超臨界二氧化碳提取斑蝥素的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種超臨界二氧化碳提取斑蝥素的方法，由如下步驟實(shí)現(xiàn)：原料預(yù)處理、粉碎、浸泡，將浸泡物投入超臨界二氧化碳萃取釜中，調(diào)節(jié)萃取溫度，萃取壓力，并加入助溶劑進(jìn)行萃取，調(diào)節(jié)助溶劑流速，萃取時間；在收集釜出口收集萃取物，將上述萃取物減壓濃縮蒸去部分溶劑，濃縮液冷卻析晶得到斑蝥素粗品，粗品用石油醚加熱溶解，過濾，除去不溶物，濾液冷卻析晶，即得到斑蝥素。本發(fā)明專利技術(shù)采用超臨界二氧化碳提取斑蝥素，萃取能力強(qiáng)，提取率高，提取時間快，工藝流程簡單，操作方便，環(huán)境污染小，是一種高效的提取、分離、制備及濃縮的新方法。

Method for extracting cantharidin by supercritical carbon dioxide

The invention relates to a method for supercritical carbon dioxide extraction of cantharidin, achieved by the following steps: pretreatment of raw materials, crushing, soaking, soaking material into supercritical carbon dioxide extraction kettle, adjusting the extraction temperature, extraction pressure, and adding auxiliary solvent extraction, adjusting the solvent flow rate, extraction time; in the collection tank export collection extract, the extract concentrated part of solvent is steamed, concentrated liquid cooling crystallization by cantharidin crude, crude petroleum ether dissolved, filtered to remove the insoluble substance, filtrate cooling crystallization, namely to cantharidin. The invention adopts the supercritical carbon dioxide extraction cantharidin, extraction ability, high extraction rate, extraction time, simple process, convenient operation, small environmental pollution, is a kind of efficient extraction, separation, preparation and concentration of the new method.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種超臨界二氧化碳提取斑蝥素的方法
：本專利技術(shù)涉及一種超臨界二氧化碳提取斑蝥素的方法，屬于中藥開發(fā)
，應(yīng)用于芫菁科昆蟲南方大斑蝥或黃黑小斑蝥中斑蝥素的提取。
技術(shù)介紹
：斑蝥為節(jié)肢動物門昆蟲綱芫菁科(Meloidae)昆蟲南方大斑蝥MylabrisphalerataPallas或黃黑小斑蝥MylabriscichoriiL.的干燥蟲體，具有消腫逐瘀、散結(jié)消徵、攻毒蝕瘡等功效。斑蝥中的主要有效成分為斑蝥素，是特異性的絲氨酸(PP1)和蘇氨酸(PP2A)蛋白磷酸酶抑制劑，在癌細(xì)胞增殖和分化等活動中起著重要的調(diào)控作用，具有抗腫瘤，抗病毒，升高白細(xì)胞，免疫增強(qiáng)等多種藥效。隨著斑蝥素被越來越廣泛地利用，人們對其研究逐步深入，目前斑蝥素提取方法多數(shù)使用乙醇、氯仿、甲苯等直接冷浸提取或濃鹽酸酸化蟲體后用丙酮、二氯甲烷回流提取，以上方法工序復(fù)雜、提取率低、周期長、污染大、危害人體、污染環(huán)境。而超臨界二氧化碳萃取技術(shù)具有提取溫度低，提取效率高，周期短，污染少，成本低等優(yōu)點(diǎn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
：本專利技術(shù)目的是針對目前斑蝥素提取方法技術(shù)不足，提供了一種超臨界二氧化碳提取斑蝥素的方法，其包括如下步驟：(1)原料預(yù)處理：從斑蝥藥材中挑撿出雜質(zhì)、霉變部分，剩余的用自來水洗凈，自然晾干；(2)粉碎：將上述(1)中晾干的斑蝥藥材進(jìn)行粉碎、過篩；(3)浸泡：將上述(2)所得藥材精密稱量放入容量瓶中加入夾帶劑浸泡；藥材與夾帶劑的質(zhì)量體積比為1:5～10。(4)超臨界二氧化碳萃取：將上述(3)中的樣品投入超臨界二氧化碳萃取釜中，調(diào)節(jié)萃取溫度為30～40℃，萃取壓力為10～20MPa，并加入上述(3)所述的夾帶劑作為助溶劑進(jìn)行萃取，助溶劑流速為2～10g/min，萃取時間2～3h；在收集釜出口收集提取物；(5)濃縮、析晶、提純：將上述(4)提取物減壓濃縮蒸去部分溶劑，濃縮液冷卻析晶得到斑蝥素粗品，粗品用石油醚加熱溶解，過濾，除去不溶物，濾液冷卻析晶，即得到斑蝥素；所述的步驟(3)、(4)所用的夾帶劑或助溶劑是體積比為10～70％的丙酮溶液。所述的步驟(2)粉碎、過篩所用的篩目次為20～30目。所述的步驟(5)中，減壓濃縮壓力為4～8MPa、濾液冷卻析晶溫度為40～50℃。本專利技術(shù)所述的超臨界二氧化碳提取斑蝥素的方法，與現(xiàn)有技術(shù)相比能夠獲得以下積極效果：(1)本專利技術(shù)超臨界二氧化碳提取斑蝥素萃取能力強(qiáng)，提取率高，用超臨界二氧化碳提取中藥有效成分，在最佳工藝條件下，能將所需提取的成分幾乎完全提取，從而大大提高產(chǎn)品收率及資源的利用率。(2)本專利技術(shù)超臨界二氧化碳提取斑蝥素萃取的操作溫度低，能較完好地保存中藥有效成分不被破壞，不發(fā)生次生化。(3)本專利技術(shù)超臨界二氧化碳提取斑蝥素提取時間快，生產(chǎn)周期短，超臨界CO2提取循環(huán)一開始，分離便開始進(jìn)行，一般提取10分鐘就有成分分離析出，2～4小時左右便可完全提取。(4)本專利技術(shù)超臨界二氧化碳提取斑蝥素操作參數(shù)容易控制，因此能保證有效成分及產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。(5)本專利技術(shù)超臨界二氧化碳提取斑蝥素，其中超臨界二氧化碳具有抗氧化、滅菌作用，有利于保證和提高產(chǎn)品的質(zhì)量。(6)本專利技術(shù)超臨界二氧化碳提取斑蝥素工藝流程簡單，操作方便，節(jié)省勞動力和大量有機(jī)溶劑，減少三廢污染，是一種高效的提取、分離、制備及濃縮的新方法。具體實(shí)施方式：實(shí)施例1最佳因素水平下超臨界二氧化碳提取斑蝥素試驗方法：稱取斑蝥藥材，從斑蝥藥材中挑撿出雜質(zhì)、霉變部分，剩余的用自來水洗凈，自然晾干；將晾干的斑蝥藥材進(jìn)行粉碎、過篩，篩目次為30目；精密稱取斑蝥藥材粉末100g放入容量瓶中，按樣品與夾帶劑的質(zhì)量體積比為1:6比例加入夾帶劑浸泡3h，夾帶劑是體積比為50％的丙酮溶液，浸泡好的樣品放入超臨界裝置中的萃取釜中，進(jìn)行萃取前，先將二氧化碳制冷液化，設(shè)置萃取壓力20MPa，溫度30℃，調(diào)節(jié)二氧化碳進(jìn)入收集釜的入口閥門開度，將收集釜的壓力控制在10MPa，同時溫度控制在30℃，設(shè)置助溶劑的流速為5g/min，二氧化碳流速為20g/min。助溶劑由高壓泵加入到萃取釜中，助溶劑是體積比為50％的丙酮溶液，待萃取壓力和溫度達(dá)到預(yù)設(shè)值后，開始計時，萃取2h后，停止萃取，關(guān)閉二氧化碳?xì)馄浚蜷_手動排氣閥進(jìn)行泄壓，在收集釜出口收集萃取物，將上述萃取物減壓(壓力為5MPa)濃縮蒸去部分溶劑，濃縮液冷(溫度為40℃)卻析晶得到斑蝥素粗品，粗品用石油醚加熱溶解，過濾，除去不溶物，濾液冷卻析晶，即得到斑蝥素。分析計算得出斑蝥素提取含量達(dá)2.8％。實(shí)施例2一般因素水平下超臨界二氧化碳提取斑蝥素試驗方法：稱取斑蝥藥材，從斑蝥藥材中挑撿出雜質(zhì)、霉變部分，剩余的用自來水洗凈，自然晾干；將晾干的斑蝥藥材進(jìn)行粉碎、過篩，篩目次為20目；精密稱取斑蝥藥材粉末100g放入容量瓶中，按樣品與夾帶劑的質(zhì)量體積比為1:10比例加入夾帶劑浸泡2h，夾帶劑是體積比為30％的丙酮溶液，浸泡好的樣品放入超臨界裝置中的萃取釜中，進(jìn)行萃取前，先將二氧化碳制冷液化，設(shè)置萃取壓力15MPa，溫度30℃，調(diào)節(jié)二氧化碳進(jìn)入收集釜的入口閥門開度，將收集釜的壓力控制在20MPa，同時溫度控制在30℃，設(shè)置助溶劑的流速為2g/min，二氧化碳流速為20g/min。助溶劑由高壓泵加入到萃取釜中，助溶劑是體積比為30％的丙酮溶液，待萃取壓力和溫度達(dá)到預(yù)設(shè)值后，開始計時，萃取3h后，停止萃取，關(guān)閉二氧化碳?xì)馄浚蜷_手動排氣閥進(jìn)行泄壓，在收集釜出口收集萃取物，將上述萃取物減壓(壓力為8MPa)濃縮蒸去部分溶劑，濃縮液冷卻(溫度為50℃)析晶得到斑蝥素粗品，粗品用石油醚加熱溶解，過濾，除去不溶物，濾液冷卻析晶，即得到斑蝥素。分析計算得出斑蝥素提取含量為1.46％。實(shí)施例3較差因素水平下超臨界二氧化碳提取斑蝥素試驗方法：稱取斑蝥藥材，從斑蝥藥材中挑撿出雜質(zhì)、霉變部分，剩余的用自來水洗凈，自然晾干，將晾干的斑蝥藥材進(jìn)行粉碎、過篩，篩目次為40目；精密稱取斑蝥藥材粉末100g放入容量瓶中，按樣品與夾帶劑的質(zhì)量體積比為1:3比例加入夾帶劑浸泡3h，夾帶劑是體積比為30％的丙酮溶液，浸泡好的樣品放入超臨界裝置中的萃取釜中，進(jìn)行萃取前，先將二氧化碳制冷液化，設(shè)置萃取壓力20MPa，溫度30℃，調(diào)節(jié)二氧化碳進(jìn)入收集釜的入口閥門開度，將收集釜的壓力控制在10MPa，同時溫度控制在30℃，設(shè)置助溶劑的流速為5g/min，二氧化碳流速為20g/min。助溶劑由高壓泵加入到萃取釜中，助溶劑是體積比為50％的丙酮溶液，待萃取壓力和溫度達(dá)到預(yù)設(shè)值后，開始計時，萃取2h后，停止萃取，關(guān)閉二氧化碳?xì)馄浚蜷_手動排氣閥進(jìn)行泄壓，在收集釜出口收集萃取物，將上述萃取物減壓(壓力為5MPa)濃縮蒸去部分溶劑，濃縮液冷(溫度為40℃)卻析晶得到斑蝥素粗品，粗品用石油醚加熱溶解，過濾，除去不溶物，濾液冷卻析晶，即得到斑蝥素。分析計算得出斑蝥素提取含量為0.914％。實(shí)施例4傳統(tǒng)提取方法提取斑蝥素試驗方法：稱取斑蝥藥材，從斑蝥藥材中挑撿出雜質(zhì)、霉變部分，剩余的用自來水洗凈，自然晾干，將晾干的斑蝥藥材進(jìn)行粉碎、過篩，篩目次為30目；精密稱取斑蝥藥材粉末100g放入容量瓶中，往容量瓶中加入50％的丙酮溶液，所述斑蝥藥材粉末：丙酮溶液按質(zhì)量比為1:6，在常溫常壓下振搖5-10小時，抽濾獲本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種超臨界二氧化碳提取斑蝥素的方法，其特征在于，包括如下步驟：(1)原料預(yù)處理：從斑蝥藥材中挑撿出雜質(zhì)、霉變部分，剩余的用自來水洗凈，自然晾干；(2)粉碎：將上述(1)中晾干的斑蝥藥材進(jìn)行粉碎、過篩；(3)浸泡：將上述(2)所得藥材精密稱量放入容量瓶中加入夾帶劑浸泡；藥材與夾帶劑的質(zhì)量體積比為1:5～10。(4)超臨界二氧化碳萃取：將上述(3)中的樣品投入超臨界二氧化碳萃取釜中，調(diào)節(jié)萃取溫度為30～40℃，萃取壓力為10～20MPa，并加入上述(3)所述的夾帶劑作為助溶劑進(jìn)行萃取，助溶劑流速為2～10g/min，萃取時間2～3h；在收集釜出口收集提取物；(5)濃縮、析晶、提純：將上述(4)提取物減壓濃縮蒸去部分溶劑，濃縮液冷卻析晶得到斑蝥素粗品，粗品用石油醚加熱溶解，過濾，除去不溶物，濾液冷卻析晶，即得到斑蝥素；所述的步驟(3)、(4)所用的夾帶劑或助溶劑是體積比為10～70％的丙酮溶液。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種超臨界二氧化碳提取斑蝥素的方法，其特征在于，包括如下步驟：(1)原料預(yù)處理：從斑蝥藥材中挑撿出雜質(zhì)、霉變部分，剩余的用自來水洗凈，自然晾干；(2)粉碎：將上述(1)中晾干的斑蝥藥材進(jìn)行粉碎、過篩；(3)浸泡：將上述(2)所得藥材精密稱量放入容量瓶中加入夾帶劑浸泡；藥材與夾帶劑的質(zhì)量體積比為1:5～10。(4)超臨界二氧化碳萃取：將上述(3)中的樣品投入超臨界二氧化碳萃取釜中，調(diào)節(jié)萃取溫度為30～40℃，萃取壓力為10～20MPa，并加入上述(3)所述的夾帶劑作為助溶劑進(jìn)行萃取，助溶劑流速為2～10g/min，萃取時間2～3h...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：姜源明，劉偉，俸祥仁，趙武，孫建華，銀慧慧，黎書長，楊武寧，
申請(專利權(quán))人：廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：廣西,45