適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架及該鈦支架的處理方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架及該鈦支架的處理方法，支架本體由鈦材料制成；支架本體的表面吸附有納米顆粒組合物；支架本體的表面拋光和清洗處理后，浸入NaOH溶液中，在70℃條件下反應(yīng)10小時，單蒸水超聲清洗后，浸入雙蒸水中，70℃條件下反應(yīng)10小時，單蒸水超聲清洗后，37℃烘干；將支架本體浸泡于PLL中，在4℃條件下靜置反應(yīng)20小時，然后用磷酸鹽緩沖液清洗支架本體。支架本體表面GDP與HEP、PLL、LN或SDF?1α組合，構(gòu)建具有冠脈免疫調(diào)節(jié)、血液相容性、抗冠脈血栓形成、冠脈內(nèi)皮損傷修復(fù)和抗冠脈介入治療再狹窄的生物功能性微環(huán)境，因而將可能解決高齡冠脈多支病變、復(fù)雜病變介入治療所致的冠脈血栓形成和冠脈再狹窄的問題。

Novel titanium stent for elderly coronary artery and treatment method of the titanium stent

New processing method of the invention discloses a titanium frame which is suitable for the elderly coronary artery and the titanium bracket, the bracket body is made of titanium material; surface adsorption support body with nanoparticles composition; surface polishing and cleaning bracket body after immersion in NaOH solution, the reaction time is 10 hours at 70 DEG C, ultrasonic cleaning after immersed in distilled water, distilled water, reaction temperature of 70 DEG C for 10 hours, distilled water after ultrasonic cleaning, 37 drying; the bracket body immersed in PLL, under the condition of 4 DEG C static reaction for 20 hours, and then use the phosphate buffer bracket body cleaning. The bracket body surface GDP and HEP, PLL, LN or SDF 1 alpha combination, construct coronary blood compatibility, immune regulation, anti coronary thrombosis, coronary endothelial injury and anti coronary intervention and biological function of narrow microenvironment, and restenosis of coronary artery thrombosis formation and may solve the elderly multivessel coronary interventional therapy, complex lesions caused by.

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架及該鈦支架的處理方法
本專利技術(shù)涉及一種醫(yī)療用具，更具體地說，它涉及一種適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架及該鈦支架的處理方法。
技術(shù)介紹
70歲以上高齡冠狀動脈（冠脈）多支病變、復(fù)雜病變的介入治療所致冠脈血栓形成和冠脈再狹窄發(fā)生率明顯高于年輕冠心病患者。鈦合金材料具有良好的生物相容性已廣泛應(yīng)用于外周血管支架。但尚無將鈦合金材料作為冠脈支架材料，用于高齡冠脈多支病變和復(fù)雜病變介入治療的研究。
技術(shù)實現(xiàn)思路
針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本專利技術(shù)的目的在于提供一種解決上述問題的適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架及該鈦支架的處理方法。為實現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)提供了如下技術(shù)方案：一種適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架，包括支架本體，所述支架本體由金屬鈦材料制成；所述支架本體的表面吸附有用于構(gòu)建冠狀動脈免疫調(diào)節(jié)、血液相容性、抗冠狀動脈血栓形成、冠狀動脈內(nèi)皮損傷修復(fù)及抗冠狀動脈介入治療再狹窄的生物功能性微環(huán)境的納米顆粒組合物。本專利技術(shù)進一步設(shè)置為：所述納米顆粒組合物包括GDP、HEP、PLL、LN、SDF-1α。本專利技術(shù)進一步設(shè)置為：GDP的制備，采用冰水清洗新鮮扁玉螺，去除扁玉螺的外殼和雜質(zhì)，然后通過高速粉碎機粉碎，制成均勻漿保持于90%乙醇中兩周；用1:20的蒸餾水在85-87℃溫度中每4小時提取一次，共三次，混合物離心20分鐘，去除不溶性殘留物；收集上清液，通過真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮成適當(dāng)量，通過Sevag,Lackman、Smolens和無水乙醇去除蛋白，并于4℃過夜；沉淀物離心20分鐘提取GDP。本專利技術(shù)進一步設(shè)置為：通過色譜法DEAE-52和葡聚糖凝膠G-100依次純化GDP；GDP通過層析柱DEAE-52纖維素純化，然后，纖維素柱用0、0.4和1.2m的氯化鈉在流速為60ml/h下分步洗脫；最后，通過G-100葡聚糖凝膠柱進一步純化，獲得純化GDP。本專利技術(shù)進一步設(shè)置為：采用無菌磷酸鹽作為配制溶液，配制濃度為0.5mg/mL的HEP溶液，并在3～5℃環(huán)境下保存。本專利技術(shù)進一步設(shè)置為：采用無菌磷酸鹽作為配制溶液，配制濃度為0.5mg/mL的PLL溶液，并在3～5℃環(huán)境下保存。本專利技術(shù)進一步設(shè)置為：在中性條件下PLL與HEP通過自發(fā)靜電組裝作用形成具有三維結(jié)構(gòu)的納米顆粒，該納米顆粒通過靜電作用吸附于堿活化的支架本體表面。處理適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架的方法，其特征是：純鈦材料制成的支架本體，其表面經(jīng)過拋光和清洗處理后，浸入濃度為1～5mol/L的NaOH溶液中，在60～90℃條件下反應(yīng)8～16小時，單蒸水超聲清洗后，浸入雙蒸水中，60～90℃條件下反應(yīng)8～12小時，單蒸水超聲清洗后，37℃烘干；將支架本體浸泡于0.5～3mg/ml的PLL溶液中，在4℃條件下靜置反應(yīng)8～24小時，然后用磷酸鹽緩沖液清洗支架本體。通過采用上述技術(shù)方案，支架本體表面GDP與HEP、PLL、LN或SDF-1α組合，形成GDP與HEP、PLL、LN或SDF-1α納米顆粒組合物多功能涂層。從而構(gòu)建具有冠脈免疫調(diào)節(jié)、血液相容性、抗冠脈血栓形成、冠脈內(nèi)皮損傷修復(fù)和抗冠脈介入治療再狹窄的生物功能性微環(huán)境，因而將可能解決高齡冠脈多支病變、復(fù)雜病變介入治療所致的冠脈血栓形成和冠脈再狹窄的問題。具體實施方式參照實施例對本專利技術(shù)做進一步說明。中藥GDP制備冰水清洗新鮮扁玉螺。去除外殼和雜質(zhì)，高速粉碎機粉碎，制成均勻漿保持于90%乙醇兩周。用1:20的蒸餾水在85-87℃溫度中提取每4小時一次，共三次。混合物離心20分鐘，去除不溶性殘留物。收集上清液，通過真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮成適當(dāng)量，通過Sevag,Lackman、Smolens和無水乙醇去除蛋白，并于4℃過夜。沉淀物離心20分鐘提取GDP。中藥GDP的純化通過色譜法DEAE-52和葡聚糖凝膠G-100依次純化GDP。GDP（3ml,15mg/ml）通過層析柱（2.6cm×30cm）DEAE-52纖維素純化，然后，纖維素柱用0、0.4和1.2m的氯化鈉在流速為60ml/h下分步洗脫。通過G-100葡聚糖凝膠柱（2.6cm×60cm)進一步純化，獲得純化GDP。GDP的體外免疫活性脾細(xì)胞增殖試驗：小鼠脾臟在無菌條件下取出，存于4℃PBS緩沖液。獲取單細(xì)胞懸液后離心，細(xì)胞懸浮在3ml裂解液中(0.15MNH4Cl,10mMKHCO3,1mMEDTA-Na2,pH7.2)中輕振2-3分鐘后，移去紅細(xì)胞層。再用PBS緩沖液（0.1M,pH7.2）清洗兩次，脾細(xì)胞懸浮在RPMI-1640培養(yǎng)基中，密度為1×107/mL。然后，細(xì)胞懸浮液培養(yǎng)在96孔板子和不同密度(25–100mg/L)純化多糖加到100μL刀球蛋白A（最終濃度為5mg/L），脂多糖（最終濃度為10mg/L）作為陽性對照，RPMI-1640培養(yǎng)基為空白對照組。于37℃，濕度5%的二氧化碳培養(yǎng)箱72小時，MTT原液（10μL，5mg/L）加入培養(yǎng)箱培養(yǎng)4小時。100ul，10%的SDS在0.01N鹽水加入到每個孔里。保持培養(yǎng)皿過夜。用ELISA在570nm吸光度條件下讀取光度值，測定細(xì)胞增殖指數(shù)。腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能研究：誘導(dǎo)和獲取腹膜巨噬細(xì)胞，細(xì)胞懸浮液接種到96孔板。在37℃，濕度5%的二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育3小時。用PBS緩沖液連續(xù)沖洗兩次洗去非貼壁細(xì)胞。采用不同濃度純化多糖培養(yǎng)腹膜巨噬細(xì)胞，設(shè)陽性對照和空白對照。培養(yǎng)孔中巨噬細(xì)胞孵育1小時，移去上清液，置入PBS緩沖液。培養(yǎng)皿中加入細(xì)胞裂解液室溫下過夜。采用ELISA測定培養(yǎng)皿，確定巨噬細(xì)胞指數(shù)。GDP的體外免疫活性測定研究表明，脾細(xì)胞增殖和增強巨噬細(xì)胞吞噬作用。GDP可增強免疫調(diào)節(jié)。肝素（HEP)HEP鈉（HaperinSodium,Sigma)。HEP溶液配制：采用無菌PBS作為配制溶液，配制HEP溶液濃度為0.5mg/mL,4℃保存?zhèn)溆谩EP常用于材料表面的抗凝修飾。HEP可與多種內(nèi)皮細(xì)胞生物因子及細(xì)胞外基質(zhì)蛋白結(jié)合，延長這些蛋白質(zhì)在體內(nèi)的活性和半衰期，促進內(nèi)皮損傷修復(fù)。通過同位素標(biāo)記的HEP測量涂層支架吸附HEP的量及峰時間，HEP在涂層中的載藥量約為160μg/枚，掃描電鏡顯示涂層厚度5-10μm。多聚賴氨酸(PLL)PLL(Poly-1-lysine,MW150.000-300.000,Sigma)。PLL溶液配制：采用無菌PBS作為配制溶液，配制PLL溶液濃度為0.5mg/mL,4℃保存?zhèn)溆谩LL是一種富含-NH2的粘性分子，等電點為10.5。能夠與帶陰離子的物質(zhì)產(chǎn)生強靜電交互作用，并對生物膜具有良好穿透力。因此，將PLL用于藥物載體。在中性條件下PLL與HEP通過自發(fā)靜電組裝作用形成具有三維結(jié)構(gòu)的納米顆粒，在該種結(jié)構(gòu)下HEP可保持其良好的構(gòu)象和生物學(xué)活性。PLL在PBS溶液中呈正電性,通過靜電作用可將PLL吸附于堿活化的冠脈TI支架表面。PLL是一種富含氨基的氨基酸聚合物，在中性環(huán)境下呈強正電性，通過靜電作用可牢固結(jié)合于堿熱活化后呈負(fù)電性的TI表面，并在表面引入大量具有反應(yīng)活性的氨基。通過EDC/NHSMES偶聯(lián)劑的作用，可將LN/HEP復(fù)合物共價固定于氨基化的TI表面。利用HEP特異性結(jié)合SDF-1α的特點，可在共固定LN/HEP的表面進一步引入SDF-1α。動物模本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架，包括支架本體，其特征是：所述支架本體由金屬鈦材料制成；所述支架本體的表面吸附有用于構(gòu)建冠狀動脈免疫調(diào)節(jié)、血液相容性、抗冠狀動脈血栓形成、冠狀動脈內(nèi)皮損傷修復(fù)及抗冠狀動脈介入治療再狹窄的生物功能性微環(huán)境的納米顆粒組合物。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架，包括支架本體，其特征是：所述支架本體由金屬鈦材料制成；所述支架本體的表面吸附有用于構(gòu)建冠狀動脈免疫調(diào)節(jié)、血液相容性、抗冠狀動脈血栓形成、冠狀動脈內(nèi)皮損傷修復(fù)及抗冠狀動脈介入治療再狹窄的生物功能性微環(huán)境的納米顆粒組合物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架，其特征是：所述納米顆粒組合物包括GDP、HEP、PLL、LN、SDF-1α。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架，其特征是：GDP的制備，采用冰水清洗新鮮扁玉螺，去除扁玉螺的外殼和雜質(zhì)，然后通過高速粉碎機粉碎，制成均勻漿保持于90%乙醇中兩周；用1:20的蒸餾水在85-87℃溫度中每4小時提取一次，共三次，混合物離心20分鐘，去除不溶性殘留物；收集上清液，通過真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮成適當(dāng)量，通過Sevag,Lackman、Smolens和無水乙醇去除蛋白，并于4℃過夜；沉淀物離心20分鐘提取GDP。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的適用于高齡冠狀動脈的新型鈦支架，其特征是：通過色譜法DEAE-52和葡聚糖凝膠G-100依次純化GDP；GDP通過層析柱DEAE-52纖維素純化，然后，纖維素柱用0、0.4和1....

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李俠，熊清平，劉濤，蔣長興，胡有東，張楓林，趙慶娜，
申請(專利權(quán))人：淮安市第二人民醫(yī)院淮安仁慈醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國別省市：江蘇,32