一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝制造技術

本發明專利技術提供一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝，包括以下步驟：A1、將枸杞干果在60℃條件下烘干，再將其粉碎過50目篩，同時準備黃酒酵母菌種；A2、將一定量的枸杞干果粉原料投入提取罐內，加入40倍原料量的去離子水和5%黃酒酵母菌種，加熱攪拌升溫至28℃，保溫攪拌提取36小時；A3、對保溫攪拌后的液體進行過濾，以得到上清液，濾渣再次用5倍量的水與黃酒酵母分別提取兩次，方法相同。本發明專利技術通過黃酒酵母菌種和去離子水的配合，有利用了微生物法提取枸杞多糖，降低了提取所消耗的時間，提取速度快，適用性強，可靠性高。

【技術實現步驟摘要】
一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝
本專利技術涉及枸杞多糖提取
，具體為一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝。
技術介紹
枸杞多糖是一種生物活性物質，具有促進T、B、CTL、NK和巨噬細胞等免疫功能，促進IL-2、IL-3和TNFβ等細胞因子產生。增強荷瘤、化療與輻射損傷小鼠免疫功能及調節神經內分泌免疫調節(NIM)網絡的作用，淡黃色纖維狀固體，有調節免疫、延緩衰老多種功效，可制藥；枸杞多糖的提取純化分為二步。一是枸杞粗多糖的提取，二是枸杞多糖的分級純化。粗多糖的提取工藝如下：稱取已烘干粉碎的枸杞子，以石油醚：丙酮(1：1)回流脫脂，濾出溶劑，殘渣風干后以80%乙醇脫單糖和低聚糖。將脫低聚糖等后的殘渣用水在90~100℃水溶提多糖，提取液減壓濃縮后用酒精沉淀多糖，再用無水乙醇、丙酮洗滌沉淀，真空干燥得枸杞粗多糖。例如公告號為CN1263108的一種枸杞多糖提取純化工藝，該專利采用新鮮枸杞漿果分離除去枸杞籽后，制得枸杞原汁，先用50萬分子量膜分離枸杞色素及不溶固形微粒，再用1—10萬分子量膜截留溶解枸杞多糖原汁部分，真空冷凍成枸杞多糖粗品，訂制Φ45mm和Φ100mm大柱徑分離柱對枸杞多糖粗品柱層析，可以g量級以上制備純枸杞多糖。上述專利采用了先進的膜分離技術和大柱層析技術，提高了枸杞多糖的制備效率和得率，適宜于工業化生產，使枸杞多糖盡快轉化為藥品，用于醫學臨床。但是該專利只是通過過濾和層析這種物理方式進行提取枸杞多糖，提取速度慢，提取時間長；近年來，越來越多的文獻是關于枸杞多糖提取及其分離工藝，枸杞多糖作為一種無毒副作用的活性成分，越來越受到人們的關注。枸杞干果中含有60～70%單糖和雙糖、9～11%的多糖、0.2～0.3%的黃酮，以及7～8%的蛋白。目前對枸杞多糖的提取研究是采用水提法進行，該法提取溫度較高，易破壞多糖活性，同時傳統的提取方法對枸杞原料的要求高，資源利用率低。
技術實現思路
（一）解決的技術問題針對現有技術的不足，本專利技術提供了一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝，解決了提取速度慢，提取時間長的問題，提高枸杞多糖得率和資源利用率。（二）技術方案為實現以上目的，本專利技術通過以下技術方案予以實現：一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝，包括以下步驟：A1、將枸杞干果在60℃條件下烘干，再將其粉碎過50目篩，同時準備黃酒酵母菌種。A2、將一定量的枸杞干果粉原料投入提取罐內，加入40倍原料量的去離子水和5%黃酒酵母菌種，加熱攪拌升溫至28℃，保溫攪拌提取36小時；A3、對保溫攪拌后的液體進行過濾，以得到上清液，濾渣再次用5倍量的水與黃酒酵母分別提取兩次，方法相同；A4、濾液用真空泵抽到單效濃縮器中（濾液以裝滿容器體積的2/3為宜），在溫度50±5℃、真空度0.05-0.06MPa和蒸汽壓力0.2MPa條件下進行減壓濃縮，濃縮到至固形物為50-55%左右；A5、加入4倍體積的無水乙醇，4℃下醇沉12h，醇沉兩次，再經過離心、乙醚洗滌、粉碎和噴霧干燥，最后通過80目篩，得枸杞多糖。優選的，A1中黃酒酵母菌種的制作方法包括以下步驟：A11、YPD培養基的配制。A12、挑取黃酒酵母單菌落接菌于YPD培養基中，并將混入有黃酒酵母單菌的YPD培養基放入28℃的空氣搖床中，180r/min，培養48小時之后即得。優選的，A11中YPD培養基的配制方法為稱取10g酵母浸粉、20g蛋白胨、20g分析純葡萄糖，加水定容至1000mL，分裝置500mL的錐形瓶中各100mL，121℃高溫高壓滅菌15min制得。優選的，A3中的過濾采用板框進行，板框由濾板和濾框交替疊合構成，在板與框之間設置有壓濾布。優選的，A1和A5中粉碎均采用型號為ZN-04B的小型粉碎機。優選的，A5中的離心采用低速大容量臺式離心機。（三）有益效果本專利技術提供了一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝。具備以下有益效果：1、本專利技術通過黃酒酵母菌種和去離子水的配合，有利用了微生物法提取枸杞多糖，降低了提取所消耗的時間，提取速度快，適用性強，可靠性高。2、本專利技術有效的利用了板框對保溫攪拌后的液體進行過濾，并且板框由濾板和濾框交替疊合構成，在板與框之間設置有壓濾布，過濾面積大，占地面積小，過濾效果高，結構簡單，便于攜帶。3、本專利技術通過無水乙醇對固定物含量50-55%的濾液進行醇沉，再經過低速大容量臺式離心機進行離心、乙醚洗滌保證了提取后的枸杞多糖干凈度，提取質量高。4、本專利技術不使用有機溶劑，對環境友好，枸杞資源利用率高，提取溫度低，發酵過程中產生多肽和多酚等功效成分，可以提高枸杞的生物活性，保留了枸杞的多糖、黃酮等有效成分，資源利用率達到55%以上。附圖說明圖1為本專利技術微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝流程圖;圖2為多糖提取率溫度單因素實驗圖;圖3為多糖提取率料液比單因素實驗圖;圖4為多糖提取率提取時間單因素實驗圖。具體實施方式下面將結合本專利技術實施例中的附圖，對本專利技術實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本專利技術一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本專利技術中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本專利技術保護的范圍。本專利技術實施例提供一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝，如圖1所示，包括以下步驟：A1、將枸杞干果在60℃條件下烘干，再將其粉碎過50目篩，同時準備黃酒酵母菌種。本專利技術A1中黃酒酵母菌種的制作方法包括以下步驟：A11、YPD培養基的配制。A12、挑取黃酒酵母單菌落接菌于YPD培養基中，并將混入有黃酒酵母單菌的YPD培養基放入28℃的空氣搖床中，180r/min，培養48小時之后即得。本專利技術A11中YPD培養基的配制方法為稱取10g酵母浸粉、20g蛋白胨、20g分析純葡萄糖，加水定容至1000mL，分裝置500mL的錐形瓶中各100mL，121℃高溫高壓滅菌15min制得。A2、將一定量的枸杞干果粉原料投入提取罐內，加入40倍原料量的去離子水和5%黃酒酵母菌種，加熱攪拌升溫至28℃，保溫攪拌提取36小時。A3、對保溫攪拌后的液體進行過濾，以得到上清液，濾渣再次用5倍量的水與黃酒酵母分別提取兩次，方法相同。本專利技術A3中的過濾采用板框進行，板框由濾板和濾框交替疊合構成，在板與框之間設置有壓濾布。A4、濾液用真空泵抽到單效濃縮器中（濾液以裝滿容器體積的2/3為宜），在溫度50±5℃、真空度0.05-0.06MPa和蒸汽壓力0.2MPa條件下進行減壓濃縮，濃縮到至固形物為50-55%左右。A5、加入4倍體積的無水乙醇，4℃下醇沉12h，醇沉兩次，再經過離心、乙醚洗滌、粉碎和噴霧干燥，最后通過80目篩，得枸杞多糖。本專利技術A1和A5中粉碎均采用型號為ZN-04B的小型粉碎機，A5中的離心采用低速大容量臺式離心機。該微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝是通過以下步驟優化而來：S1、利用單因素實驗先后采集溫度對枸杞多糖提取率的影響工藝參數、料液比對枸杞多糖提取率的影響工藝參數和提取時間對枸杞多糖提取率的影響工藝參數，每個因素做三個平行。S1中溫度對枸杞多糖提取率的影響工藝參數的采集方法為稱取4g干燥的枸杞粉末4份，加入去離子水，配制料液比為1:50，分別于26℃、28℃、30℃本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝，其特征在于，包括以下步驟：A1、將枸杞干果在60℃條件下烘干，再將其粉碎過50目篩，同時準備黃酒酵母菌種；A2、將一定量的枸杞干果粉原料投入提取罐內，加入40倍原料量的去離子水和5%黃酒酵母菌種，加熱攪拌升溫至28℃，保溫攪拌提取36小時；A3、對保溫攪拌后的液體進行過濾，以得到上清液，濾渣再次用5倍量的水與黃酒酵母分別提取兩次，方法相同；A4、濾液用真空泵抽到單效濃縮器中（濾液以裝滿容器體積的2/3為宜），在溫度50±5℃、真空度0.05?0.06MPa和蒸汽壓力0.2MPa條件下進行減壓濃縮，濃縮到至固形物為50?55%左右；A5、加入4倍體積的無水乙醇，4℃下醇沉12?h，醇沉兩次，再經過離心、乙醚洗滌、粉碎和噴霧干燥，最后通過80目篩，得枸杞多糖。

【技術特征摘要】
1.一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝，其特征在于，包括以下步驟：A1、將枸杞干果在60℃條件下烘干，再將其粉碎過50目篩，同時準備黃酒酵母菌種；A2、將一定量的枸杞干果粉原料投入提取罐內，加入40倍原料量的去離子水和5%黃酒酵母菌種，加熱攪拌升溫至28℃，保溫攪拌提取36小時；A3、對保溫攪拌后的液體進行過濾，以得到上清液，濾渣再次用5倍量的水與黃酒酵母分別提取兩次，方法相同；A4、濾液用真空泵抽到單效濃縮器中（濾液以裝滿容器體積的2/3為宜），在溫度50±5℃、真空度0.05-0.06MPa和蒸汽壓力0.2MPa條件下進行減壓濃縮，濃縮到至固形物為50-55%左右；A5、加入4倍體積的無水乙醇，4℃下醇沉12h，醇沉兩次，再經過離心、乙醚洗滌、粉碎和噴霧干燥，最后通過80目篩，得枸杞多糖。2.根據權利要求1所述的一種微生物法提取枸杞多糖產業化生產工藝，其特征在于：A1中黃酒酵母菌種的制作方法包括以下步驟：A11、...

【專利技術屬性】
技術研發人員：孫允武，夏濤，解芳，馬正創，麻淑珍，吳海偉，李林，
申請(專利權)人：青海康普生物科技股份有限公司，
類型：發明
國別省市：青海,63