含D-2-烷基色氨酸的能促進生長激素釋放的多肽化合物制造技術

一種分子式為Ａ－Ｄ－Ｍｒｐ－（Ａｌａ）↓［ｎ］－Ｂ－Ｃ的肽，其中Ａ是任何天然Ｌ－氨基酸或其異構體，其前提是，如果Ｂ是Ｔｒｐ而Ｃ是Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ↓［２］，則Ａ不是Ｈｉｓ；或者Ａ是咪唑乙酰基、異哌啶甲酰基、４－氨基丁酰基、４－（氨基甲基）環己烷羰基、Ｇｌｕ－Ｔｙｒ－Ａｌａ－Ｈｉｓ、Ｔｙｒ－Ａｌａ－Ｈｉｓ、Ｔｙｒ－Ｈｉｓ、Ｄ－Ｔｈｒ－Ｈｉｓ；Ｄ為右旋異構體，Ｍｒｐ是２－烷基色氨酸；ｎ是０或１；Ｂ是Ｌ或Ｄ－Ｔｒｐ、Ｐｈｅ或Ｄ－β－萘基丙氨酸；Ｃ是ＮＨ↓［２］、Ｄ－Ｐｈｅ－ＬｙｓＮＨ↓［２］、Ｄ－Ｔｒｐ－ＬｙｓＮＨ↓［２］、Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ↓［２］、Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ↓［２］、Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＴｈｒＮＨ↓［２］、Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－Ｄ－ＴｈｒＮＨ↓［２］、ＯＲ，其中Ｒ是Ｃ↓［１］－Ｃ↓［３］烷基，以及所述多肽中的任一種與可以藥用的有機酸或無機酸形成的加成鹽。這些化合物能夠促進生長激素的釋放，并且口服時具有活性。（*該技術在2015年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及含有D-2-烷基色氨酸的寡肽化合物，該化合物可以使親軀體細胞(somatotrope)釋放生長激素(GH)，而且口服時具有活性。在給哺乳動物服用能誘導生長激素(GH)釋放的化合物之后，動物體內的GH水平提高。在服藥后如果獲得足夠高的GH水平的話，可使得動物的生長加快、產肉量增加、并能提高產乳量。而且，業已知道，給哺乳動物服用已知的生長激素釋放劑，如生長激素釋放激素(GHRH)，可以提高動物的生長激素水平。給動物服用生長激素釋放肽也可以提高其體內的生長激素水平，某些肽在以前已經公開，例如，可參考如下美國專利US 4,223,019、US4,223,020、US 4,223,021、US 4,224,316、US 4,226,857、US4,228,155、US 4,228,156、US 4,228,157、US 4,228,158、US4,410,512、US 4,410,513、US 4,411,890和US 4,839,344。因此，目前需要的是相當簡單的、能夠促進生長激素釋放的短鏈多肽，這種多肽還要具備如下條件制備起來簡單、方便，易于純化和配制，而且口服時具有活性。多年來研究較多的生長激素釋放肽(GHRP)之一是GHRP-6(C.Y.Bowers等，Endocrinology 1141537(1984))，其結構式為His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2。GHRP-6在體外和體內都能釋放生長激素，而且動物和人口服時都有活性。其分子機理業已被研究過，還有其類似物之一的七肽GHRP-1(Cheng等，Endocrinology 1242791(1989)；M.S.Akman等，Endocrinology1321286(1993))也已被研究過。業已發現，與天然GHRP相反，這些肽是通過不同的GH釋放受體和不同的機制起作用，它們獨立于cAMP，而且是通過其它的胞內途徑，如供鈣轉移途徑和依賴于蛋白激酶C(PKC)的過程起作用(L.Bresson-Bepoldin和L.Dufy-Barbe，Cell.Calcium 15，247，(1994))。業已發現，在GHRP系列的寡肽中引入D-2-烷基色氨酸(2-Mrp)，可以全新的方式修飾已知的胞內GH釋放機制。在某些場合，業已證實其能夠明顯提高鼠和人的腦垂體前葉中腺苷酸環化酶的活性，但其具體的機理尚有待徹底查明。因此，通過在色氨酸的2-位(在其D-構型上)引入一個烷基所進行的修飾，除了有利于提高Trp殘基的穩定性之外(R.DeghenghiWO 91/18016，公開日為1991年11月28日；R.Deghenghi等，LifeSciences 54，1321，(1994))，而且還能出人意料地徹底改變其胞內機制，使其獨立于鈣，有時依賴于腺苷酸環化酶，而且它更類似于GHRH，及其它肽激素(James D.Watson等，Molecular Biology of the Gene，4th版，The Benj arnin/Cummings Publishing Company，Inc.，Menlo Park，California，1987，P.60)。本專利技術的其它意外的特殊特征是，某些五肽、六肽和七肽具有很高的效價和理想的口服活性/效價比，該系列較小的四肽也是如此。本專利技術寡肽的分子式如下A-D-Mrp-(Ala)n-B-C，其中，A是任何天然L-氨基酸或其D-異構體，前提是，如果B是Trp而C是D-Phe-Lys-NH2的話，A不是His，或者A是咪唑乙酰基、異哌啶甲酰基(isonipecotyl)、4-氨基丁酰基，4-(氨基甲基)環己烷羰基、Glu-Tyr-Ala-His、Tyr-Ala-His、Tyr-His、D-Thr-His，更理想的是，A是D-Ala、D-Thr、Tyr；D為右旋異構體，Mrp是2-烷基色氨酸，最好是2-甲基色氨酸；n是0或1；B是L-或D-Trp、Phe或D-β-Nal；C是NH2、D-Phe-LysNH2、Phe-LysNH2、D-Trp-LysNH2、D-Phe-Lys-ThrNH2、D-Phe-Lys-D-ThrNH2、OR，其中R是C1-C3烷基，更理想的是，當B是Trp時，C是Phe-LysNH2或D-Phe-LysNH2，而當B是Phe時，C是D-Trp-LysNH2。本專利技術基于如下發現能夠促進生長激素釋放并提高動物血液中生長激素水平的不同短鏈多肽的特征是，所有這類多肽的肽鏈上都含有2-烷基色氨酸的D-異構體(D-2-Me-Trp或D-Mrp)。屬于本專利技術范圍內的多肽的分子式為A-D-Mrp-(Ala)n-B-C，其中，A是任何天然L-氨基酸或其D-異構體，前提是，如果B是Trp而C是D-Phe-Lys-NH2，則A不是His，或者A是咪唑乙酰基、異哌啶甲酰基、4-氨基丁酰基、4-(氨基甲基)環己烷羰基、Glu-Tyr-Ala-His、Tyr-Ala-His、Tyr-His、D-Thr-His，更理想的是，A是D-Ala、D-Thr，Tyr；D是右旋異構體，Mrp是2-烷基色氨酸，最好是2-甲基色氨酸；n是0或1；B是L-或D-Trp、或D-β-Nal；C是NH2、D-Phe-LysNH2、Phe-LysNH2、D-Trp-LysNH2、D-Phe-Lys-ThrNH2、D-Phe-Lys-D-ThrNH2、OR，其中R是C1-C3烷基，更理想的是，當B是Trp時，C是Phe-LysNH2或D-Phe-LysNH2，而當B是Phe時，C是D-Trp-LysNH2和由可以藥用的有機酸或無機酸與所述多肽中任一種所形成的加成鹽。這里所采用的氨基酸殘基的縮寫與肽的標準命名一致Gly＝甘氨酸Tyr＝L-酪氨酸Ile＝L-異亮氨酸Glu＝L-谷氨酸Thr＝L-蘇氨酸Phe＝L-苯丙氨酸Ala＝L-丙氨酸Lys＝L-賴氨酸Asp＝L-天冬氨酸Cys＝半胱氨酸Arg＝L-精氨酸Gln＝L-谷氨酰胺Pro＝L-脯氨酸Leu＝L-亮氨酸Met＝L-蛋氨酸Ser＝L-絲氨酸Asn＝L-天冬酰胺His＝L-組氨酸Trp＝L-色氨酸Val＝L-纈氨酸此外，D-β-Nal＝D-β-萘基丙氨酸；INIP＝異哌啶甲酰基；IMA＝咪唑乙酰基；GAB＝4-氨基丁酰基；Mrp＝2-烷基色氨酸。本專利技術中的烷基是含有1-3個碳原子的低級烷基，例如，甲基、乙基、丙基、異丙基。其中甲基最佳。所有以“D”開頭的氨基酸的3字母縮寫表示該氨基酸殘基的D-構型。在本專利技術的實施方案中，優選的生長激素釋放化合物有INIP-D-Mrp-D-Trp-Phe-Lys-NH2；INIP-D-Mrp-D-β-Nal-Phe-Lys-NH2；IMA-D-Mrp-D-Trp-Phe-Lys-NH2；IMA-D-Mrp-D-β-Nal-Phe-Lys-NH2；GAB-D-Mrp-D-Trp-Phe-Lys-NH2；GAB-D-Mrp-D-β-Nal-Phe-Lys-NH2；GAB-D-Mrp-D-β-Nal-NH2；GAB-D-Mrp-D-β-Nal-OC2H5；4-(氨基甲基)環己烷羰基-D-Mrp-D-Trp-Phe-Lys-NH2；4-本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種肽，其分子式為：Ａ－Ｄ－Ｍｒｐ－（Ａｌａ）↓［ｎ］－Ｂ－Ｃ，其中，Ａ是任何天然Ｌ－氨基酸或其Ｄ－異構體，前提是，如果Ｂ是Ｔｒｐ而且Ｃ是Ｄ－Ｌｙｓ－ＮＨ↓［２］的話，Ａ不是Ｈｉｓ；或者Ａ是咪唑乙酰基、異哌啶甲酰基、４－氨基丁酰基、 ４－（氨基甲基）環己烷羰基、Ｇｌｕ－Ｔｙｒ－Ａｌａ－Ｈｉｓ、Ｔｙｒ－Ａｌａ－Ｈｉｓ、Ｔｙｒ－Ｈｉｓ、Ｄ－Ｔｈｒ－Ｈｉｓ；Ｄ是右旋異構體，Ｍｒｐ是２－烷基色氨酸；ｎ是０或１；Ｂ是Ｌ－或Ｄ－Ｔｒｐ、Ｐｈｅ或Ｄ－β－Ｎａｌ；Ｃ是ＮＨ↓［２］、Ｄ－Ｔｒｐ－ＬｙｓＮＨ↓［２］、Ｄ－Ｐｈｅ－ＬｙｓＮＨ↓［２］、Ｐｈｅ－ＬｙｓＮＨ↓［２］、Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＴｈｒＮＨ↓［２］、Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－Ｄ－ＴｈｒＮＨ↓［２］、ＯＲ，其中Ｒ是Ｃ↓［１］－Ｃ↓［３］烷基，以及所述多肽中任一種與可以藥用的有機酸或無機酸的加成鹽。

【技術特征摘要】
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【專利技術屬性】
技術研發人員：R德根格希，
申請(專利權)人：R德根格希，
類型：發明
國別省市：CH[瑞士]