一種大觀霉素的檢測(cè)方法技術(shù)

本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)公開(kāi)了一種大觀霉素的檢測(cè)方法，包括如下步驟：1）分別制備凍干有大觀霉素特異性抗體?膠體金標(biāo)記物的微孔試劑；2）分別制備具有包被大觀霉素?載體蛋白偶聯(lián)物的檢測(cè)線印跡和包被抗抗體的質(zhì)控線印跡的反應(yīng)膜；3）將2)制備好的反應(yīng)膜與樣品吸收墊、保護(hù)膜、吸水墊、底板組裝成試紙；4）將1）和3）制備好的凍干有大觀霉素特異性抗體?膠體金標(biāo)記物的微孔試劑、微孔條、微孔塞和試紙組裝成試紙條。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)避免了傳統(tǒng)檢測(cè)中復(fù)雜的樣品前處理過(guò)程，使檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)單、快速且具有高的靈敏度，對(duì)保證我國(guó)食品中大觀霉素的有效檢測(cè)和監(jiān)控監(jiān)管，盡快提升我國(guó)的食品安全性和食品安全的控制能力將發(fā)揮重要作用，具有十分重要意義。

Method for detecting spectinomycin

The invention discloses a method for detection of spectinomycin, which comprises the following steps: 1) were prepared by lyophilization reagent Yt antibody microporous grand colloidal gold marker; 2) were prepared with coated membrane reaction control line blotting detection line spectinomycin carrier protein conjugate blot and the coated antibody; 3) 2) reaction film prepared with the sample absorption pad, protective film, absorbent pad, floor assembly test; 4) 1) 3) and microporous reagents, the prepared freeze-dried with spectinomycin via specific antibody colloidal gold marker micro a hole, microporous plug and strip assembled into strips. The invention avoids the traditional detection in complex sample pretreatment process, the detection process is simple, rapid and has high sensitivity, to ensure our food in spectinomycin detection and monitoring supervision, improve China's food safety and food safety control as soon as possible to force will play an important role, it is important significance.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種大觀霉素的檢測(cè)方法
本專(zhuān)利技術(shù)涉及一種檢測(cè)方法，具體是一種大觀霉素的檢測(cè)方法。
技術(shù)介紹
大觀霉素又稱(chēng)壯觀霉素、奇放線菌素、壯觀菌素等，為大觀鏈霉菌所產(chǎn)生的一種氨基環(huán)醇類(lèi)抗生素，對(duì)革蘭氏陰性菌(如布魯氏菌、克雷伯菌屬、變形桿菌、沙門(mén)氏菌、巴氏桿菌等)有較強(qiáng)作用，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌(鏈球菌、葡萄球菌等)作用較弱，對(duì)支原體亦有一定作用，是一新型特效專(zhuān)治淋病的抗生素，對(duì)淋病奈瑟菌有較強(qiáng)的抗菌作用。能促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，是良好的動(dòng)物飼料添加劑，作為獸藥廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)中。一些不法商販?zhǔn)芙?jīng)濟(jì)利益的驅(qū)使濫用抗生素，使大量抗生素殘留在畜產(chǎn)品中，如果長(zhǎng)期食用含有抗生素殘留的動(dòng)物源性食品，也就相當(dāng)于長(zhǎng)期低劑量吸收抗生素，使人體內(nèi)菌株產(chǎn)生抗生素抗性，給患病時(shí)使用抗生素治療帶來(lái)不良影響，會(huì)破壞機(jī)體內(nèi)環(huán)境平衡，造成菌群失調(diào)，抗生素過(guò)敏體質(zhì)的人會(huì)出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)，引起免疫性溶血，同時(shí)造成食品和環(huán)境中藥物殘留污染的一系列問(wèn)題。因此，各國(guó)政府和國(guó)際組織對(duì)動(dòng)物性食品抗生素殘留污染十分重視，已成為涉及人類(lèi)健康的公共衛(wèi)生熱點(diǎn)問(wèn)題。建立牛、羊奶及制品中大觀霉素的殘留檢測(cè)方法對(duì)食品安全、進(jìn)出口貿(mào)易等方面都有重要意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)的目的在于提供一種大觀霉素的檢測(cè)方法，以解決上述
技術(shù)介紹
中提出的問(wèn)題。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專(zhuān)利技術(shù)提供如下技術(shù)方案：一種大觀霉素的檢測(cè)方法，包括如下步驟：1）分別制備凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑；2）分別制備具有包被大觀霉素-載體蛋白偶聯(lián)物的檢測(cè)線印跡和包被抗抗體的質(zhì)控線印跡的反應(yīng)膜；3）將2)制備好的反應(yīng)膜與樣品吸收墊、保護(hù)膜、吸水墊、底板組裝成試紙；4）將1）和3）制備好的凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑、微孔條、微孔塞和試紙組裝成試紙條；5）配置不同濃度的含有磷鎢酸的鹽酸大觀霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液，靜置半小時(shí)后過(guò)濾，以蒸餾水為參比溶液，測(cè)定上述不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液在200~255nm下的吸光度，然后以吸光度為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；6）取待測(cè)大觀霉素發(fā)酵液或成品，加入磷鎢酸溶液，靜置半小時(shí)，稀釋定容過(guò)濾后作為測(cè)試液；以同樣處理的不加磷鎢酸溶液的待測(cè)大觀霉素成品為參比溶液，測(cè)定測(cè)試液在255nm下的吸光度；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算大觀霉素的濃度。作為本專(zhuān)利技術(shù)再進(jìn)一步的方案：還包括如下步驟：直接將試紙插入包含有檢測(cè)樣品溶液和微孔試劑的混合溶液的微孔中進(jìn)行檢測(cè)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專(zhuān)利技術(shù)的有益效果是：本專(zhuān)利技術(shù)避免了傳統(tǒng)檢測(cè)中復(fù)雜的樣品前處理過(guò)程，使檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)單、快速且具有高的靈敏度，對(duì)保證我國(guó)食品中大觀霉素的有效檢測(cè)和監(jiān)控監(jiān)管，盡快提升我國(guó)的食品安全性和食品安全的控制能力將發(fā)揮重要作用，具有十分重要意義。具體實(shí)施方式下面對(duì)本專(zhuān)利技術(shù)實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。本專(zhuān)利技術(shù)實(shí)施例中，一種大觀霉素的檢測(cè)方法，包括如下步驟：1）分別制備凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑；2）分別制備具有包被大觀霉素-載體蛋白偶聯(lián)物的檢測(cè)線印跡和包被抗抗體的質(zhì)控線印跡的反應(yīng)膜；3）將2)制備好的反應(yīng)膜與樣品吸收墊、保護(hù)膜、吸水墊、底板組裝成試紙；4）將1）和3）制備好的凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑、微孔條、微孔塞和試紙組裝成試紙條；5）配置不同濃度的含有磷鎢酸的鹽酸大觀霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液，靜置半小時(shí)后過(guò)濾，以蒸餾水為參比溶液，測(cè)定上述不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液在255nm下的吸光度，然后以吸光度為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；6）取待測(cè)大觀霉素發(fā)酵液或成品，加入磷鎢酸溶液，靜置半小時(shí)，稀釋定容過(guò)濾后作為測(cè)試液；以同樣處理的不加磷鎢酸溶液的待測(cè)大觀霉素成品為參比溶液，測(cè)定測(cè)試液在200~255nm下的吸光度；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算大觀霉素的濃度。還包括如下步驟：直接將試紙插入包含有檢測(cè)樣品溶液和微孔試劑的混合溶液的微孔中進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)施例1：本專(zhuān)利技術(shù)大觀霉素的檢測(cè)方法，包括如下步驟：1）分別制備凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑；2）分別制備具有包被大觀霉素-載體蛋白偶聯(lián)物的檢測(cè)線印跡和包被抗抗體的質(zhì)控線印跡的反應(yīng)膜；3）將2)制備好的反應(yīng)膜與樣品吸收墊、保護(hù)膜、吸水墊、底板組裝成試紙；4）將1）和3）制備好的凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑、微孔條、微孔塞和試紙組裝成試紙條；5）配置不同濃度的含有磷鎢酸的鹽酸大觀霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液，靜置半小時(shí)后過(guò)濾，以蒸餾水為參比溶液，測(cè)定上述不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液在255nm下的吸光度，然后以吸光度為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；6）取待測(cè)大觀霉素發(fā)酵液或成品，加入磷鎢酸溶液，靜置半小時(shí)，稀釋定容過(guò)濾后作為測(cè)試液；以同樣處理的不加磷鎢酸溶液的待測(cè)大觀霉素成品為參比溶液，測(cè)定測(cè)試液在200下的吸光度；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算大觀霉素的濃度。還包括如下步驟：直接將試紙插入包含有檢測(cè)樣品溶液和微孔試劑的混合溶液的微孔中進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)施例2：本專(zhuān)利技術(shù)大觀霉素的檢測(cè)方法，包括如下步驟：1）分別制備凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑；2）分別制備具有包被大觀霉素-載體蛋白偶聯(lián)物的檢測(cè)線印跡和包被抗抗體的質(zhì)控線印跡的反應(yīng)膜；3）將2)制備好的反應(yīng)膜與樣品吸收墊、保護(hù)膜、吸水墊、底板組裝成試紙；4）將1）和3）制備好的凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑、微孔條、微孔塞和試紙組裝成試紙條；5）配置不同濃度的含有磷鎢酸的鹽酸大觀霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液，靜置半小時(shí)后過(guò)濾，以蒸餾水為參比溶液，測(cè)定上述不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液在255nm下的吸光度，然后以吸光度為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；6）取待測(cè)大觀霉素發(fā)酵液或成品，加入磷鎢酸溶液，靜置半小時(shí)，稀釋定容過(guò)濾后作為測(cè)試液；以同樣處理的不加磷鎢酸溶液的待測(cè)大觀霉素成品為參比溶液，測(cè)定測(cè)試液在255nm下的吸光度；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算大觀霉素的濃度。還包括如下步驟：直接將試紙插入包含有檢測(cè)樣品溶液和微孔試劑的混合溶液的微孔中進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)施例3：本專(zhuān)利技術(shù)大觀霉素的檢測(cè)方法，包括如下步驟：1）分別制備凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑；2）分別制備具有包被大觀霉素-載體蛋白偶聯(lián)物的檢測(cè)線印跡和包被抗抗體的質(zhì)控線印跡的反應(yīng)膜；3）將2)制備好的反應(yīng)膜與樣品吸收墊、保護(hù)膜、吸水墊、底板組裝成試紙；4）將1）和3）制備好的凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑、微孔條、微孔塞和試紙組裝成試紙條；5）配置不同濃度的含有磷鎢酸的鹽酸大觀霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液，靜置半小時(shí)后過(guò)濾，以蒸餾水為參比溶液，測(cè)定上述不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液在255nm下的吸光度，然后以吸光度為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；6）取待測(cè)大觀霉素發(fā)酵液或成品，加入磷鎢酸溶液，靜置半小時(shí)，稀釋定容過(guò)濾后作為測(cè)試液；以同樣處理的不加磷鎢酸溶液的待測(cè)大觀霉素成品為參比溶液，測(cè)定測(cè)試液在210nm下的吸光度；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算大觀霉素的濃度。還包括如下步驟：直接將試紙插入包含有檢測(cè)樣品溶液和微孔試劑的混合溶液的微孔中進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)施例4：本專(zhuān)利技術(shù)大觀霉素的檢測(cè)方法，包括如下步驟：1）分別制備凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑；2）分別制備具有包被大觀霉素-載體蛋白偶聯(lián)物的檢測(cè)線印跡本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種大觀霉素的檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟：1）分別制備凍干有大觀霉素特異性抗體?膠體金標(biāo)記物的微孔試劑；2）分別制備具有包被大觀霉素?載體蛋白偶聯(lián)物的檢測(cè)線印跡和包被抗抗體的質(zhì)控線印跡的反應(yīng)膜；3）將2)制備好的反應(yīng)膜與樣品吸收墊、保護(hù)膜、吸水墊、底板組裝成試紙；4）將1）和3）制備好的凍干有大觀霉素特異性抗體?膠體金標(biāo)記物的微孔試劑、微孔條、微孔塞和試紙組裝成試紙條；5）配置不同濃度的含有磷鎢酸的鹽酸大觀霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液，靜置半小時(shí)后過(guò)濾，以蒸餾水為參比溶液，測(cè)定上述不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液:200~255nm下的吸光度，然后以吸光度為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；6）取待測(cè)大觀霉素發(fā)酵液或成品，加入磷鎢酸溶液，靜置半小時(shí)，稀釋定容過(guò)濾后作為測(cè)試液；以同樣處理的不加磷鎢酸溶液的待測(cè)大觀霉素成品為參比溶液，測(cè)定測(cè)試液在255nm下的吸光度；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算大觀霉素的濃度。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種大觀霉素的檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟：1）分別制備凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑；2）分別制備具有包被大觀霉素-載體蛋白偶聯(lián)物的檢測(cè)線印跡和包被抗抗體的質(zhì)控線印跡的反應(yīng)膜；3）將2)制備好的反應(yīng)膜與樣品吸收墊、保護(hù)膜、吸水墊、底板組裝成試紙；4）將1）和3）制備好的凍干有大觀霉素特異性抗體-膠體金標(biāo)記物的微孔試劑、微孔條、微孔塞和試紙組裝成試紙條；5）配置不同濃度的含有磷鎢酸的鹽酸大觀霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液，靜置半小時(shí)后過(guò)濾，以蒸餾水為參比溶液...

【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：吳敏芳，徐靜，趙春城，胡勇，蔣韋艷，劉金杰，朱倩倩，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：無(wú)錫艾科瑞思產(chǎn)品設(shè)計(jì)與研究有限公司，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：江蘇,32