一種測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法技術

本發明專利技術公開了一種測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法，包括以下步驟：(1)煙草冷杉醇的超聲提取：取煙草或煙草制品碾成的煙草粉末，置于離心玻璃管中，加入提取溶劑，并加入一定體積的水，超聲提取煙草冷杉醇；(2)煙草冷杉醇提取液的分離：提取液冷卻至室溫，充分振蕩，離心；(3)精確移取上層溶液，在氮氣保護條件下吹干，再用流動相溶解后，過0.22um有機濾膜過濾至液相譜安培瓶中，待測；(4)對所得待測液進行液相色譜測定。采用超聲波技術，降低了煙草冷杉醇的提取時間，且煙草冷杉醇的提取、分離均在離心管中完成，溶劑用量少，操作簡單，節約成本，減少污染，提高工作效率，適用于批量樣品分析，且測定結果準確性及精密度高。

【技術實現步驟摘要】
一種測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法
本專利技術屬于檢測
，具體涉及一種測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法。
技術介紹
冷杉醇，又名十六元醇，因最早在杉屬植物冷杉中提取而出得名，順-冷杉醇常用于煙草行業，以增加煙草香氣。順-冷杉醇經調制、醇化后，90％的冷杉醇發生氧化、降解和轉化，其降解產物主要是C-16的化合物，包括降龍涎香醚、龍涎香內酯等具有強烈的龍涎香香氣的物質，對增加卷煙香氣和吸味非常有效。常用于煙草浸膏中。到目前為止，冷杉醇的測定方法的報導很少，也沒有形成常規的測定方法。Severson等人采用氣相色譜測定了主要的表皮蠟質成分，但易引起冷杉醇分析時的降解得不到好的峰型難以定量。也有采用正相液相色譜方法測定了煙葉中順冷杉醇，但純化步驟較為繁瑣，測定周期長。本專利技術是采用反相液相色譜方法進行測定，尚未發現相關報道。
技術實現思路
針對冷杉醇測定方法的缺少及僅有幾項技術中存在的問題，本專利技術的目的在于提供一種測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法。該方法應用超聲波技術，降低了煙草冷杉醇的提取時間，使煙草冷杉醇的提取、分離均在離心管中完成，適用于批量檢測，且溶劑用量少，操作簡單，節約成本，減少污染，提高工作效率，測定結果準確性及精密度高。為達到上述目的，本專利技術采取的技術方案為：一種測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法，包括以下步驟：(1)煙草冷杉醇的超聲提取：取煙草或煙草制品碾成的煙草粉末，置于離心玻璃管中，加入提取溶劑，并加入一定體積的水，超聲提取煙草冷杉醇；(2)煙草冷杉醇提取液的分離：提取液冷卻至室溫，充分振蕩，離心；(3)精確移取上層溶液，在氮氣保護條件下吹干，再用流動相溶解后，過0.22um有機濾膜過濾至液相譜安培瓶中，待測；(4)對所得待測液進行液相色譜測定。進一步的，所述步驟(1)中煙草或煙草制品為各種類型的調制后煙葉、青煙葉、煙梗以及提取煙堿后的煙草殘渣中的任意一種，烘干粉碎成煙草粉末。進一步的，所述步驟(1)中的提取溶劑為二氯甲烷，二氯甲烷和水的加入量的體積比為1:1。通過實驗二氯甲烷提取量最大，提取效果最好。進一步的，所述步驟(1)中的離心玻璃管上設有聚四氟乙烯密封蓋，冷杉醇在提取過程中，旋緊密封蓋，以防止溶劑揮發影響結果測定的準確性。進一步的，所述步驟(1)中超聲提取的條件是：超聲頻率40KHz，溫度30℃，時間10min。進一步的，所述步驟(2)中超聲提取完成后，離心過程采用3000轉/分離心10min，利用液液分配原理，將煙草中的冷杉醇轉移至上層二氯甲烷相中，提取后樣品殘渣保留在下層水相中。進一步的，步驟(4)中液相色譜測定條件是，使用超高效液相色譜儀，色譜柱：BEHC18(1.7um2.1*50mm)，流動相的體積比為水：乙腈＝30：70，流速：0.3mL/min，柱溫：36℃，檢測波長：273nm。本專利技術的有益效果是：本專利技術采用超聲波技術，降低了煙草冷杉醇的提取時間，且煙草冷杉醇的提取、分離均在離心管中完成，溶劑用量少，操作簡單，節約成本，減少污染，提高工作效率，適用于批量樣品分析，且測定結果準確性及精密度高。附圖說明圖1為本專利技術煙草冷杉醇標準品及樣品的液相色譜圖。具體實施方式下面結合附圖和實施例對本專利技術作進一步的說明。實施例1一種測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法，其步驟包括：(1)煙草冷杉醇的超聲提取：取煙草或煙草制品碾成的煙草粉末，置于離心玻璃管中，加入提取溶劑，并加入一定體積的水，超聲提取煙草冷杉醇；(2)煙草冷杉醇提取液的分離：提取液冷卻至室溫，充分振蕩，離心；(3)精確移取上層溶液1mL，在氮氣保護條件下吹干，再用1ml流動相溶解后，過0.22um有機濾膜過濾至液相譜安培瓶中，待測；(4)對所得待測液進行液相色譜測定。進一步的，所述步驟(1)中煙草或煙草制品為各種類型的調制后煙葉、青煙葉、煙梗以及提取煙堿后的煙草殘渣中的任意一種，烘干粉碎成煙草粉末，稱量0.2g，精確至0.0001g，采用的提取溶劑為二氯甲烷，加入量為5ml，加入水的體積也為5ml。進一步的，所述步驟(1)中的離心玻璃管體積≥20ml，并設有聚四氟乙烯密封蓋，冷杉醇在提取過程中，旋緊密封蓋，以防止溶劑揮發影響結果測定的準確性。進一步的，所述步驟(1)、步驟(2)中，超聲提取的條件是：超聲頻率40KHz，溫度30℃，時間10min；提取完成后，冷卻至室溫，充分振蕩，3000轉/分離心10min，利用液液分配原理，將煙草中的冷杉醇轉移至上層二氯甲烷相中，提取后樣品殘渣保留在下層水相中。進一步的，所述步驟(4)中液相色譜測定條件是，采用超高效液相色譜儀，色譜柱：BEHC181.7um2.1*50mm，流動相的體積比為水：乙腈＝30：70，流速：0.3mL/min，柱溫：36℃，檢測波長：273nm。實施例2稱取過60目篩煙草粉末樣品0.1g，精確至0.0001g，放入20mL帶有聚四氟乙烯密封蓋的離心玻璃管中，準確加入5mL提取溶劑二氯甲烷，旋緊密封蓋，放入恒溫超聲提取儀中，在超聲頻率為45kHz，溫度30℃、時間10min條件下進行目標化合物提取。提取完成后，待提取液冷卻至室溫，在3000轉/分條件下離心10min。精確移取上清液1mL，在氮氣保護條件下吹干，再用1mL流動相溶解后，用0.22um有機濾膜過濾至液相色譜安培瓶中，應用液相色譜進行檢測，如圖1所示。冷杉醇在3.991分鐘時出峰，樣品冷杉醇含量0.062％。本專利技術是采用反相液相色譜方法進行測定，尚未發現同類相關研究報道，與僅有的氣相色譜測定及正相液相色譜方法相比，提取效果好，回收率高，且較穩定，方法的重現性較好，溶劑用量少，提取時間短，操作簡單，可提高工作效率，節約成本，測定結果準確性及精密度高。表1為添加回收率試驗結果表2為精密度試驗結果，具體試驗結果參考表2.1和表2.2表2.1不同煙草樣品的平行試驗結果2.2同一煙草樣品不同測定日期試驗結果時間第一天第二天第三天第四天第五天第六天平均值RSD％測定值％0.0560.0510.0530.0530.0510.0540.0533.58表3不同提取溶劑冷杉醇提取率比較研究結果％(n＝6)以上所述并非是對本專利技術的限制，應當指出：對于本
的普通技術人員來說，并不局限于此，在不脫離本專利技術實質范圍的前提下，還可以做出若干變化、改型、添加或替換，這些改進和潤飾也應視為本專利技術的保護范圍。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)煙草冷杉醇的超聲提取：取煙草或煙草制品碾成的煙草粉末，置于離心玻璃管中，加入提取溶劑，并加入一定體積的水，超聲提取煙草冷杉醇；(2)煙草冷杉醇提取液的分離：提取液冷卻至室溫，充分振蕩，離心；(3)精確移取上層溶液，在氮氣保護條件下吹干，再用流動相溶解后，過0.22um有機濾膜過濾至液相譜安培瓶中，待測；(4)對所得待測液進行液相色譜測定。

【技術特征摘要】
1.一種測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)煙草冷杉醇的超聲提取：取煙草或煙草制品碾成的煙草粉末，置于離心玻璃管中，加入提取溶劑，并加入一定體積的水，超聲提取煙草冷杉醇；(2)煙草冷杉醇提取液的分離：提取液冷卻至室溫，充分振蕩，離心；(3)精確移取上層溶液，在氮氣保護條件下吹干，再用流動相溶解后，過0.22um有機濾膜過濾至液相譜安培瓶中，待測；(4)對所得待測液進行液相色譜測定。2.根據權利要求1所述測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法，其特征在于，所述步驟(1)中煙草或煙草制品為各種類型的調制后煙葉、青煙葉、煙梗以及提取煙堿后的煙草殘渣中的任意一種，烘干粉碎成煙草粉末。3.根據權利要求1所述測定煙草及煙草制品冷杉醇的方法，其特征在于，所述步驟(1)中的提取溶劑為二氯甲烷，二氯甲烷和水的加入量的體積比為1:1。4.根據權利要求1所述測定...

【專利技術屬性】
技術研發人員：王愛華，杜詠梅，張忠鋒，付秋娟，劉新民，侯小東，劉艷華，張懷寶，劉世馨，張曉敬，
申請(專利權)人：中國農業科學院煙草研究所，
類型：發明
國別省市：山東,37