可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末及其制備方法技術(shù)

可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末及其制備方法，復(fù)合乳酸桿菌粉末含有：植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌及微囊外壁。將菌種活化劃線于相應(yīng)的平板，再將活化后的單克隆接種于種子培養(yǎng)基培養(yǎng)；將發(fā)酵培養(yǎng)基作為一級(jí)種子培養(yǎng)基，加入低聚果糖或海藻糖中的一種作為促進(jìn)乳酸菌生長(zhǎng)劑，滅菌；將培養(yǎng)獲得的初級(jí)活化種子接種于一級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，再接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)；發(fā)酵結(jié)束后，管式離心機(jī)離心收集菌體，得菌泥，混合均勻后，再平鋪于樣品凍干機(jī)的樣品板，并將菌泥分成小塊；將獲得的植物乳桿菌粉末與維生素C、葡萄糖、淀粉混合，對(duì)樣品進(jìn)行乳化、混合、造粒、干燥，制備成包埋著乳酸菌體的可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末及其制備方法
本專利技術(shù)涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖，尤其是涉及一種可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末及其制備方法。
技術(shù)介紹
抗生素應(yīng)用在畜牧業(yè)產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。但抗生素的大量使用所伴隨的負(fù)面效應(yīng)也日益突出，主要表現(xiàn)為病原微生物的耐藥性的產(chǎn)生以及藥物在動(dòng)物體內(nèi)的殘留，從而對(duì)人類的健康產(chǎn)生直接或者潛在的危害。抗生素在飼料中的應(yīng)用遇到嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。以及目前我國(guó)飼料改善肉蛋白品質(zhì)通過(guò)化學(xué)藥品的方法逐步引起人們的憂慮，如蘇丹紅，瘦肉精等違禁藥物的添加及抗生素的過(guò)量添加來(lái)改善肉蛋品質(zhì)等層出不窮，對(duì)食品安全造成威脅。開(kāi)發(fā)安全無(wú)毒綠色的生物飼料添加劑來(lái)改善肉品質(zhì)是目前畜牧業(yè)發(fā)展的趨勢(shì)。因此抗生素替代品(微生態(tài)制劑等)的研究開(kāi)發(fā)成為近年來(lái)綠色飼料添加劑的熱點(diǎn)，其中植物乳桿菌的應(yīng)用備受關(guān)注。植物乳桿菌是農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)認(rèn)可用于飼料添加劑的菌種，其特征是產(chǎn)酸、產(chǎn)酶的抑制腸道病原菌的作用。植物乳桿菌通過(guò)改善動(dòng)物腸道的微生態(tài)環(huán)境和提高動(dòng)物的免疫力而提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能，而且在動(dòng)物產(chǎn)品中無(wú)殘留。但是采用傳統(tǒng)的碳氮源優(yōu)化的方法能使乳桿菌達(dá)到109CFU/ml后，再提高碳氮源含量后很難進(jìn)一步提高菌體含量。市售乳酸球菌保持活力較長(zhǎng)，而乳酸桿菌產(chǎn)品保質(zhì)期較短，但桿菌有不同于球菌的特殊的生理活性。本申請(qǐng)人在中國(guó)專利CN103497906A中公開(kāi)一種微生態(tài)制劑及其制備方法與應(yīng)用，涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖。微生態(tài)制劑含有枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌中的至少一種和植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌中的至少一種；植物乳桿菌包括：植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)1A07806，保藏編號(hào)CCTCCNO:M2013293；嗜酸乳桿菌包括：嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)PL7，保藏編號(hào)CCTCCNO:M2013294。在制備促進(jìn)對(duì)蝦或石斑魚(yú)生長(zhǎng)，提高對(duì)蝦或石斑魚(yú)免疫力和抗病力，防治病害，提高存活率，凈化養(yǎng)殖水質(zhì)制劑中應(yīng)用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)目的在于針對(duì)當(dāng)前抗生素濫用的情況，提供可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末及其制備方法。本專利技術(shù)的另一目的在于提供所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末的應(yīng)用。所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末含有：植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)1A07806和嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)PL7及其微囊外壁。所述微囊外壁可采用水溶性食用膠、環(huán)狀糊精、纖維素衍生物、明膠、酪蛋白等中的至少兩種作為微囊外壁，所述微囊外壁可通過(guò)微囊制粒機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行乳化、混合、造粒、干燥，制備成包埋著乳酸菌體的微囊外壁，制成可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末。所述植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)1A07806的保藏編號(hào)為CCTCCNO：M2013293；所述嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)PL7的保藏編號(hào)為CCTCCNO：M2013294。所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末的制備方法包括以下步驟：1)配制種子培養(yǎng)基500ml，滅菌；2)將凍存的菌種活化劃線于相應(yīng)的平板，再將活化后的單克隆接種于種子培養(yǎng)基培養(yǎng)；3)配制發(fā)酵培養(yǎng)基，將50L發(fā)酵培養(yǎng)基作為一級(jí)種子培養(yǎng)基，加入低聚果糖或海藻糖中的一種作為促進(jìn)乳酸菌生長(zhǎng)劑，滅菌；4)將步驟2)培養(yǎng)獲得的初級(jí)活化種子接種于50L一級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，再通過(guò)移種管接種于1000L發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，活菌數(shù)≥8×109CFU/mL；5)發(fā)酵結(jié)束后，管式離心機(jī)離心收集菌體，得菌泥；6)將步驟5)獲得的菌泥添加維生素C、海藻糖、淀粉糊精、低聚果糖等中的至少兩種作為保護(hù)劑，混合均勻后，再平鋪于樣品凍干機(jī)的樣品板，并將菌泥分成小塊；7)將步驟6)獲得的植物乳桿菌粉末與維生素C、葡萄糖、淀粉混合，采用水溶性食用膠、環(huán)狀糊精、纖維素衍生物、明膠、酪蛋白等中的至少兩種作為微囊外壁，通過(guò)微囊制粒機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行乳化、混合、造粒、干燥，制備成包埋著乳酸菌體的可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末。在步驟1)中，所述滅菌的溫度可為115℃，滅菌的時(shí)間可為30min。在步驟2)中，所述培養(yǎng)可靜置培養(yǎng)18h。在步驟3)中，所述低聚果糖或海藻糖可采用質(zhì)量百分濃度為0.5％低聚果糖或海藻糖，所述滅菌可在115℃滅菌30min。在步驟4)中，所述接種于50L一級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)可采用靜置培養(yǎng)12h；所述接種于1000L發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)可采用靜置培養(yǎng)48h。在步驟6)中，所述維生素C、海藻糖、淀粉糊精、低聚果糖等中的至少兩種的添加量按質(zhì)量百分比可為菌泥的1％。在步驟7)中，所述維生素C的加入量按質(zhì)量百分比可為植物乳桿菌粉末的1％，所述葡萄糖的加入量按質(zhì)量百分比可為植物乳桿菌粉末的20％，所述淀粉的加入量按質(zhì)量百分比可與植物乳桿菌粉末等量；所制得的可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末的直徑可為300μm。所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末可促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)，提高對(duì)蝦免疫力和抗病力，增加對(duì)蝦攝食量，提高對(duì)蝦存活率。由此可見(jiàn)，所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末可在制備防治對(duì)蝦病害藥物、飼料添加劑、對(duì)蝦生長(zhǎng)促進(jìn)劑等中應(yīng)用。所述飼料添加劑、對(duì)蝦生長(zhǎng)促進(jìn)劑中無(wú)殘留，無(wú)毒害，是綠色的健康的新型飼料添加劑和對(duì)蝦生長(zhǎng)促進(jìn)劑。所述對(duì)蝦病害包括紅腿病、爛眼病、甲殼潰瘍病、偷死癥及由弧菌引起的癥狀等。本專利技術(shù)選用的菌株特性及功能如下植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌：所述植物乳桿菌CCTCCNO：M2013293和嗜酸乳桿菌CCTCCNO：M2013294可以產(chǎn)生B組維生素、胡蘿卜素及胞外多糖等，進(jìn)入水產(chǎn)動(dòng)物腸道，可以調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，能產(chǎn)類細(xì)菌素和乳酸，抑制病原菌生長(zhǎng)，提高養(yǎng)殖動(dòng)物機(jī)體免疫力和抗病力。所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末可促進(jìn)對(duì)蝦生長(zhǎng)，提高對(duì)蝦抗病力，存活率。所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末應(yīng)用于對(duì)蝦養(yǎng)殖的使用方法和用量如下：日常飼養(yǎng)時(shí)，取菌劑拌料喂養(yǎng)。每次伴料量為10％投喂量每日拌料投喂，每日拌料一次，連續(xù)投喂3天后停用2天，再連用3天。拌料投喂一段時(shí)間后，對(duì)蝦攝食旺盛、腸道粗實(shí)、未見(jiàn)腸炎等發(fā)生。所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末可用于防治凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖期間病害的發(fā)生，包括：紅腿病、爛眼病、甲殼潰瘍病、偷死癥及由弧菌引起的癥狀；有效緩解或預(yù)防病害發(fā)生，極大地降低病害造成的死亡率；同時(shí)能改善養(yǎng)殖水質(zhì)，降低水體弧菌含量，增強(qiáng)凡納濱對(duì)蝦消化吸收功能和抗病能力，提高對(duì)蝦產(chǎn)量和質(zhì)量，縮短養(yǎng)殖周期。本專利技術(shù)所述植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌通過(guò)篩選獲得能夠產(chǎn)生B組維生素、胡蘿卜素、及胞外多糖，進(jìn)入腸道能夠持續(xù)繁殖，從而能提高肉蛋品質(zhì)，所述的植物乳桿菌是從蘋果園落葉土壤中篩選了一株植物乳桿菌，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)具有產(chǎn)酸能力強(qiáng)、菌株活力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。通過(guò)有益微生物產(chǎn)生代謝產(chǎn)物和生理活性物質(zhì)抑制或者殺滅病原菌，同時(shí)提高養(yǎng)殖動(dòng)物免疫力和抵抗力，達(dá)到防治病害的目的；再者有益微生物通過(guò)產(chǎn)生多種消化酶，幫助蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪代謝、提高飼料的利用率和轉(zhuǎn)化率，達(dá)到減少資源消耗和增產(chǎn)的目的，在飼料中加入此添加劑，可以促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦消化吸收，調(diào)節(jié)對(duì)蝦腸道菌群穩(wěn)定，提高凡納濱免疫力和腸本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末，其特征在于其含有：植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum)1A07806和嗜酸乳桿菌(Lactobacillus?acidophilus)PL7及其微囊外壁；所述植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum)1A07806的保藏編號(hào)為CCTCC?NO：M2013293；所述嗜酸乳桿菌(Lactobacillus?acidophilus)PL7的保藏編號(hào)為CCTCC?NO：M2013294。

【技術(shù)特征摘要】
1.可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末，其特征在于其含有：植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)1A07806和嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)PL7及其微囊外壁；所述植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)1A07806的保藏編號(hào)為CCTCCNO：M2013293；所述嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)PL7的保藏編號(hào)為CCTCCNO：M2013294。2.如權(quán)利要求1所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末，其特征在于所述微囊外壁采用水溶性食用膠、環(huán)狀糊精、纖維素衍生物、明膠、酪蛋白中的至少兩種作為微囊外壁。3.如權(quán)利要求1或2所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末，其特征在于所述微囊外壁通過(guò)微囊制粒機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行乳化、混合、造粒、干燥，制備成包埋著乳酸菌體的微囊外壁，制成可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末。4.如權(quán)利要求1所述可長(zhǎng)期保存的水產(chǎn)養(yǎng)殖用復(fù)合乳酸桿菌粉末的制備方法，其特征在于包括以下步驟：1)配制種子培養(yǎng)基500ml，滅菌；2)將凍存的菌種活化劃線于相應(yīng)的平板，再將活化后的單克隆接種于種子培養(yǎng)基培養(yǎng)；3)配制發(fā)酵培養(yǎng)基，將50L發(fā)酵培養(yǎng)基作為一級(jí)種子培養(yǎng)基，加入低聚果糖或海藻糖中的一種作為促進(jìn)乳酸菌生長(zhǎng)劑，滅菌；4)將步驟2)培養(yǎng)獲得的初級(jí)活化種子接種于50L一級(jí)種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，再通過(guò)移種管接種于1000L發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，活菌數(shù)≥8×109CFU/mL；5)發(fā)酵結(jié)束后，管式離心機(jī)離心收集菌體，得菌泥；6)將步驟5)獲得的菌泥添加維生素C、海藻糖、淀粉糊精、低聚果糖等中的至少兩種作為保護(hù)劑，混合均勻后，再平鋪于樣品凍干機(jī)的樣品板，并將菌泥分成小塊；7)將步驟6)獲得的...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：邵宗澤，單大鵬，李旭，林劍輝，王麗萍，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：國(guó)家海洋局第三海洋研究所，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：福建,35