牙骨質(zhì)蛋白1/無定形磷酸鈣緩釋藥物及其制備方法、用途技術

本發(fā)明專利技術公開了一種藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物中牙骨質(zhì)蛋白1（CEMP?1）作為藥物活性成分，無定形磷酸鈣作為藥物載藥體系，所述藥物組合物包括：藥效學上有效量的牙骨質(zhì)蛋白1（CEMP?1）；無定形磷酸鈣；以及，用于包封無定形磷酸鈣的藥學上可接受的其他藥物載體。該藥物采用特殊的載藥體系，與其它磷酸鈣載藥體系相比，無定形磷酸鈣更適合骨組織修復與改建。本發(fā)明專利技術得到的藥物組合物具有高達97.8%的包封率，超過28天的緩釋效果。

Cementum protein 1/ amorphous calcium phosphate sustained release drug, preparation method and application thereof

The invention discloses a pharmaceutical composition, which is characterized in that the composition of cementum protein 1 (CEMP 1) as the active pharmaceutical ingredient, amorphous calcium phosphate as a drug delivery system, the pharmaceutical composition comprises: pharmacodynamics effective amount of cementum protein 1 (CEMP 1); amorphous phosphate calcium; and, for the other drug carrier for encapsulation of amorphous calcium phosphate and pharmaceutically acceptable. The drug uses a special drug delivery system, and compared with other calcium phosphate drug delivery systems, amorphous calcium phosphate is more suitable for bone tissue repair and reconstruction. The pharmaceutical composition obtained by the invention has a encapsulation efficiency of up to 97.8% and a sustained release effect over 28 days.

【技術實現(xiàn)步驟摘要】
牙骨質(zhì)蛋白1/無定形磷酸鈣緩釋藥物及其制備方法、用途
本專利技術屬于牙骨質(zhì)再生
，具體涉及一種牙骨質(zhì)蛋白1/無定形磷酸鈣緩釋藥物及其制備方法、用途。
技術介紹
牙齒脫落通常由各種口腔疾病和生理起因引起，包括齲齒、牙周病、損傷、遺傳病和老齡化(Amar2003，Philstrom2005，Kim2006)。掉牙可導致身體和精神的痛苦，其可降低個體的自尊和生活品質(zhì)(Amar2003，Philstrom2005，Kim2006)。許多形式的牙病和一些醫(yī)學病況如不受控的糖尿病提高掉牙的風險。對于無牙癥的治療，目前的選擇局限于使用牙齒移植物和/或常規(guī)的固定或可移動假體。盡管牙齒結構復雜，但是生物醫(yī)學工程技術的進展已產(chǎn)生兩種目前采用的牙齒再生方法。第一種方法基于組織工程，目標是通過在支架生物材料中接種干細胞使牙齒再生(Young2002，Duailibi2004，Honda2005)。該技術已顯示牙周組織再生的有希望的結果(Nakahara2006)。第二種方法試圖復制或模仿胚胎牙齒形成的發(fā)育過程(Nakahara2006)。該方法利用由小鼠胎兒采集的胚胎組織(牙齒上皮和牙齒間充質(zhì))并利用在胚胎中調(diào)節(jié)早期牙齒發(fā)育的原理(Ohazama2004，Hu2006，Nakao2007)。采用這些方法，在許多研究中，將生物工程化的牙胚移植到動物宿主的身體中，所述動物宿主通常為嚙齒動物，其中存在足夠的血流來提供必要的營養(yǎng)物和氧，以使組織形成最佳(Nakahara2006)。牙骨質(zhì)蛋白1(cementoblastoma-derivedprotein1,CEMP1)是一種新近從成牙骨質(zhì)細胞瘤中克隆出的牙骨質(zhì)蛋白亞型。研究表明，CEMP1的表達僅限于成牙骨質(zhì)細胞群體中，且可能在牙周膜細胞分化中起著重要作用，因此它成為牙骨質(zhì)特有的生物標記。學者們發(fā)現(xiàn)CEMP1能促進體外培養(yǎng)的細胞黏附、分化；在生物礦化過程中有促進磷酸八鈣(OCP)晶體成核的作用；在非骨形成細胞中CEMP1的表達具有誘導礦化結節(jié)結構形成、促進鈣沉積的能力。這些結果提示CEMP1在牙骨質(zhì)形成中可能存在誘導作用，可為實現(xiàn)生理性種植牙提供幫助。牙骨質(zhì)蛋白(cementumprotein，CEMP)1是一種新近發(fā)現(xiàn)的在牙骨質(zhì)發(fā)生過程中特異表達的產(chǎn)物，其1374bp大小的互補DNA(complementaryDNA，cDNA)序列包含的741bp大小的開放閱讀框可以編碼由247個氨基酸殘基組成的多肽。其開放閱讀框開始于336位點的翻譯起始位點(ATG)，終止密碼子(TGA)位于1077位點，前后分別是由335和295個核苷酸組成的非翻譯區(qū)。CEMP-1具有mgtsstdsqqaghrrcstsntsaenltclslpgspgktaplpgpaqagagqplpkgcaavkaevgipaphtsqevrihirrllswaapgacglrstpcalpqalpqarpcpgrwffpgcslptggaqtilslwtwrhflnwalqqreensgrarrvppvprtapvskgegshppqnsngekvktitpdvglhqsltsdptvavlrakrapeahpprscsgsltarvchmgvcqgqgdtedgrmtlmg的連續(xù)氨基酸序列。從基因序列上推斷，CEMP1是一種堿性蛋白質(zhì)(等電點9.73)，其相對分子質(zhì)量約2.59×104，不含信號肽。CEMP1含有大量的脯氨酸(11.3％)、甘氨酸(10.5％)、丙氨酸(10.1％)、絲氨酸(8.9％)、亮氨酸(8.1％)、蘇氨酸和精氨酸(各7.7％)，少量的色氨酸、天冬氨酸、異亮氨酸(2.0％)、苯丙氨酸(1.6％)，不含酪氨酸。通過翻譯后修飾分析(ExPASy)，預測的CEMP1基因產(chǎn)物包含2個N-糖基化位點(20和25位點)、1個環(huán)腺苷酸蛋白激酶磷酸化位點(14位點)、3個蛋白激酶C磷酸化位點(134、150和223位點)、5個酪蛋白激酶磷酸化位點(4、21、71、166和177位點)，6個潛在的酰化位點(2、124、190、220、230和234位點)，這些都可能與其蛋白質(zhì)的生物活性相關。用PSORTⅡ分析氨基酸序列顯示，CEMP1像核蛋白，但其沒有DNA結合基序。用NCBIBLAST軟件分析，沒有找到與其他蛋白質(zhì)有明顯意義的相似之處，但是其30～110氨基酸卻與α-Ⅰ型(48％)、Ⅺ(46％)、Ⅹ(40％)人膠原相似，然而CEMP1沒有膠原蛋白典型的甘氨酸-X-Y重復，故其不是膠原蛋白。目前尚未見適合臨床應用的具有牙骨質(zhì)誘導作用的組織工程材料出現(xiàn)。可控載藥技術可延長藥物釋放時間，以使藥物釋放與組織生長誘導需要相適應。有機試劑的使用在載體合成應用中較為成熟，然而，有機試劑往往會使藥物失去活性或者殘留時間長而造成毒副作用。基于以上的問題，本專利技術因此而來。
技術實現(xiàn)思路
本專利技術目的在于提供一種牙骨質(zhì)蛋白1/無定形磷酸鈣緩釋藥物，該藥物提供了一種藥物釋放與組織生長誘導能相適應的組織工程材料，解決了現(xiàn)有技術中牙齒骨質(zhì)修復再生等技術問題。為了解決現(xiàn)有技術中的這些問題，本專利技術提供的技術方案是：一種藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物包括：藥效學上有效量的牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)；無定形磷酸鈣；以及，用于包封無定形磷酸鈣的藥學上可接受的其他藥物載體。優(yōu)選的技術方案中，所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)0.1～30％；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共70～99.9％；優(yōu)選的，所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)0.1～25％；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共75～99.9％；優(yōu)選的，所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)0.1～20％；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共80～99.9％；優(yōu)選的，所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)0.1～15％；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共85～99.9％；最優(yōu)選的，所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)0.1～10％；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共90～99.9％。優(yōu)選的技術方案中，所述藥物組合物中牙骨質(zhì)蛋白1具有SEQIDNo：1的連續(xù)氨基酸序列。其中SEQIDNo：1為mgtsstdsqqaghrrcstsntsaenltclslpgspgktaplpgpaqagagqplpkgcaavkaevgipaphtsqevrihirrllswaapgacglrstpcalpqalpqarpcpgrwffpgcslptggaqtilslwtwrhflnwalqqreensgrarrvppvprtapvskgegshppqnsngekvktitpdvglhqsltsdptvavlrakrapeahpprscsgsltarvchmgvcqgqgdtedgrmtlmg。優(yōu)選的技術方案中，所述藥物組合物中其他藥物載體選自聚乙二醇(PEG)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、殼聚糖、葡聚糖、磷脂酰甘油；優(yōu)選的，所述其他藥物載體選自聚乙二醇(PEG)。優(yōu)選的技術方案中，所本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術保護點】
一種藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物包括：藥效學上有效量的牙骨質(zhì)蛋白1（CEMP?1）；無定形磷酸鈣；以及，用于包封無定形磷酸鈣的藥學上可接受的其他藥物載體。

【技術特征摘要】
1.一種藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物包括：藥效學上有效量的牙骨質(zhì)蛋白1（CEMP-1）；無定形磷酸鈣；以及，用于包封無定形磷酸鈣的藥學上可接受的其他藥物載體。2.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1（CEMP-1）0.1～30%；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共70～99.9%；優(yōu)選的，所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1（CEMP-1）0.1～25%；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共75～99.9%；優(yōu)選的，所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1（CEMP-1）0.1～20%；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共80～99.9%；優(yōu)選的，所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1（CEMP-1）0.1～15%；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共85～99.9%；最優(yōu)選的，所述藥物組合物以其組分的重量百分比含量計包括：牙骨質(zhì)蛋白1（CEMP-1）0.1～10%；無定形磷酸鈣和其他藥物載體共90～99.9%。3.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物中其他藥物載體選自聚乙二醇（PEG）、聚乳酸（PLA）、聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、殼聚糖、葡聚糖、磷脂酰甘油；優(yōu)選的，所述...

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：孫衛(wèi)斌，陳小鳳，苗雷英，
申請(專利權)人：南京市口腔醫(yī)院，南京大學，
類型：發(fā)明
國別省市：江蘇,32