黃芪健胃制劑的特征圖譜建立和檢測方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種黃芪健胃制劑的特征圖譜建立及檢測方法。所述特征圖譜建立方法包括如下步驟：參照物溶液的制備；供試品溶液的制備：精密稱定黃芪健胃制劑，精密加入體積濃度為70?90％的甲醇水溶液進行提取，濾過，取續(xù)濾液；特征圖譜建立：分別精密吸取所述供試品溶液和參照物溶液，注入高效液相色譜儀；其中，所述高效液相色譜儀采用的流動相為：以乙腈為流動相A，以體積濃度為0.1％的磷酸水溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式。該方法根據(jù)黃芪健胃制劑處方組成，合理控制高效液相色譜的流動相條件，構(gòu)建得到黃芪健胃制劑的特征圖譜，能夠全面反映黃芪健胃制劑的質(zhì)量水平。同時也建立了一種簡單、可靠、實用的黃芪健胃制劑的檢測方法。

Establishment and detection method of Astragalus membranaceus Jianwei preparation

The invention relates to a characteristic atlas construction and a detection method of Astragalus membranaceus stomach preparation. The fingerprint establishment method comprises the following steps: reference solution preparation; sample solution preparation: precision said Huangqi Jianwei preparation, precision by adding methanol water solution volume concentration of 70 90% extraction, filtration, the filtrate continued; fingerprint establishment: don't draw the precision the test solution and reference solution, HPLC; among them, the flow of the HPLC phase: with acetonitrile as mobile phase A, the volume concentration of 0.1% phosphate water solution as mobile phase B, using gradient elution. According to the formulation of Huangqi Jianwei, reasonable control of the HPLC mobile phase conditions, construct the fingerprint of Huangqi Jianwei preparations, which can reflect the quality level of Huangqi Jianwei preparations. At the same time, a simple, reliable and practical method for the determination of Astragalus and stomach preparations was established.

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
黃芪健胃制劑的特征圖譜建立和檢測方法
本專利技術(shù)涉及中藥制劑質(zhì)量控制，特別是涉及黃芪健胃制劑的特征圖譜建立和檢測方法。
技術(shù)介紹
黃芪健胃制劑是由我國經(jīng)典方“小建中湯方”演變而來，經(jīng)現(xiàn)代工藝制備而成，由黃芪、白芍、桂枝、生姜、大棗和甘草6味中藥組成，具有補氣溫中，緩急止痛的功效，主要用于脾胃虛寒所致的胃痛，癥見胃痛拘急、胃寒肢冷、喜溫喜按、心悸自汗，胃、十二指腸潰瘍見上證候者。由于黃芪健胃制劑為6味中藥制成的復(fù)方制劑，其藥效為多種活性成分協(xié)同作用的結(jié)果。因此，黃芪健胃制劑的多種活性成分含量是否達標是其質(zhì)量的重要因素。而目前，2015年《中國藥典》收載的黃芪健胃膏，僅采用薄層色譜法對處方中的黃芪、白芍和甘草3種藥味進行定性鑒別和采用高效液相色譜法測定單一指標成分芍藥苷的含量從而進行質(zhì)量控制，其檢測過程較繁瑣，檢測工作量大，且存在一定的局限性，無法較全面反映黃芪健胃制劑的質(zhì)量水平。
技術(shù)實現(xiàn)思路
基于此，有必要提供一種方法簡單、能夠全面反映黃芪健胃制劑的質(zhì)量水平的黃芪健胃制劑的特征圖譜建立方法。一種黃芪健胃制劑的特征圖譜建立方法，所述特征圖譜建立方法包括如下步驟：參照物溶液的制備：分別精密稱定沒食子酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芹糖甘草苷、甘草苷、肉桂酸對照品，混合后加甲醇溶解，即得所述參照物溶液；供試品溶液的制備：精密稱定黃芪健胃制劑，精密加入體積濃度為70-90％的甲醇水溶液進行提取，濾過，取續(xù)濾液，即得所述供試品溶液；特征圖譜建立：分別精密吸取所述供試品溶液和參照物溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得由10個共有特征峰構(gòu)成的所述特征圖譜；其中，所述高效液相色譜儀采用的流動相為：以乙腈為流動相A，以體積濃度為0.1％的磷酸水溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式。在其中一個實施例中，所述梯度洗脫方式為：0-25min，流動相A的體積百分數(shù)由8％變化至30％，流動相B的體積百分數(shù)由92％變化至70％；25-40min，流動相A的體積百分數(shù)由30％變化至45％，流動相B的體積百分數(shù)由70％變化至55％。在其中一個實施例中，所述高效液相色譜儀的檢測波長采用雙波長切換測定法，切換方式為：0-27min，檢測波長為230nm，27-40min，檢測波長切換為290nm。在其中一個實施例中，所述高效液相色譜儀的條件為：色譜柱：以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；柱溫25-35℃，流速為0.8-1.2mL·min-1。在其中一個實施例中，所述柱溫25℃，流速為1mL·min-1。在其中一個實施例中，每1mL所述參照物溶液含沒食子酸25-35μg、芍藥內(nèi)酯苷40-60μg、芍藥苷110-130μg、毛蕊異黃酮葡萄糖苷1-10μg、芹糖甘草苷15-25μg、甘草苷15-25μg、肉桂酸1-10μg。在其中一個實施例中，所述供試品溶液的制備中，精密加入體積濃度為70-90％的甲醇水溶液進行提取，對所得混合液進行振搖或超聲，然后再濾過，所得續(xù)濾液即為供試品溶液。在其中一個實施例中，所述10個共有特征峰的相對保留時間的規(guī)定值為：0.305(峰1，沒食子酸)，0.397(峰2)，0.916(峰3，芍藥內(nèi)酯苷)，1.000(峰4，芍藥苷)，1.137(峰5，毛蕊異黃酮葡萄糖苷)，1.180(峰6，芹糖甘草苷)，1.213(峰7，甘草苷)，1.514(峰8)，1.950(峰9)，2.072(峰10，肉桂酸)。各共有特征峰的實際相對保留時間應(yīng)在所述規(guī)定值的±10％之內(nèi)。在其中一個實施例中，按芍藥苷峰(峰4)計算，所述色譜柱的理論塔板數(shù)不低于2000。本專利技術(shù)還提供一種黃芪健胃制劑的檢測方法，包括如下步驟：供試品溶液的制備：精密稱定黃芪健胃制劑，精密加入體積濃度為70-90％的甲醇水溶液進行提取，濾過，取續(xù)濾液，即得所述供試品溶液；檢測：精密吸取所述供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即可；其中，所述高效液相色譜儀采用的流動相為：以乙腈為流動相A，以體積濃度為0.1％的磷酸水溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式。在其中一個實施例中，所述梯度洗脫方式為：0-25min，流動相A的體積百分數(shù)由8％變化至30％，流動相B的體積百分數(shù)由92％變化至70％；25-40min，流動相A的體積百分數(shù)由30％變化至45％，流動相B的體積百分數(shù)由70％變化至55％。在其中一個實施例中，所述高效液相色譜儀的檢測波長采用雙波長切換測定法，切換方式為：0-27min，檢測波長為230nm，27-40min，檢測波長切換為290nm。在其中一個實施例中，所述高效液相色譜儀的條件為：色譜柱：以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；柱溫25-35℃，流速為0.8-1.2mL·min-1。在其中一個實施例中，所述柱溫25℃，流速為1mL·min-1。在其中一個實施例中，所述供試品溶液的制備中，精密加入體積濃度為70-90％的甲醇水溶液進行提取，對所得混合液進行振搖或超聲，然后再濾過，所得續(xù)濾液即為供試品溶液。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)具有以下有益效果：(1)本專利技術(shù)針對黃芪健胃制劑存在的質(zhì)量控制技術(shù)問題，提供一種黃芪健胃制劑的特征圖譜的建立方法，該方法根據(jù)黃芪健胃制劑處方組成的特點，合理控制高效液相色譜的流動相條件，構(gòu)建得到黃芪健胃制劑的特征圖譜，方法簡單，且能夠全面反映黃芪健胃制劑的質(zhì)量水平。同時也建立了一種簡單、可靠、實用的黃芪健胃制劑的檢測方法。(2)本專利技術(shù)進一步采用雙波長切換法與特定的流動相的梯度洗脫相結(jié)合，能夠加強對處方中君藥黃芪、臣藥白芍和桂枝、佐藥大棗及使藥甘草5味藥的專屬性成分鑒別，更全面地控制其質(zhì)量，且各特征峰分離效果較好，所建立的特征圖譜有10個特征峰，信息量較大，且各特征峰專屬性強，較好地對處方中的君藥黃芪、臣藥白芍和桂枝、佐藥大棗及使藥甘草5味藥進行了控制；明確了7個指標成分，經(jīng)比較，采用保留時間適中，分離度較好，峰面積較大的芍藥苷參照物峰作為參照峰。(3)本專利技術(shù)還進一步對其余高效液相色譜的測定條件進行了優(yōu)化，能夠使獲得特征圖譜構(gòu)建和檢測方法具有準確性高、精密度以及中間精密度好、穩(wěn)定性高、重復(fù)性好、分析時間較短的優(yōu)點。(4)本專利技術(shù)提供的黃芪健胃膏特征圖譜建立方法中對供試品的前處理方法簡單，特征性成分保留完整，且供試品溶液穩(wěn)定性良好。附圖說明圖1為本專利技術(shù)建立的黃芪健胃制劑的特征圖譜；其中，峰1為沒食子酸，峰3為芍藥內(nèi)酯苷，峰4為芍藥苷，峰5為毛蕊異黃酮葡萄糖苷，峰6為芹糖甘草苷，峰7為甘草苷，峰10為肉桂酸；圖2為實施例1中波長的選擇特征圖譜；圖3為實施例1中流動相考察特征圖譜；圖4為實施例1中柱溫的選擇特征圖譜；圖5為實施例1中流速的選擇特征圖譜；圖6為實施例1中供試品提取溶媒考察特征圖譜；圖7為實施例1中色譜峰指認特征圖譜；圖8為實施例1中中間精密度-不同儀器考察特征圖譜；圖9為實施例1中中間精密度-不同人員考察特征圖譜；圖10為實施例1中中間精密度-不同日期考察特征圖譜；圖11為實施例1中色譜柱的考察特征圖譜；圖12為實施例1中15批黃芪健胃膏特征圖譜；圖13為實施例2中黃芪健胃膏特征圖譜中特征峰歸屬圖譜；圖14為實施例3中黃芪健胃膏(批號為16)特征圖譜。具體實施方式以下結(jié)合具體實施例對本專利技術(shù)的黃芪健胃制劑的特征圖譜建立和檢測方法作進一步詳細的說明。實本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種黃芪健胃制劑的特征圖譜建立方法，其特征在于，包括如下步驟：參照物溶液的制備：分別精密稱定沒食子酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芹糖甘草苷、甘草苷、肉桂酸對照品，混合后加甲醇溶解，即得所述參照物溶液；供試品溶液的制備：精密稱定黃芪健胃制劑，精密加入體積濃度為70?90％的甲醇水溶液進行提取，濾過，取續(xù)濾液，即得所述供試品溶液；特征圖譜建立：分別精密吸取所述供試品溶液和參照物溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得由10個共有特征峰構(gòu)成的所述特征圖譜；其中，所述高效液相色譜儀采用的流動相為：以乙腈為流動相A，以體積濃度為0.1％的磷酸水溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種黃芪健胃制劑的特征圖譜建立方法，其特征在于，包括如下步驟：參照物溶液的制備：分別精密稱定沒食子酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芹糖甘草苷、甘草苷、肉桂酸對照品，混合后加甲醇溶解，即得所述參照物溶液；供試品溶液的制備：精密稱定黃芪健胃制劑，精密加入體積濃度為70-90％的甲醇水溶液進行提取，濾過，取續(xù)濾液，即得所述供試品溶液；特征圖譜建立：分別精密吸取所述供試品溶液和參照物溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得由10個共有特征峰構(gòu)成的所述特征圖譜；其中，所述高效液相色譜儀采用的流動相為：以乙腈為流動相A，以體積濃度為0.1％的磷酸水溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃芪健胃制劑的特征圖譜建立方法，其特征在于，所述梯度洗脫方式為：0-25min，流動相A的體積百分數(shù)由8％變化至30％，流動相B的體積百分數(shù)由92％變化至70％；25-40min，流動相A的體積百分數(shù)由30％變化至45％，流動相B的體積百分數(shù)由70％變化至55％。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃芪健胃制劑的特征圖譜建立方法，其特征在于，所述高效液相色譜儀的檢測波長采用雙波長切換測定法，切換方式為：0-27min，檢測波長為230nm，27min-40min，檢測波長切換為290nm。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃芪健胃制劑的特征圖譜建立方法，其特征在于，所述高效液相色譜儀的條件為：色譜柱：以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；柱溫25-35℃，流速為0.8-1.2mL·min-1。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的黃芪健胃制劑的特征圖譜建立方法，其特征在于，所述柱...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：施之琪，付建武，李雪銀，周勁松，連林生，曾倫，王永輝，
申請(專利權(quán))人：廣州市香雪制藥股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：廣東,44