靈芝糖肽產品及其生產方法和用途技術

本發明專利技術公開了一種靈芝糖肽產品及其生產方法和用途。本發明專利技術屬于真菌功能產品開發領域，特別是涉及靈芝糖肽產品及其生產方法。本發明專利技術的靈芝糖肽產品中糖肽含量占２０－４０％，其余部分為靈芝多糖。本發明專利技術產品可以做成膠囊或片劑形式。靈芝糖肽產品生產方包括：發酵液的培養，外加酶酶解，滅酶，均質處理，濃縮，醇沉，沉淀物溶解，膜過濾，噴霧干燥。本發明專利技術產品在防治腫瘤方面具有良好的用途。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于真菌功能產品開發領域，特別是涉及靈芝糖肽產品及其生產方法。
技術介紹
靈芝，又稱靈芝草，屬擔子菌亞門、多孔菌目、靈芝科、靈芝屬。歷代的醫典把靈芝歸位于“上上藥”，其排位在人參之前?！渡褶r本草經》、《本草綱目》記載，靈芝可明目、補肝氣、安神、益精、益心氣、益脾氣、益肺氣、益腎氣、通九竅、耳聰、目明、利關節、利尿、養顏美容，是上好的滋補佳品。靈芝糖肽是一類以靈芝多糖結構為主連接有多肽、氨基酸的大分子物質，靈芝糖肽主要存在于靈芝菌子實體、菌絲體和發酵液中。靈芝糖肽是靈芝菌生長過程中代謝形成的生物活性物質。靈芝糖肽能促進蛋白質、核酸的合成，對血清、肝臟及骨髓細胞蛋白質或核酸的更新、合成有促進作用，它是靈芝扶正固本的主要有效成分之一。靈芝糖肽的功能性與其分子量有一定的關系。靈芝糖肽結構中的多糖分子為分支結構，糖苷鍵以β-1，4鍵為主，β-1，6鍵為輔。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種靈芝糖肽產品及其生產方法和用途。本專利技術的靈芝糖肽產品組成為分子量分布在2000DA以上。糖肽含量占20-40％，其余部分為靈芝多糖。本專利技術產品可以做成膠囊或片劑形式。本專利技術靈芝糖肽產品生產方法概述如下(1)發酵液的獲得采用斜面菌種逐級擴培獲得靈芝真菌液體深層發酵液；(2)外加酶酶解將步驟(2)中得到的發酵液分別調整溫度和pH，使溫度為45～65℃，pH為5～7，發酵液中加入混合酶，混合酶與發酵液的重量百分比為0.03～0.05％，混合酶按重量百分比組成為纖維素酶30～60％、其余為β-葡聚糖酶，酶解時間0.3～3小時，酶解過程中不斷攪拌；(3)滅酶酶控制反應結束后，將發酵液升溫到90～95℃，保持10～30分鐘，進行滅酶；(4)均質處理將發酵液輸送給膠體磨，調整膠體磨定子與轉子的間隙為10～50微米，對發酵液中菌絲體進行破碎，膠體磨流量為1～5噸/小時；再經高壓均質機處理，調整高壓均質機壓力為20～60Mpa，高壓均質流量為0.5～3噸/小時，顯微鏡鏡檢菌絲體破壁率為100％； (5)濃縮將發酵液濃縮至原體積的1/5～1/10，濃縮所用方法可以是單效、多效真空濃縮和冷凍濃縮；(6)醇沉向濃縮濾液中加入70～100％的乙醇進行醇沉，其體積比為1∶3～4，處理時間14小時；(7)沉淀物溶解沉淀物加熱水溶解。(8)膜過濾采用2000DA膜進行過濾，收集2000DA以上的組分。(9)噴霧干燥將上述收集的濾液通過噴霧干燥得到干粉。本專利技術中靈芝真菌液體深層發酵液的培養見徐錦堂編《中國藥用真菌學》。本專利技術中靈芝真菌保藏于中國工業微生物菌種保藏中心，菌種分別為cicc14025，cicc14028，cicc14029. 本專利技術中采用酶解處理工藝有效的實現了靈芝糖肽中大分子糖鏈的切割，有效提高了產物中高活性糖肽的含量。本專利技術中得到的靈芝糖肽干粉可以原料、膠囊或片劑形式存在。本專利技術在培養得到的靈芝真菌發酵液的基礎上，巧妙地利用外加的混合酶在適宜的條件下對真菌發酵液進行酶解，酶解后經過提取分離得到含量在20-40％的靈芝糖肽粗產品，其余部分為靈芝多糖。本專利技術中采用高壓均質工藝實現了菌絲體功能因子的高效溶出和完全利用。本專利技術中靈芝糖肽的檢測主要采用電泳和苯酚硫酸測定法，具體測定方法見舉例本專利技術產品在抑制腫瘤細胞繁殖方面效果顯著。實驗結果見具體舉例。具體實施例方式下面的實施例可以使本專業技術人員更全面地理解本專利技術，但不以任何方式限制本專利技術。實施例110噸發酵液生產靈芝糖肽方法(1)采用斜面菌種逐級擴培獲得靈芝液體深層發酵液將靈芝斜面菌種接入裝有100毫升培養基的500毫升搖瓶中進行一級種子培養，培養條件旋轉式搖床150轉/分，28℃培養50小時。然后將一級搖瓶種子以10％接種量接入裝有100毫升培養基的500毫升搖瓶中進行二級種子培養，按照與一級搖瓶相同的條件進行培養。然后再以10％的接種量將二級種子轉接入裝有1000毫升培養基的5000毫升搖瓶中進行三級種子培養，培養條件旋轉式搖床180轉/分，28℃培養50小時。然后再以10％的接種量把三級種子接入裝有0.1噸發酵培養基的總容積為0.15噸的一級種子罐。培養條件為培養溫度28℃，攪拌速度150轉/分，通風量(V/V)1∶0.5，罐壓0.05Mpa，培養48小時。同樣將一級種子罐的菌液以10％的接種量轉接入裝有1噸發酵培養基的總容積為1.5噸二級種子罐中，二級種子罐與一級種子罐的培養條件相同。最后以10％的接種量將二級種子罐種子接入裝有10噸發酵培養基的總容積為15噸的發酵罐中。發酵罐培養溫度28℃，攪拌速度100轉/分，通風量(V/V)1∶0.5，罐壓0.05Mpa，培養120小時。(2)外加酶酶解在55℃，pH為6的條件下，向經步驟(1)得到的10噸發酵液中加入纖維素酶1.5公斤，β-葡聚糖酶1.5公斤。酶解時間3小時，酶解過程中開啟攪拌；(3)滅酶外加酶酶解結束后，將發酵液升溫到95℃，30分鐘，進行滅酶；(4)均質處理將發酵液輸送給膠體磨，調整膠體磨定子與轉子的間隙為30微米，對發酵液中菌絲體進行破碎，膠體磨流量為3噸/小時；再經高壓均質機處理，調整高壓均質機壓力為40Mpa，高壓均質流量為2噸/小時，顯微鏡鏡檢菌絲體破壁率為100％；(5)濃縮減壓濃縮濾液體積到1噸；(7)醇沉加入3.8噸95％的乙醇，醇析14小時；(8)沉淀物溶解沉淀物加熱水溶解。(9)膜過濾采用2000DA的膜進行過濾，收集2000DA以上的組分。(10)噴霧干燥將上述收集的濾液通過噴霧干燥得到干粉。本產品中靈芝糖肽含量在30％，其余部分為靈芝多糖。本專利技術中靈芝菌種購于中國工業微生物菌種保藏管理中心，菌號CICC 14025。本例中斜面培養基組成馬鈴薯(煮汁)20％，葡萄糖2％，磷酸二氫鉀0.2％，硫酸鎂0.10％，瓊脂2.0％。本例中各級種子和發酵生產所用培養基組成為蔗糖4％，葡萄糖2％，蛋白胨0.5％，脫脂大豆蛋白粉2.0％，磷酸氫二鉀0.2％，硫酸鎂0.1％，維生素B12PPm，PH6.0。實施例2(發酵液10噸)10噸發酵液生產靈芝糖肽方法(1)發酵液的制備方法同例1。(2)外加酶酶解在55℃，pH為6的條件下，向經步驟(1)得到的10噸發酵液中加入纖維素酶2公斤，β-葡聚糖酶1.5公斤。酶解時間3小時，酶解過程中開啟攪拌；(3)滅酶外加酶酶解結束后，將發酵液升溫到95℃，30分鐘，進行滅酶；(4)均質處理采用均質機和膠體磨依次處理發酵液，對菌絲體細胞壁進行破壁處理；調整膠體磨定子與轉子的間隙為0.5微米，利用其剪切力作用對發酵液中的菌絲體進行一級破壁處理，膠體磨流量為0.3噸/小時，使破壁后的菌絲體顆粒度為0.4微米的占70％；然后采用破碎粒度在0.3微米的高壓均質機，利用其高壓釋放力、空穴效應、剪切等力的作用，對發酵液中的菌絲體進行超微破壁，調整高壓均質機壓力為80Mpa，高壓均質流量為0.4噸/小時，使處理后物料粒度為60納米的占80％；(5)濃縮減壓濃縮濾液體積到1噸；(7)醇沉加入3.8噸95％的乙醇，醇析14小時；(8)沉淀物溶解沉淀物加熱水溶解。(9)膜過濾采用5000DA和70000DA的膜進行過濾，收集5000DA和70000DA之間的組分。(10)噴霧干燥將上述收集本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種靈芝糖肽產品，其特征在于所述靈芝糖肽產品分子量在２０００ＤＡ以上，其中靈芝糖肽含量占２０－４０％。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：蔡永峰，岳國海，李績，張貴林，
申請(專利權)人：中國食品發酵工業研究院，
類型：發明
國別省市：11[中國|北京]