一種研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗方法技術(shù)

一種研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗方法，具體步驟如下：1.霍甫水絲蚓的馴養(yǎng)；2.沉積物-水體毒性系統(tǒng)的模擬；3.暴露試驗；4.結(jié)果分析。本發(fā)明專利技術(shù)具有以下優(yōu)點：1.本發(fā)明專利技術(shù)提供一種簡單易操作的沉積物-水體毒性系統(tǒng)的模擬方法，采用常見的生物試驗方法，試驗裝置簡單合理，操作簡單，可保證霍甫水絲蚓毒性試驗的順利有效開展，能夠反映沉積物對霍甫水絲蚓的毒性大小，大多數(shù)實驗室條件都可滿足本試驗的要求，可以普及使用。2.本發(fā)明專利技術(shù)的試驗方法可為其他底棲寡毛類生物沉積物-水體毒性測試提供有力的參考和補(bǔ)充，可為我國沉積物環(huán)境基準(zhǔn)的制定以及生態(tài)評估的有效開展提供可靠的技術(shù)支撐。

A test method of sediment - water in l.hoffmesteri toxicity

A test method of sediment - water in l.hoffmesteri toxicity, the specific steps are as follows: 1. of l.hoffmesteri domestication; simulation of 2. sediment - water toxicity system; 3. exposure test results; 4. The invention has the following advantages: 1. the present invention provides a simulation method is simple and easy to operate the sediment - water system by biological toxicity test method, the common test device has the advantages of simple structure, simple operation, can effectively ensure the smooth l.hoffmesteri toxicity test, which can reflect the sediment of Huo Fu toxicity limnodrilushoffmeisteri, most laboratory conditions can meet the requirements of the test, it can be used widely. 2. test methods of the invention can provide a powerful reference and supplement for other benthic oligochaete biological sediment - water toxicity test, provides reliable technical support for our country to carry out effective sediment environmental benchmark planning and ecological assessment.

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
一種研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗方法
：本專利技術(shù)屬于化學(xué)品的生物系統(tǒng)效應(yīng)測試方法的
，具體涉及一種研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗方法。
技術(shù)介紹
：污染物通過直接排放、地表徑流、干濕沉降等過程進(jìn)入水體后，將在水體沉積物中逐步富集，成為污染物的蓄積庫，對生活在其中的生物產(chǎn)生危害，在一定條件下，再次釋放到水體，造成二次污染。因此，水體沉積物對污染物在水生生物中的富集以及在水環(huán)境中遷移轉(zhuǎn)化起到了至關(guān)重要的作用，與整個生態(tài)系統(tǒng)以及人類健康有著密切的聯(lián)系。重金屬和持久性有機(jī)污染物能在水體沉積物中累積到很高的水平，具有重大的安全隱患。沉積物質(zhì)量基準(zhǔn)是底棲生物免受特定化學(xué)物質(zhì)危害的保護(hù)性臨界水平，是化學(xué)物質(zhì)和底棲生物之間劑量-效應(yīng)關(guān)系的反映。沉積物質(zhì)量基準(zhǔn)不僅是對水質(zhì)基準(zhǔn)的完善，同時也是沉積物質(zhì)量評估和對水生態(tài)系統(tǒng)風(fēng)險評價的基礎(chǔ)。計算沉積物質(zhì)量基準(zhǔn)需要大量的基礎(chǔ)性毒性數(shù)據(jù)，尤其是沉積物中底棲生物的毒性試驗數(shù)據(jù)。在沉積物內(nèi)，內(nèi)底棲生物對沉積物結(jié)合物質(zhì)呈現(xiàn)高暴露性。水生寡毛類生物作為內(nèi)底棲生物，在水生系統(tǒng)的沉積物中扮演重要角色。通過生物擾動和被捕食，內(nèi)底棲生物影響著污染物對其他生物的生物可利用性，如底棲魚類。與表層底棲生物相比，內(nèi)底棲寡毛類生物穴居在沉積物中，攝食沉積物顆粒，能夠通過各種可能的途徑暴露于污染物中，如接觸并攝食污染沉積物，通過孔隙水和上覆水吸收沉積物。因此，底棲寡毛類生物是國際上推薦的沉積物毒性試驗的模式生物。而在中國霍甫水絲蚓分布廣泛，容易獲得，容易在實驗室內(nèi)培養(yǎng)，能耐受的沉積物類型比較廣泛，有對污染物敏感的生物終點指示指標(biāo)，適合用于沉積物-水體毒性測試。因此，設(shè)計有效的研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗方法，不僅可為其他底棲寡毛類生物沉積物-水體毒性測試提供有力的參考和補(bǔ)充，也可為我國沉積物環(huán)境基準(zhǔn)的制定以及生態(tài)評估的有效開展提供可靠的技術(shù)支撐。
技術(shù)實現(xiàn)思路
：本專利技術(shù)的目的在于提供一種研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的最優(yōu)試驗方案，有效評價霍甫水絲蚓對沉積物結(jié)合污染物的延長暴露效應(yīng)。本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案是：一種研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗方法，所述方法包括以下步驟：1.霍甫水絲蚓的馴養(yǎng)霍甫水絲蚓必須保證單一種培養(yǎng)，保證培養(yǎng)，尤其是試驗用水絲蚓無可見的疾病和畸形。試驗前需完成受試生物的馴養(yǎng)。在實驗室內(nèi)長期持久培養(yǎng)至少1個月，水溫23℃，水體pH(7.8±0.2)，自然光照(16∶8h)，每月投餌(玉米粉)兩次，每周換水一次，持續(xù)溫和曝氣。于底部鋪有脫脂棉基質(zhì)的玻璃缸內(nèi)馴養(yǎng)，保證最適的馴養(yǎng)環(huán)境，期間存活率不受影響，接近100％。試驗前，挑出于曝氣水中清腸24h。2.水體-沉積物毒性系統(tǒng)模擬集中采集干凈均勻無污染沉積物，過篩，4℃恒溫保存。確定沉積物性質(zhì)，如TOC、pH、水分含量、粒度分布等。少量沉積物風(fēng)干、研磨、過篩。對干燥的沉積物加標(biāo)染毒，與濕沉積物攪拌混合，得到特定濃度的加標(biāo)沉積物。加標(biāo)之前，往沉積物中加入適量食物源。將沉積物與上覆水加入試驗容器中，沉積物高度1.5～3cm，沉積物與上覆水的體積比1∶3.5～1∶4.5范圍內(nèi)，上覆水采用經(jīng)曝氣48h以上的優(yōu)質(zhì)自來水，實驗室內(nèi)穩(wěn)定1～4周。3.暴露試驗試驗容器為容量至少250mL的玻璃容器。用化學(xué)分析方法測定沉積物實際加標(biāo)濃度，每個容器投放至少10只清腸后，健康無損、尾部完整、體長一致的霍甫水絲蚓，試驗設(shè)置空白組、至少5個濃度組，每組至少4個平行。室溫下，自然光照(16∶8h)，低光照強(qiáng)度環(huán)境下進(jìn)行。暴露時間在21～28d范圍內(nèi)，靜態(tài)系統(tǒng)，期間不換水，不喂食。每天用吸管沿容器壁加去離子水，補(bǔ)足揮發(fā)水分。上覆水溫和曝氣(2～4個氣泡/s)，通過固定于沉積物表面上至少2cm的巴斯德移液管以最大程度降低對沉積物的干擾。溶解氧不小于30％空氣飽和值(ASV)。控制空氣供給，工作日內(nèi)每天調(diào)節(jié)。4.結(jié)果分析試驗期間觀察記錄挖掘、筑巢、沉積物回避行為，暴露試驗結(jié)束后，過篩沉積物，回收水絲蚓，記錄存活數(shù)和生物量。采用數(shù)理統(tǒng)計方法，計算半數(shù)致死濃度LC50、x％效應(yīng)濃度ECx和無觀察效應(yīng)濃度NOEC值。本專利技術(shù)具有如下優(yōu)點：1.霍甫水絲蚓作為我國常見的內(nèi)底棲生物，分布廣泛，易獲得，易馴養(yǎng)，對于沉積物中結(jié)合污染物暴露充分，行為形態(tài)對毒性敏感，能夠較好反映沉積物的毒性。2.本專利技術(shù)提出了一種研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗方法，能夠較好地反映沉積物的毒性，獲得有效的沉積物毒性數(shù)據(jù)；開發(fā)了一種研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗系統(tǒng)，溫和曝氣，避免擾動系統(tǒng)中沉積物，為其他寡毛類生物沉積物毒性測試提供有力的參考和補(bǔ)充。該方法簡單易行，基本上大多數(shù)實驗室都可滿足本試驗的要求，適用于多種受試污染物，可以普及使用。3.本專利技術(shù)的毒性試驗方法可為我國沉積物環(huán)境基準(zhǔn)的制定以及生態(tài)評估的有效展開提供合理的技術(shù)支撐。附圖說明：附圖為毒性試驗容器的結(jié)構(gòu)示意圖：其中：1、透明的燒杯；2、沉積物；3、上覆水；4、巴斯德吸管；5、橡皮筋；6、紗網(wǎng)；7、開口，加水口；8、接口，連接曝氣裝置。具體實施方式：以下實施例是對本專利技術(shù)的進(jìn)一步說明，而不是對本專利技術(shù)的限制。實施例1：1.霍甫水絲蚓的馴養(yǎng)根據(jù)實驗要求選擇單一種霍甫水絲蚓蠕蟲，在實驗室鋪有脫脂棉的玻璃缸內(nèi)馴養(yǎng)1個月，室溫，自然光照，每周換水一次，每月投餌(玉米粉)兩次，持續(xù)用曝氣泵帶動曝氣頭溫和曝氣，觀察霍甫水絲蚓存活生長情況，存活率不得低于95％，將近100％最佳。試驗前于曝氣清水中清腸24h。2.暴露試驗試驗容器：容積為250mL的燒杯，沉積物高2cm，沉積物與上覆水體積比為1∶4，上覆水高約為8cm，巴斯德吸管口距離沉積物表面4cm處，曝氣速度2～4個氣泡/s。按照要求容器口用紗網(wǎng)覆蓋，橡皮筋固定，留有斜面開口，便于每天用去離子水補(bǔ)足揮發(fā)水分。弱光照處實施。實驗室內(nèi)模擬沉積物-水體中林丹對霍甫水絲蚓的毒性試驗，以丙酮作為助溶劑給沉積物加標(biāo)，加標(biāo)前加入合適的食物源。試驗設(shè)有空白濃度組、試劑空白組和濃度組，每組4個平行，對照組設(shè)5個平行。上覆水采用經(jīng)曝氣48h的優(yōu)質(zhì)自來水，每個容器投放12只清腸后健康無損，尾部完整，體長一致的霍甫水絲蚓。試驗周期為28d，溫和曝氣，不更換上覆水，每天用吸管沿容器壁加去離子水，補(bǔ)足揮發(fā)水分。每天觀察霍甫水絲蚓行為狀態(tài)變化。3.結(jié)果分析28d暴露試驗結(jié)束后，側(cè)面、正面拍照，記錄霍甫水絲蚓挖掘、筑巢和沉積物回避行為，之后過篩沉積物，回收存活霍甫水絲蚓，分別記錄存活數(shù)量、尾部自斷數(shù)量，以及水絲蚓干重，采用統(tǒng)計方法，計算林丹對霍甫水絲蚓的28dLC50、自斷效應(yīng)濃度EC50、生長抑制效應(yīng)濃度ECx，甚至NOEC值。本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】
一種研究沉積物?水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗方法，所述方法包括以下步驟：1)霍甫水絲蚓的馴養(yǎng)實驗室內(nèi)培養(yǎng)一個月以上，期間存活率接近100％，無可見的疾病和畸形，無異常反應(yīng)。2)沉積物?水體毒性系統(tǒng)的模擬試驗用沉積物潔凈無污染，確定來源與性質(zhì)，混合均勻，保證暴露試驗內(nèi)對照生物的存活和繁殖。沉積物高度1.5～3cm，沉積物與上覆水的體積比為1∶3.5～1∶4.5，穩(wěn)定時間1～4周。3)暴露試驗確定沉積物加標(biāo)濃度，將霍甫水絲蚓投放在試驗系統(tǒng)中。采用靜態(tài)、半靜態(tài)或動態(tài)系統(tǒng)，在沉積物中加入食物或試驗期間定期喂食，暴露時間21～28d。4)結(jié)果分析試驗期間觀察記錄挖掘、筑巢、沉積物回避行為，暴露試驗結(jié)束后，過篩沉積物，同收霍甫水絲蚓，記錄存活數(shù)和生物量。采用數(shù)理統(tǒng)計方法，計算半數(shù)致死濃度LC

【技術(shù)特征摘要】
1.一種研究沉積物-水體中霍甫水絲蚓毒性的試驗方法，所述方法包括以下步驟：1)霍甫水絲蚓的馴養(yǎng)實驗室內(nèi)培養(yǎng)一個月以上，期間存活率接近100％，無可見的疾病和畸形，無異常反應(yīng)。2)沉積物-水體毒性系統(tǒng)的模擬試驗用沉積物潔凈無污染，確定來源與性質(zhì)，混合均勻，保證暴露試驗內(nèi)對照生物的存活和繁殖。沉積物高度1.5～3cm，沉積物與上覆水的體積比為1∶3.5～1∶4.5，穩(wěn)定時間1～4周。3)暴露試驗確定沉積物加標(biāo)濃度，將霍甫水絲蚓投放在試驗系統(tǒng)中。采用靜態(tài)、半靜態(tài)或動態(tài)系統(tǒng)，在沉積物中加入食物或試驗期間定期喂食，暴露時間21～28d。4)結(jié)果分析試驗期間觀察記錄挖掘、筑巢、沉積物回避行為，暴露試驗結(jié)束后，過篩沉積物，同收霍甫水絲蚓，記錄存活數(shù)和生物量。采用數(shù)理統(tǒng)計方法，計算半數(shù)致死濃度LC50、x％效應(yīng)濃度...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：祝凌燕，沈兆爽，張彥峰，陳萌，鐘文玨，
申請(專利權(quán))人：南開大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：天津,12