桔梗多糖的提取方法技術

本發明專利技術屬于多糖提取技術領域，具體涉及桔梗多糖的提取方法。桔梗多糖的提取方法，包括下述的步驟：選擇曬干的桔梗，粉碎后過40?80目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：5?10，在水中浸泡8?16小時，純凈水含有0.1～1組的十二烷基二甲基甜菜堿和5～10%的異丙醇，再加入纖維素酶酶解，再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，在微波條件下酶解，酶解后濃縮并脫色，離心，取上清液濃縮醇沉，再離心，采用乙醇清洗沉淀，冷凍干燥后并粉碎，得桔梗多糖。本發明專利技術采用各種不同的酶將桔梗中的脂肪、纖維素酶解，將其中的多糖提取出來，提高了桔梗的利用率，同時多糖得率高，而且純度也高。

【技術實現步驟摘要】
桔梗多糖的提取方法
本專利技術屬于多糖提取
，具體涉及桔梗多糖的提取方法。
技術介紹
桔梗，別名包袱花、鈴鐺花、僧帽花，是多年生草本植物，莖高30-130厘米，通常無毛，偶密被短毛，不分枝，極少上部分枝。葉全部輪生，部分輪生至全部互生，無柄或有極短的柄，葉片卵形，卵狀橢圓形至披針形，葉子卵形或卵狀披針形，花暗藍色或暗紫白色，可作觀賞花卉;其根可入藥，有止咳祛痰、宣肺、排膿等作用，中醫常用藥。桔梗是我國傳統常用中藥材，功效具有宣肺、祛痰、利咽、排膿等功能，主治咳嗽痰多、咽喉腫痛等癥狀。藥食兩用，需求量較大。桔梗喜光、喜溫和濕潤涼爽氣候。苗期怕強光直曬，須遮蔭，成株喜陽光，怕積水。抗干旱，耐嚴寒，怕風害。適宜在土層深厚、排水良好、土質疏松而含腐殖質的砂質壤土上栽培。多糖是由糖苷鍵結合的糖鏈，至少要超過10個的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式(C6H10O5)n表示。由相同的單糖組成的多糖稱為同多糖，如淀粉、纖維素和糖原;以不同的單糖組成的多糖稱為雜多糖，如阿拉伯膠是由戊糖和半乳糖等組成。多糖不是純粹的化學物質，而是聚合程度不同的物質的混合物。多糖類一般不溶于水，無甜味，不能形成結晶，無還原性和變旋現象。多糖也是糖苷，所以可以水解，在水解過程中，往往產生一系列的中間產物，最終完全水解得到單糖，但現有多糖提取純度受到限制。
技術實現思路
為了解決上述的技術問題，本專利技術提供了得率較高，純度高的桔梗多糖的提取方法。本專利技術桔梗多糖的提取方法是通過下述的技術方案來實現的：桔梗多糖的提取方法，包括下述的步驟：選擇曬干的桔梗，粉碎后過40-80目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：5-10，在水中浸泡8-16小時，純凈水含有0.1～1組的十二烷基二甲基甜菜堿和5～10%的異丙醇，促進蛋白質脫除，從而蛋白含量低，相對的桔梗多糖高純度，再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5-0.9％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.3-0.6%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.3-0.5%，酶解溫度45℃、pH值5.5-6.5，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h，酶解后在100-105℃下滅酶5-10min，得酶解液；將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的3-6%，攪拌0.3-0.5h，過濾濾出活性炭；離心10-30min，離心轉速為4500rpm，將上清液與沉淀分別收集；取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在60-70℃下濃縮，濃縮至其濃度為60-70%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-30小時、離心10-30min，離心轉速為4500rpm，收集沉淀并用乙醇反復清洗3-3次，冷凍干燥至水分含量為4-6%后，再在-1-4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。優選的，桔梗與水的重量比例為1：9；優選的，無花果蛋白酶的用量是0.45%；菠蘿蛋白酶的添加量為0.4%。優選的，桔梗多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟：選擇曬干的桔梗，粉碎后過60目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：7，在水中浸泡10小時，加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.8％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.45%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.4%，酶解溫度45℃、pH值6.0，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100℃下滅酶6min，得酶解液；將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，所述的活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；離心15min，離心轉速為4500rpm，將上清液與沉淀分別收集；取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65℃下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-30小時、離心15min，離心轉速為4500rpm，收集沉淀并用乙醇反復清洗3-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在-1-4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。本專利技術的有益效果在于，采用酶作用條件溫和，采用各種不同的酶將桔梗中的脂肪、纖維素酶解，同時從桔梗中提取多糖，最大限度的利用桔梗，而且采用本專利技術的方法得到的多糖，其得率和純度高。具體實施方式下面結合具體實施例對本專利技術作更進一步的說明，以便本領域的技術人員更了解本專利技術，但并不因此限制本專利技術。以下的檢測方法，如無特殊說明，采用苯酚-硫酸法測多糖的含量。實施例1桔梗多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟：選擇曬干的桔梗，粉碎后過60目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：7，在水中浸泡10小時，純凈水含有0.1～1組的十二烷基二甲基甜菜堿和5～10%的異丙醇，促進蛋白質脫除，從而蛋白含量低，相對的桔梗多糖高純度，再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.8％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.45%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.4%，酶解溫度45℃、pH值6.0，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100℃下滅酶6min，得酶解液；將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；離心15min，離心轉速為4500rpm，將上清液與沉淀分別收集；取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65℃下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-30小時、離心15min，離心轉速為4500rpm，收集沉淀并用乙醇反復清洗3-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在-1-4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。多糖的提取率為：36.44%，純度為94.64%。實施例2桔梗多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟：選擇曬干的桔梗，粉碎后過40目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：5，在水中浸泡8小時，加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400-60本文檔來自技高網...

【技術保護點】
桔梗多糖的提取方法，其特征包括下述的步驟：1)選擇曬干的桔梗，粉碎后過60目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：7，在水中浸泡10小時，水中含有0.1～1組的十二烷基二甲基甜菜堿和5～10%的異丙醇，再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.8％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400?600W，頻率為800MHz，酶解0.1?0.5h；2)再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.45%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.4%，酶解溫度45℃、pH值6.0，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHz，酶解0.3h，酶解后在100℃下滅酶6min，得酶解液；3)將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；4)在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，所述的活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；離心15?min?，離心轉速為4500?rpm，將上清液與沉淀分別收集；5)取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65℃下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置10?30小時、離心15?min?，離心轉速為4500?rpm，收集沉淀并用乙醇反復清洗3?3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在?1?4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；6)上述的加酶量均為酶占粉碎后的桔梗的重量百分比。...

【技術特征摘要】
1.桔梗多糖的提取方法，其特征包括下述的步驟：1)選擇曬干的桔梗，粉碎后過60目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：7，在水中浸泡10小時，水中含有0.1～1組的十二烷基二甲基甜菜堿和5～10%的異丙醇，再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.8％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHz，酶解0.1-0.5h；2)再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.45%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.4%，酶解溫度45℃、pH值6.0，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHz，酶解0.3h，酶解后在100℃下滅酶6min，得酶解液；3)將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；4)在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，所述的活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；離心...

【專利技術屬性】
技術研發人員：袁莉霞，蔣玉明，
申請(專利權)人：新昌縣派特普科技有限公司，
類型：發明
國別省市：浙江,33