腫瘤標志物CEA快速檢測試紙制造技術

腫瘤標志物CEA快速檢測試紙，本發明專利技術涉及腫瘤標志物CEA快速檢測試紙。本發明專利技術的目的是為了解決現有的臨床上腫瘤標志物CEA長期跟蹤檢測不易患者自行操作，患者經濟壓力大，操作不易且耗時長的問題。本發明專利技術腫瘤標志物CEA快速檢測試紙由樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜、吸水紙和PVC板組成。本發明專利技術腫瘤標志物CEA快速檢測試紙檢測靈敏度高，特異性強，且簡單，高效。本發明專利技術應用于檢測試紙領域。

【技術實現步驟摘要】
腫瘤標志物CEA快速檢測試紙
本專利技術涉及腫瘤標志物CEA快速檢測試紙。
技術介紹
癌癥已經取代心血管疾病成為世界上導致人類死亡的首要原因，絕大多數癌癥在癌癥發生早期是可以被治愈的。因此，早期篩查、早期診斷具有極其重要的意義。CEA是被廣泛應用于多種癌癥檢測的腫瘤標志物之一，也是醫院進行絕大多數腫瘤檢測時必檢標志物之一。正常情況下，CEA經胃腸道代謝，而腫瘤狀態時的CEA則進入血和淋巴循環，引起血清CEA異常增高。CEA值升高，表明有病變殘存或進展。CEA常用于甲狀腺癌、肺癌、胃癌、結直腸癌、食管癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、子宮頸癌等癌癥的療效觀察和預后評估。一般CEA的參考值為小于2.5μg/L，當CEA濃度持續不斷升高，或其數值超過正常5-6倍者，則說明有病變殘存或進展，亦或是預后不良，可認為有轉移性病變。因此，連續隨訪定量檢測血清CEA含量，有助于相關癌癥患者對自身疾病的掌控，對腫瘤病情判斷更具有意義。腫瘤標志物需要長期跟蹤檢測，目前，在臨床腫瘤診斷中腫瘤標志物的檢測一般采用化學發光方法，該方法檢查費用相對昂貴，耗時長，需配備專業的儀器和專業的技術人員，操作性差，給臨床患者的長期跟蹤檢測造成困擾。因此準確、快速、便捷的操作是目前臨床上亟待解決的問題。
技術實現思路
本專利技術的目的是為了解決現有的臨床上腫瘤標志物CEA長期跟蹤檢測不易患者自行操作，患者經濟壓力大，操作不易且耗時長的問題，提供腫瘤標志物CEA快速檢測試紙。本專利技術腫瘤標志物CEA快速檢測試紙由樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜、吸水紙和PVC板組成；玻璃纖維膜上涂覆有標記CEA抗體的膠體金溶液，其中膠體金溶液是由CEA抗體包被到膠體金顆粒上制成，未包被CEA抗體的膠體金顆粒的粒徑為20.15nm-23.89nm，已包被CEA抗體的膠體金顆粒的粒徑為35.42nm-38.54nm；硝酸纖維素膜上設有T1區、T2區和質控區，硝酸纖維素的T1區固定有0.63ng的CEA抗原，T2區固定有0.12ng的CEA抗原，質控區固定有CEA兔抗鼠二抗0.5ng。競爭ELISA法與膠體金技術結合，適合對小分子的CEA抗原進行更為靈敏準確的檢測。本專利技術針對此設計開發了腫瘤標志物CEA競爭性檢測試紙，該試紙具有快速、準確、易自行操作的特點，本專利技術建立的試紙可實現對血液中CEA在5min內進行快速檢測。因此，本研究的成果將填補利用競爭性ELISA方法對腫瘤標志物CEA快速準確檢測試紙上的空白，為臨床醫學提供重要的檢測手段，尤其在配合其他標志物聯合檢測將更有意義。本專利技術的有益效果：用此方法建立的腫瘤標志物CEA快檢測試紙具有以下特點：(1)兩條檢測帶，檢測結果分為沒有風險、有一定風險、非常危險，更加清楚明白；(2)檢測快速，5分鐘可檢測出結果；(3)易操作，患者可自行操作，無需專業儀器和專業技術人員；(4)需血量少，只需一滴血清，減少患者抽血的痛楚；(5)成本低廉，平均成本低于臨床上檢測費用；(6)可實現患者長期跟蹤檢測的需要，并且本專利技術通過平衡靈敏度及特異性的關系，選擇最適膠體金顆粒粒徑為20-24nm，制備的腫瘤標志物CEA快速檢測試紙檢測靈敏度高，特異性強；(7)首次專利技術了一個利用競爭ELISA技術檢測CEA的試紙，且簡單，高效。附圖說明圖1為本專利技術腫瘤標志物CEA快速檢測試紙的結構示意圖，其中a為樣品墊、b為玻璃纖維膜、c為T1檢測帶、d為T2檢測帶、e為質控帶、f為吸水紙、g為PVC板、h為硝酸纖維素膜、i為血清樣本,箭頭方向為樣品流動方向。具體實施方式具體實施方式一：本實施方式腫瘤標志物CEA快速檢測試紙由樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜、吸水紙和PVC板組成；玻璃纖維膜上涂覆有標記CEA抗體的膠體金溶液，其中膠體金溶液是由CEA抗體包被到膠體金顆粒上制成，未包被CEA抗體的膠體金顆粒的粒徑為20.15nm-23.89nm，已包被CEA抗體的膠體金顆粒的粒徑為35.42nm-38.54nm；硝酸纖維素膜上設有T1區、T2區和質控區，硝酸纖維素的T1區固定有0.63ng的CEA抗原，T2區固定有0.12ng的CEA抗原，質控區固定有CEA兔抗鼠二抗。本實施方式金標CEA抗體A、檢測帶T1及檢測帶T2中抗體/抗原量均不同用來檢測2.5ng/mL和15ng/mL的閾值。本實施方式的CEA抗原購自中檢所，貨號為1821-0102。本實施方式測試原理：當樣品墊端滴入一滴血清樣品后，由于虹吸作用，血清樣品將沿著該膜向前移動，樣品中相應抗原與玻璃纖維膜中固定的一定量金標CEA抗體A結合，當剩余金標CEA抗體A移動至固定有CEA的檢測帶T1區域時，即與CEA發生特異性結合，該區域內的免疫金就會顯示出紅色條帶，提示血液中的CEA蛋白含量小于15ng/mL，如果不顯色，提示血液中的CEA蛋白含量大于15ng/mL。反應后，各種蛋白會隨著血清溶液沿著NC膜繼續向前移動，到固定有CEA的檢測帶T2區域時，當血清中的CEA蛋白含量大于2.5ng/mL時不顯色，當血液中的CEA蛋白含量小于2.5ng/mL時，該區域內的免疫金就會顯示出紅色，由于毛細管作用，血液會繼續沿著該膜向前移動，到固定有CEA二抗的質控帶C帶時，該區域會顯色紅色，提示試紙條工作正常，未失效，且全部顯色反應時間在5min之內。本實施方式選擇粒徑為20.15nm-23.89nm的膠體金顆粒，膠體金顆粒越大，檢測靈敏度越高，但特異性越差，假陽性嚴重；反之，膠體金顆粒越小，檢測靈敏度越低，但特異性越強，假陽性較弱。因此，需根據結合蛋白大小及類型，選擇最適膠體金粒徑。本申請的膠體金標記的是CEA單抗，平衡靈敏度及特異性的關系，選擇最適粒徑為20-24nm。結果判定：當一滴血清中的CEA濃度小于2.5ng/mL時，試紙條三條帶均顯色，檢測帶T1、檢測帶T2、質控帶；當一滴血清中的CEA濃度2.5ng/mL<CEA<15ng/mL時，試紙條有兩條帶顯色，檢測帶T1和質控帶；當一滴血清中的CEA濃度大于15ng/mL時，試紙條有一條帶顯色，質控帶；當試紙條無條帶顯色，提示試紙條失效。競爭ELISA法與膠體金技術結合，適合對小分子的CEA抗原進行更為靈敏準確的檢測。本實施方式針對此設計開發了腫瘤標志物CEA競爭性檢測試紙，該試紙具有快速、準確、易自行操作的特點，本實施方式建立的試紙可實現對血液中CEA在5min內進行快速檢測。因此，本研究的成果將填補利用競爭性ELISA方法對腫瘤標志物CEA快速準確檢測試紙上的空白，為臨床醫學提供重要的檢測手段，尤其在配合其他標志物聯合檢測將更有意義。本實施方式的有益效果：用此方法建立的腫瘤標志物CEA快檢測試紙具有以下特點：(1)兩條檢測帶，檢測結果分為無患病風險、存在一定風險、非常危險，且可根據顏色強弱更進一步分析，更加清楚明白；(2)檢測快速，5分鐘可檢測出結果；(3)易操作，患者可自行操作，無需專業儀器和專業技術人員；(4)需血量少，只需一滴血清，減少患者抽血的痛楚；(5)成本低廉，平均成本低于臨床上檢測費用；(6)可實現患者長期跟蹤檢測的需要，并且本專利技術通過平衡靈敏度及特異性的關系，選擇最適膠體金顆粒粒徑為20-24nm，制備的腫瘤標志物CEA快速檢測試紙檢測靈敏度本文檔來自技高網...

【技術保護點】
腫瘤標志物CEA快速檢測試紙，其特征在于腫瘤標志物CEA快速檢測試紙由樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜、吸水紙和PVC板組成；玻璃纖維膜上涂覆有標記CEA抗體的膠體金溶液，其中膠體金溶液是由CEA抗體包被到膠體金顆粒上制成，未包被CEA抗體的膠體金顆粒的粒徑為20.15nm?23.89nm，已包被CEA抗體的膠體金顆粒的粒徑為35.42nm?38.54nm；硝酸纖維素膜上設有T1區、T2區和質控區，硝酸纖維素的T1區固定有0.63ng的CEA抗原，T2區固定有0.12ng的CEA抗原，質控區固定有CEA兔抗鼠二抗。

【技術特征摘要】
1.腫瘤標志物CEA快速檢測試紙，其特征在于腫瘤標志物CEA快速檢測試紙由樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜、吸水紙和PVC板組成；玻璃纖維膜上涂覆有標記CEA抗體的膠體金溶液，其中膠體金溶液是由CEA抗體包被到膠體金顆粒上制成，未包被CEA抗體的膠體金顆粒的粒徑為20.15nm-23.89nm，已包被CEA抗體的膠體金顆粒的粒徑為35.42nm-38.54nm；硝酸纖維素膜上設有T1區、T2區和質控區，硝酸纖維素的T1區固定有0.63ng的CEA抗原，T2區固定有0.12ng的C...

【專利技術屬性】
技術研發人員：黃國慶，曹滌非，薛家瑩，王雷，孫堯，吳瓊，李瑤，宮禹，趙金海，
申請(專利權)人：黑龍江省科學院高技術研究院，
類型：發明
國別省市：黑龍江,23