提升粒線體活性的植物萃取物制造技術

本發明專利技術是關于一種提升粒線體活性的植物萃取物，其中所述植物萃取物包含植物多酚。本發明專利技術所述植物萃取物能有效提升粒線體制造ATP的能力。

【技術實現步驟摘要】
提升粒線體活性的植物萃取物
本專利技術是關于一種提升粒線體活性的植物萃取物，特別是一種含有植物多酚的植物萃取物。
技術介紹
粒線體(線粒體，mitochondrion)，是一種存在于大多數真核細胞中且由兩層膜包被的胞器，直徑在0.5到10微米左右。大多數真核細胞或多或少都擁有粒線體，但它們各自擁有的粒線體在大小、數量及外觀等方面上都有所不同。這種胞器擁有自身的遺傳物質和遺傳體系，但因其基因組大小有限，所以粒線體是一種半自主胞器。粒線體是細胞內進行氧化、磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要場所，為細胞的活動提供了化學能量，所以有「細胞的發電站」(thepowerhouseofthecell)之稱。除了供能外，粒線體還參與諸如細胞分化、細胞信息傳遞和細胞凋亡等過程，并擁有調控細胞生長和細胞周期的能力。正常細胞含數個至千余個粒線體，而研究證實，老人細胞內的粒線體含量有明顯減少。此外，粒線體在轉換能量的過程中需動用電子傳遞。因此如果沒有正確捕捉到電子，逸出的電子會與氧分子結合成超氧自由基，很容易破壞堿基而造成粒線體DNA突變，進而累積一些疾病。由于粒線體為細胞的能量工廠，且與許多疾病有密切的關系，因此如何保護粒線體不受到破壞，并使其維持正常功能，在目前臨床醫學上視為非常重要的研發方向。
技術實現思路
有鑒于此，本專利技術提供一種植物萃取物用于制備提升粒線體活性的用途，其中所述植物萃取物為植物多酚。在本專利技術的一實施例中，其中所述提升粒線體活性是指能有效提升粒線體的基礎能量、提升粒線體制造ATP的能力、提升粒線體的極限能量、提升粒線體的預存能量及提升單位粒線體能量。在本專利技術的實施例中，其中所述提升粒線體活性是指減少粒線體自由基的泄漏。在本專利技術的實施例中，其中所述植物多酚為綠茶多酚。在本專利技術的實施例中，其中所述綠茶多酚的濃度為25～125μg/ml。在本專利技術的較佳實施例中，其中所述綠茶多酚的濃度為50μg/ml。本專利技術另提供一種植物萃取物用于制備保護粒線體活性的用途，其中所述植物萃取物為植物多酚。在本專利技術的實施例中，其中所述植物多酚為綠茶多酚。在本專利技術的實施例中，其中所述綠茶多酚的濃度為25～125μg/ml。本專利技術進一步提供一種植物萃取物用于制備增加干細胞增生的用途，其中所述植物萃取物為植物多酚。在本專利技術的較佳實施例中，其中所述植物多酚包含蘋果多酚、綠茶多酚或紅酒多酚。附圖說明圖1顯示不同濃度的綠茶多酚對粒線體的基礎能量影響。圖2顯示不同濃度的綠茶多酚對粒線體的自由基泄漏影響。圖3顯示不同濃度的綠茶多酚對粒線體制造ATP能力的影響。圖4顯示不同濃度的綠茶多酚對粒線體的極限能量影響。圖5顯示不同濃度的綠茶多酚對粒線體的預存能量影響。圖6顯示不同濃度的綠茶多酚對粒線體的單位粒線體產生的能量影響。圖7A為不同濃度的紅酒多酚對脂肪間葉干細胞增生的影響結果圖；圖7B為不同濃度的綠茶多酚對脂肪間葉干細胞增生的影響結果圖；圖7C為不同濃度的蘋果多酚對脂肪間葉干細胞增生的影響結果圖；具體實施方式本專利技術中所述植物多酚是指綠茶多酚、蘋果多酚或紅茶多酚等。本專利技術中所述“紅酒多酚”是指紅酒中的多酚化合物，包含多種化學物質，如酚酸類、黃酮醇(dihydroflavonols)、白藜蘆醇、花青素、單寧等。本專利技術中所述“綠茶多酚”是指存在茶葉中的多酚化合物，包括但不限于：表兒茶素(epicatechin，EC)、表沒食子兒茶素(epigallocatechin，EGC)、表兒茶素沒食子酸酯(epicatechingallate，ECG)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechingallate，EGCg)等。本專利技術中所述“蘋果多酚”是蘋果中所含多元酚類物質的通稱，包含有綠原酸、兒茶素、表兒茶素、蘋果縮合丹寧、根皮甙、根皮素、花青素等，其中蘋果縮合丹寧約占多元酚總含量的一半。本專利技術的植物萃取物可通過口服、鼻吸入、經皮等方式給予個體使用。此外，本專利技術植物萃取物的劑量可依不同個體所需，做適當的調整。實施例1.細胞制備利用兩段式的細胞培養法，制造出平整的單層細胞。(1).將培養皿中每個孔(well)所需的細胞懸浮于100μl培養基之中，一般而言每個well所需要使用的細胞約略介于兩萬至六萬個細胞之間。(2).將制備好的細胞懸浮液加入well之中，加入培養基時建議將微量吸管(pipetor)的頂端抵于底部小孔的孔壁上，緩慢將培養基加入孔中以達到最佳的效果，注意的是于「背景校正Well」中只可以加入培養基，不需要加入任何的細胞。(3).將細胞培養盤置于二氧化碳培養箱中培養，直到細胞已經貼附于培養盤的底部。一般而言較容易貼附的細胞大約需要一到兩個小時，一些較不容易貼附的細胞可能需要六個小時左右。(4).待細胞貼附之后，再于每個孔中加入適量的培養基，一般而言以隔夜培養來說建議加入約150μl左右的培養基即可，注意加入培養基的時候請貼于容器璧緩緩的加入以避免擾動已經貼附于底部的細胞。(5).將加入培養基之后的細胞培養盤置于二氧化碳培養箱隔夜培養。2.細胞培養基實驗的過程之中，會需要準備兩種不同類型的培養基，第一種是讓細胞生長的培養基，第二種則是分析時使用的培養基。生長用培養基與一般用于細胞培養的培養基相同，而分析時使用的培養基則會除去一般培養基之中具有pH緩沖能力的分子，以期可以觀察到pH值的變化。除了pH緩沖之外，亦需要注意培養基之中所含有的養分分子是否切合實驗的需求。因此原則上需要除去包含有4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES，4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonicacid)、碳酸氫鈉(Sodiumbicarbonate)、以及各類的血清、BSA等分子，加入所需的養分之后，將pH值確實的調整至pH7.4。另外需注意的是實驗中所添加的各類養分本身也具有緩沖pH值的能力，如果需要計算其精確的氫離子產量(PPR,protonproductionrate)，則需要計算其緩沖力。3.實驗流程于96孔盤的培養皿中，每孔加入8000顆脂肪間葉干細胞及培養基進行培養。培養24小時后，將培養基置換成含有本專利技術的植物萃取物的培養基，再培養24小時，接著，將培養基置換成200mM的H2O2處理30分鐘，用以破壞粒線體的形狀構造等，最后使用海馬生物能量測定儀偵測粒線體的基礎能量、自由基泄漏情況、制造ATP的能力、極限能量、預存能量及單位粒線體產生的能量，其中未加入本專利技術植物萃取物且未經H2O2處理的細胞作為控制組，而經H2O2處理但沒有加入本專利技術植物萃取物的細胞為對照組。4.植物萃取物對于提升粒線體的基礎能量的測試參考圖1，由實驗結果得知，相對于控制組，經H2O2處理的細胞(即對照組)，其粒線體基礎能量明顯下降，而在實驗組中，加入不同濃度(包括1.25μg/ml、25μg/ml和50μg/ml)的綠茶多酚，均能效提升細胞內粒線體的基礎能量，且加入50μg/ml綠茶多酚的實驗組，與對照組相比，更提升了1.54倍粒腺體的基礎能量。5.植物萃取物對于細胞內自由基泄漏的測試參考圖2，由實驗結果得知，相對于控制組，經H2O2處理的細胞(即對照組)，其粒線體自由基泄漏的情形明顯增加，而在實驗組中，加入本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種植物萃取物用于制備提升粒線體活性的用途，其特征是，所述植物萃取物為植物多酚。

【技術特征摘要】
1.一種植物萃取物用于制備提升粒線體活性的用途，其特征是，所述植物萃取物為植物多酚。2.如權利要求1所述的用途，其特征是，所述提升粒線體活性是指能有效提升粒線體的基礎能量、提升粒線體制造ATP的能力、提升粒線體的極限能量、提升粒線體的預存能量或提升單位粒線體能量。3.如權利要求1所述的用途，其特征是，所述提升粒線體活性是指減少粒線體自由基的泄漏。4.如權利要求1所述的用途，其特征是，所述植物多酚為綠茶...

【專利技術屬性】
技術研發人員：涂啟堂，劉思廷，
申請(專利權)人：臺灣粒線體應用技術股份有限公司，
類型：發明
國別省市：中國臺灣,71