五沒食子酰葡萄糖化學對照品的制備方法技術

本發明專利技術涉及五沒食子酰葡萄糖化學對照品的制備方法。芒果核仁經乙醇水溶液加熱回流提取，再經聚酰胺柱層析分離和反相硅膠柱色譜精制三個步驟，即可獲得純度達98％以上的五沒食子酰葡萄糖化學對照品。本發明專利技術工藝步驟簡單，采用的乙醇溶劑安全無毒，而且五沒食子酰葡萄糖化學對照品得率高，制備量大。

【技術實現步驟摘要】
五沒食子酰葡萄糖化學對照品的制備方法一、
本專利技術涉及一種從芒果核仁制備五沒食子酰葡萄糖化學對照品的方法。屬中藥現代化領域。主要包括芒果核仁經乙醇水溶液加熱回流提取、聚酰胺柱層析分離、反相硅膠柱色譜精制三個步驟，從而得到五沒食子酰葡萄糖化學對照品。五沒食子酰葡萄糖化合物其結構式如下：二、
技術介紹
五沒食子酰葡萄糖廣泛存在于廣泛存在于在芒果核仁、白芍、赤芍、五倍子、牡丹皮、黃芩、蘆薈、決明子、地錦草、荔枝核、菊花、紅花、杜仲和大黃等多種藥用植物中，具有抗腫瘤、抗炎、降血糖、抗氧化、抗突變、抗驚厥、抗過敏、抗病毒、抑菌以及抑制腎結石形成等多種藥理活性(PharmaceuticalResearch，2009，26(9)：2066-2080)，是中藥質量控制的重要指標，但由于缺少對照品，對五沒食子酰葡萄糖的質量控制只限于論文發表，在實際中很少應用，所以提供一種制備工藝簡單且能大量制備五沒食子酰葡萄糖化學對照品的方法具有重要意義。李霄等以白芍為研究對象，從中制備五沒食子酰葡萄糖對照品(專利CN10312510B)，但由于五沒食子酰葡萄糖在白芍中的含量很低，僅為0.18％(北京中醫藥大學學報，2009，32(2)：122-124)，所以五沒食子酰葡萄糖對照品的得率很低，而且分離時經過兩次大孔樹脂富集、解吸附，再通過兩次凝膠柱層析分離，工藝較為繁瑣。芒果為漆樹科芒果屬熱帶常綠大喬木，其分布廣泛，世界有70多個國家生產芒果，年產量近2.0×107t，其中我國年產量1.0×106t。芒果鮮食或加工后產生大量的果核，果核中的核仁約占芒果總重的20％左右，但芒果核仁常被廢棄，未得到有效利用。芒果核仁具有補腎、祛腎寒的功效，用于腎虛、腎寒、腰腿痛、疝氣和睪丸炎等癥。近年來研究表明，芒果核仁具有抑菌止瀉、抗氧化、抗炎等藥理作用。芒果核仁是一種有顯著藥理作用和臨床療效及廣闊開發前景的中藥材，但芒果核仁常被作為廢棄物，未能得到有效利用。五沒食子酰葡萄糖為芒果核仁主要化學成分，其在芒果核仁中含量高達3.55-6.0％(品種不同，含量存在差異)，因此從芒果核仁中制備五沒食子酰葡萄糖對照品，不僅得率高，而且可以變廢為寶。故本專利技術旨在提供一種從芒果核仁中制備五沒食子酰葡萄糖化學對照品的制備工藝。本專利技術工藝步驟簡單，采用的乙醇溶劑安全無毒，而且沒食子酰葡萄糖化學對照品得率高，制備量大。三、
技術實現思路
本專利技術旨在提供一種從芒果核仁中制備五沒食子酰葡萄糖化學對照品的制備工藝。本專利技術工藝步驟簡單，采用的乙醇溶劑安全無毒，而且沒食子酰葡萄糖化學對照品得率高，制備量大。為實現上述目的，本專利技術采用的技術方案如下：芒果核仁經乙醇水溶液加熱回流提取，再經聚酰胺柱層析分離和反相硅膠柱色譜精制三個步驟，即可獲得純度達98％以上的五沒食子酰葡萄糖化學對照品。其具體步驟如下：(1)乙醇水溶液提取：將芒果核仁粉碎成粗粉，按照質量體積比kg/L加入10-50倍量的20～95％的乙醇水溶液加熱回流提取4～6次，每次1～2h，合并提取液，回收溶劑，得浸膏，浸膏60～80℃真空恒溫干燥24h。(2)聚酰胺柱層析分離：干燥后的浸膏以聚酰胺柱層析分離，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、50～70％乙醇水溶液依次洗脫，聚酰胺薄層層析檢識(展開劑為50∶50的甲醇水溶液，顯色劑為0.5％的三氯化鐵水溶液)，收集50％～70％乙醇水溶液部位。減壓回收溶劑，即得五沒食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅膠柱色譜精制：粗品以反相硅膠(C8或C18)柱色譜精制時，依次用水、10％乙醇水溶液、20～50％乙醇水溶液洗脫，聚酰胺薄層層析檢識，收集20％～50％乙醇水溶液部位，減壓回收溶劑，60～80℃恒溫真空干燥24h，即得五沒食子酰葡萄糖化學對照品。經高效液相檢測，其純度大于98％以上。以本專利技術從芒果核仁中分離制備五沒食子酰葡萄糖化學對照品，具有如下優勢和進步：1.芒果核仁常作為廢棄物，本專利技術從芒果核仁中制備五沒食子酰葡萄糖化學對照品，可以變廢為寶。2.本專利技術工藝簡單，芒果核仁經乙醇水溶液加熱回流提取，再經聚酰胺柱層析分離和反相硅膠柱色譜精制三個步驟，即可獲得純度達98％以上的五沒食子酰葡萄糖化學對照品。3.本專利技術所用提取和分離溶劑均為乙醇，安全無毒，可回收，不造成環境污染。4.本專利技術五沒食子酰葡萄糖化學對照品得率較高，達到2.0％左右。5.本專利技術制備量大，一次提取和分離，可制備出十克級的對照品。四、附圖說明圖1為五沒食子酰葡萄糖的HPLC分析圖譜(273nm)五、具體實施方式現結合實施例和附圖對本專利技術做進一步詳細說明。實施例僅限于說明本專利技術，而非對本專利技術的限制。實施例1(1)乙醇水溶液提取：將芒果核仁粉碎成粗粉，按照質量體積比kg/L加入50倍量的40％的乙醇水溶液加熱回流提取5次，每次1.5h，合并提取液，回收溶劑，得浸膏，浸膏80℃真空恒溫干燥24h。(2)聚酰胺柱層析分離：干燥后的浸膏以聚酰胺柱層析分離，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、50％乙醇水溶液依次洗脫，聚酰胺薄層層析檢識(展開劑為50∶50的甲醇水溶液，顯色劑為0.5％的三氯化鐵水溶液)，收集50％乙醇水溶液部位。減壓回收溶劑，即得五沒食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅膠柱色譜精制：粗品以反相硅膠(C8)柱色譜精制時，依次用水、10％乙醇水溶液、20％乙醇水溶液洗脫，聚酰胺薄層層析檢識，收集20％乙醇水溶液部位，減壓回收溶劑，80℃恒溫真空干燥24h，即得五沒食子酰葡萄糖化學對照品。其得率為2.05％，經高效液相檢測，其純度大于98％以上。實施例2(1)乙醇水溶液提取：將芒果核仁粉碎成粗粉，按照質量體積比kg/L加入40倍量的50％的乙醇加熱回流提取4次，每次1.5h，合并提取液，回收溶劑，得浸膏，浸膏70℃真空恒溫干燥24h。(2)聚酰胺柱層析分離：干燥后的浸膏以聚酰胺柱層析分離，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、70％乙醇水溶液依次洗脫，聚酰胺薄層層析檢識，收集70％乙醇水溶液部位。減壓回收溶劑，即得五沒食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅膠柱色譜精制：粗品以反相硅膠(C8)柱色譜精制時，依次用水、10％乙醇水溶液、40％乙醇水溶液洗脫，聚酰胺薄層層析檢識，收集40％乙醇水溶液部位，減壓回收溶劑，70℃恒溫真空干燥24h，即得五沒食子酰葡萄糖化學對照品。其得率為2.13％，經高效液相檢測，其純度大于98％以上。實施例3(1)乙醇溶液提取：將芒果核仁粉碎成粗粉，按照質量體積比kg/L加入15倍量的75％的乙醇加熱回流提取5次，每次2.0h，合并提取液，回收溶劑，得浸膏，浸膏70℃真空恒溫干燥24h。(2)聚酰胺柱層析分離：干燥后的浸膏以聚酰胺柱層析分離，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、60％乙醇水溶液依次洗脫，聚酰胺薄層層析檢識，收集60％乙醇水溶液部位。減壓回收溶劑，即得五沒食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅膠柱色譜精制：粗品以反相硅膠(C18)柱色譜精制時，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液洗脫，聚酰胺薄層層析檢識，收集30％乙醇水溶液部位，減壓回收溶劑，75℃恒溫真空干燥24h，即得五沒食子酰葡萄糖化學對照品。其得率為1.98％，經高效液相檢測，其純度大于98％以本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種制備五沒食子酰葡萄糖化學對照品的方法，其特征在于按以下步驟進行：(1)乙醇水溶液提取：將芒果核仁粉碎成粗粉，按照質量體積比kg/L加入10～50倍量的20～95％的乙醇水溶液加熱回流提取4～6次，每次1～2h，合并提取液，回收溶劑，得浸膏，浸膏60～80℃真空恒溫干燥24h。(2)聚酰胺柱層析分離：干燥后的浸膏以聚酰胺柱層析分離，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、50～70％乙醇水溶液依次洗脫，聚酰胺薄層層析檢識(展開劑為50∶50的甲醇水溶液，顯色劑為0.5％的三氯化鐵水溶液)，收集50％～70％乙醇水溶液部位。減壓回收溶劑，即得五沒食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅膠柱色譜精制：粗品以反相硅膠(C

【技術特征摘要】
1.一種制備五沒食子酰葡萄糖化學對照品的方法，其特征在于按以下步驟進行：(1)乙醇水溶液提取：將芒果核仁粉碎成粗粉，按照質量體積比kg/L加入10～50倍量的20～95％的乙醇水溶液加熱回流提取4～6次，每次1～2h，合并提取液，回收溶劑，得浸膏，浸膏60～80℃真空恒溫干燥24h。(2)聚酰胺柱層析分離：干燥后的浸膏以聚酰胺柱層析分離，依次用水、10％乙醇水溶液、30％乙醇水溶液、50～70％乙醇水溶液依次洗脫，聚酰胺薄層層析檢識(展開劑為50∶50的甲醇水溶液，顯色劑為0.5％的三氯化鐵水溶液)，收集50％～70％乙醇水溶液部位。減壓回收溶劑，即得五沒食子酰葡萄糖粗品。(3)反相硅膠柱色譜精制：粗品以反相硅膠(C8或C18)柱色譜精制時，依次用水、10％乙醇水溶液、20～50％乙醇水溶液洗脫，聚酰胺薄層層析檢識，收集20％～50％乙醇水溶液部位，減壓回收溶劑，60～80℃恒溫真空干燥24h，即得五沒食子酰葡萄糖化學對照品。經高效液相檢測，其純度大于98％...

【專利技術屬性】
技術研發人員：袁葉飛，
申請(專利權)人：瀘州飛翔醫藥科技有限公司，
類型：發明
國別省市：四川,51