一種鐵皮石斛的快繁技術制造技術

本發明專利技術公開了一種鐵皮石斛的快速繁育技術，該方法包括以下步驟：1）種子的誘導培養；2）壯苗及生根培養；3）組培苗移栽。本發明專利技術克服了野生鐵皮石斛無性系培養獲得的植株增殖慢、質量低及長勢不一致等問題；具有技術工藝易操作簡單、繁育快速，不污染環境。所得鐵皮石斛幼苗質量好、存活率高和長勢均勻等，為鐵皮石斛試管苗大量繁殖和產業化發展提供有效和可持續方法。

Rapid propagation technique of Dendrobium officinale

The invention discloses a fast breeding technology of Dendrobium officinale, the method comprises the following steps: 1) induced by seed; 2) seedling and rooting culture; 3) transplanting. The invention overcomes the problems of slow propagation, low quality and uneven growth of the plants obtained by the cultivation of the wild Dendrobium officinale clones, and has the advantages of simple technical process, simple operation, fast breeding and no pollution to the environment. The seedlings obtained from Dendrobium officinale have good quality, high survival rate and uniform growth, which provide an effective and sustainable method for the propagation and industrialization of Dendrobium officinale in vitro.

【技術實現步驟摘要】
一種鐵皮石斛的快繁技術
本專利技術涉及醫藥生物
，尤其是涉及一種鐵皮石斛的快速繁技術。
技術介紹
鐵皮石斛為蘭科（Orchidaceae）石斛屬（DendrobiumSw）植物，全世界蘭科約有500屬，15000多種；石斛屬是蘭科中最大的屬之一。中國蘭科約有150屬，1000種，莖圓柱形，高15～50cm，粗4～8mm。葉鞘帶肉質，矩圓狀披針形，長3～6.5cm，寬0.8～2cm，頂端略鉤?？偁罨ㄐ蛏诰呷~或無葉莖的中部，有花2～4朵；花淡黃綠色，稍有香氣；萼片長1.2～2cm；花瓣短于萼片，唇瓣卵狀披針形，長1.3～1.6cm寬7～9mm，先端漸尖或短漸尖，近上部中間有圓形紫色斑塊，近下部中間有黃色胼胝體?；ㄆ?～6月。表面黃色，基部稍有光澤，具縱紋，節上有花序柄痕及殘存葉鞘；葉鞘短于節間，常與節間上部留下環狀間隙，褐色，鞘口張開。質硬而脆，易折斷，斷面纖維狀。鮮品莖直徑3～6mm，表面黃綠色或黑綠色，葉鞘灰白色。氣微，嚼之有粘性。主要分布于秦嶺和長江流域以南省區；石斛屬植物大多數種類都集中分布在北緯15°30′～25°12′之間，且越向北延而種類則逐漸減少。中國鐵皮石斛主要分布于浙江、廣西、湖南、云南、貴州等地。它是一種名貴的中藥材，是多年生草本植物，莖叢生，圓柱型，高10--30厘米，粗3—8毫米，在民間，被譽為“救命仙草”藥界的“大熊貓”。由于新鮮鐵皮石斛不宜保存，鮮藥由于其汁多鮮嫩，容易腐爛變質，特別是霉雨季節，更不易保存，因此在大多數中藥店和醫院中藥房中很少配有鮮類藥材，，鐵皮石斛加工后干品稱鐵皮楓斗，其藥效成分主要是石斛多糖、石斛堿和總氨基酸等。能提高人體免疫能力，增強記憶力，補五臟虛勞，抗衰老，抑制腫瘤，改善糖尿病癥狀，抗缺氧，對放化療以及夜生活、煙酒過度者有顯著效果。鐵皮石斛種子無胚乳，需與某些真菌共生才能萌發，自然繁殖率低，雖分布廣，但生境窄，加上長年無節制采掘，自然資源日漸枯竭，產量不能滿足目前市場需求。本專利技術的首要目的在于提供一種胚萌發率高、成活率好的鐵皮石斛的快速繁育技術。為了實現上述目的，本專利技術采用以下技術方案：一種鐵皮石斛的快速繁育技術方法，包括以下步驟：1.種子的誘導培養：去掉朔果干枯部分，用自來水沖洗干凈后，用70%酒精浸泡10-60，再用0.1%升汞消毒5-12min，最后用無菌水沖洗1-5次。在無菌條件下切開朔果，把種子播種于誘導培養基上。培養基加入椰油酰谷氨酸二鈉1-5g?Ｌ－１、蔗糖10-50g·Ｌ－１，瓊脂5-15g·Ｌ－１，PH4.5-5.5，蓋上瓶蓋,置于培養室內進行培養.1.壯苗及生根培養:將上述獲得的鐵皮石斛幼芽從組培瓶中取出，在無菌條件下移入增殖和壯苗培養基中，蓋上瓶蓋，置于培養室內進行培養；3.組培苗移栽:將鐵皮石斛幼苗經過常規煉苗處理后移栽于溫室大棚，移栽后按常規管理，濕度保持在70～90%，作為優選，上述步驟1中，種子用70%酒精浸泡20-50s，再用0.1%升汞消毒6-10min，最后用無菌水沖洗3-4次。作為優選，上述步驟1中，播種量為種子覆蓋培養基表面50％.作為優選，上述步驟1中，培養基加入椰油酰谷氨酸二鈉1-5g?Ｌ－１、蔗糖20-40g·Ｌ－１，瓊脂8-12g·Ｌ－１，馬鈴薯提取液100-300mg·Ｌ－１,PH4.8-5.2。作為優選，上述培養基為MS培養基、1/2MS培養基、B5培養基、LS培養基、N6培養基。作為優選，上述步驟2中，每瓶接8株鐵皮石斛幼芽，高0.3-0.6cm作為優選，上述培養條件為溫度26-28℃，光照強度1600-2000Ｌx。作為優選，上述步驟2中，鐵皮石斛幼苗為具有2-5條根，高2-3cm。作為優選，上述步驟3中，溫室大棚以木屑、泥炭土作為基質，且木屑：泥炭土為1:1-1:3。本專利技術具有以下有益效果：1.本專利技術在種子誘導培養，壯苗及生根培養，組培苗移栽過程中不會對周圍環境產生影響，是一種環境友好型的快速繁育技術。2.本專利技術克服了野生鐵皮石斛植株生長的質量低、增殖慢及長勢不一致等的問題，從而提高培養效率及減少生產成本。本專利技術具有技術工藝易操作、流程少、繁育快速等優點。具體實施方式下面通過具體實施例對本專利技術的技術方案作進一步的具體說明。應當理解，本專利技術的實施并不局限于下面的實施例，對本專利技術所做的任何形式上的變通或改變都將落入本專利技術保護范圍。實施例11.種子的誘導培養：去掉朔果干枯部分，用自來水沖洗干凈后，用70%酒精浸泡20-50s，再用0.1%升汞消毒6-10min，最后用無菌水沖洗3-4次。在無菌條件下切開朔果，把種子播種于誘導培養基上,以MS作為基本培養基,培養基加入椰油酰谷氨酸二鈉1-5g?Ｌ－１、蔗糖20-40g·Ｌ－１，瓊脂8-12g·Ｌ－１，以1.5mol/LNaOH或0.2mol/LHCl調pH4.8-5.2,在121℃高壓滅菌鍋滅菌25min；蓋上瓶蓋,置于培養室內進行培養.2.壯苗及生根培養:將上述獲得的鐵皮石斛幼芽從組培瓶中取出，在無菌條件下移入增殖和壯苗培養基中，蓋上瓶蓋，置于培養室內進行培養,溫度26-28℃，光照強度1600-2000Ｌｘ。3.組培苗移栽:將鐵皮石斛幼苗經過常規煉苗處理后移栽于溫室大棚，溫室大棚以木屑、泥炭土作為基質，且木屑：泥炭土為1:1-1:3，移栽后按常規管理，濕度保持在70～90%。實施例21.種子的誘導培養：去掉朔果干枯部分，用自來水沖洗干凈后，用70%酒精浸泡30s，再用0.1%升汞消毒7min，最后用無菌水沖洗3次。在無菌條件下切開朔果，把種子播種于誘導培養基上,以MS作為基本培養基,培養基加入椰油酰谷氨酸二鈉4g?Ｌ－１、蔗糖30g·Ｌ－１，瓊脂8g·Ｌ－１，以1.5mol/LNaOH或0.2mol/LHCl調pH4.8,在121℃高壓滅菌鍋滅菌25min；蓋上瓶蓋,置于培養室內進行培養.2.壯苗及生根培養:將上述獲得的鐵皮石斛幼芽從組培瓶中取出，在無菌條件下移入增殖和壯苗培養基中，蓋上瓶蓋，置于培養室內進行培養,溫度28℃，光照強度2000Ｌｘ。3.組培苗移栽:將鐵皮石斛幼苗經過常規煉苗處理后移栽于溫室大棚，溫室大棚以木屑、泥炭土作為基質，且木屑：泥炭土為1:1，移栽后按常規管理，濕度保持在70-90%。實施例31.種子的誘導培養：去掉朔果干枯部分，用自來水沖洗干凈后，用70%酒精浸泡40s，再用0.1%升汞消毒5min，最后用無菌水沖洗4次。在無菌條件下切開朔果，把種子播種于誘導培養基上,以MS作為基本培養基,培養基加入椰油酰谷氨酸二鈉3g?Ｌ－１、蔗糖20g·Ｌ－１，瓊脂12g·Ｌ－１，以1.5mol/LNaOH或0.2mol/LHCl調pH5.2,在121℃高壓滅菌鍋滅菌25min；蓋上瓶蓋,置于培養室內進行培養.油酰谷氨酸二鈉和蔗糖配伍能提高鐵皮石斛幼芽的成活率。2.壯苗及生根培養:將上述獲得的鐵皮石斛幼芽從組培瓶中取出，在無菌條件下移入增殖和壯苗培養基中，蓋上瓶蓋，置于培養室內進行培養,溫度27℃，光照強度1800Ｌｘ。組培苗移栽:將鐵皮石斛幼苗經過常規煉苗處理后移栽于溫室大棚，溫室大棚以木屑、泥炭土作為基質，且木屑：泥炭土為1:2移栽后按常規管理，濕度保持在70～90%。實施例41.種子的誘導培養：去掉朔果干枯部本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種鐵皮石斛的快速繁育技術方法，包括以下步驟：1）種子的誘導培養：去掉朔果的干枯部分，用自來水沖洗干凈后，用70%酒精浸泡10?60?s，再用0.1%升汞消毒5?12?min，最后用無菌水沖洗1?5次；在無菌條件下切開朔果，把種子播種于誘導培養基上；培養基加入椰油酰谷氨酸二鈉1?5g?Ｌ

【技術特征摘要】
1.一種鐵皮石斛的快速繁育技術方法，包括以下步驟：1）種子的誘導培養：去掉朔果的干枯部分，用自來水沖洗干凈后，用70%酒精浸泡10-60s，再用0.1%升汞消毒5-12min，最后用無菌水沖洗1-5次；在無菌條件下切開朔果，把種子播種于誘導培養基上；培養基加入椰油酰谷氨酸二鈉1-5g?Ｌ－１、蔗糖10-50g·Ｌ－１，瓊脂5-15g·Ｌ－１，PＨ4.5-5.5，蓋上瓶蓋,置于培養室內進行培養；2）壯苗及生根培養：將上述獲得的鐵皮石斛幼芽從組培瓶中取出，在無菌條件下移入增殖和壯苗培養基中，蓋上瓶蓋，置于培養室內進行培養；3）組培苗移栽：將鐵皮石斛幼苗經過常規煉苗處理后移栽于溫室大棚，移栽后按常規管理，濕度保持在70%～90%。2.根據權利要求1所述的一種鐵皮石斛的快速繁育技術方法，其特征在于，種子用70%酒精浸泡20-50s，再用0.1%升汞消毒6-10min，最后用無菌水沖洗3-4次。3.根據權利要求1所述的一種鐵皮石斛的快速繁育技術方法，其特征在于，播種量為種子...

【專利技術屬性】
技術研發人員：楊立國，于夢楠，
申請(專利權)人：新昌縣鈞國生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：浙江,33