木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑及其制備方法和應用技術

本發明專利技術公開了一種木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑及其制備方法和應用，所述可濕性粉劑包括木霉菌孢子菌絲勻漿、蕓苔素內酯、食品級羥基淀粉醚混合得到的粉末，其中，所述粉末中木霉菌孢子菌絲勻漿與食品級羥基淀粉醚的質量比為2:1；所述可濕性粉劑還包括糊精、木質素磺酸鈉、分散劑NNO、甲基纖維素、羧甲基纖維素、殼聚糖。本發明專利技術的可濕性粉劑具有配制方便，包衣容易，高效低毒，對環境相對安全，對番茄灰霉病具有良好的防效。

Trichoderma and brassinolide wettable powder and preparation method and application thereof

The invention discloses a trichoderma and brassinolide wettable powder and preparation method and application thereof, wherein the wettable powder including Trichoderma spore mycelial homogenate, brassinolide, food grade hydroxyl starch ether obtained by mixing powder, wherein, the quality of the powder of Trichoderma spore and mycelial homogenate food grade hydroxyl starch ether is 2:1; the WP also includes dextrin, sodium lignosulfonate, dispersant NNO, methyl cellulose, carboxymethyl cellulose, chitosan. The wettable powder of the invention has the advantages of convenient preparation, easy coating, high efficiency, low toxicity, relatively safe environment and good control effect on Tomato Gray mold.

【技術實現步驟摘要】
木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑及其制備方法和應用
本專利技術涉及一種木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑及其制備方法和應用，特別是涉及一種生防型木霉菌可濕性粉劑制備方法及其在番茄灰霉病防治中的應用。
技術介紹
木霉菌(Trichoderma)作為生物防治中極為重要的生防真菌，由于具有多種拮抗機制，對鐮刀菌、灰霉病菌、立枯絲核菌等多種病原真菌均有很好的抑制效果，不僅如此，木霉菌可以系統誘導植物的防御反應，從而提高植物的抗病能力。然而，木霉菌在應用中存在兩個問題需要解決：木霉菌有時會產生一些抑制性物質抑制種子萌發，因此利用植物源激素的促生功能可解決這一難題。另一方面，在木霉菌生物制劑中，多是利用其活孢子對植物進行生物防控。木霉菌孢子制劑中大部分應用的是分生孢子。但分生孢子受環境條件影響較大，壽命較短，生活力弱，不易長期保存。厚垣孢子雖然細胞壁厚，對環境要求不高，壽命較長，但產生條件相對嚴格，不易獲得。除此之外，孢子制劑在貨架期方面仍然存在諸多不足。如何提高木霉菌孢子制劑的貨架期也是近年來研究的主要問題。天然蕓苔素內酯，也稱油菜素內酯(Brassinolide,簡寫為BRs)，是一類甾醇類植物激素，是目前國際上公認的活性最佳、最廣譜的一類植物生長激素。我國中科院上海植物生理研究所利用蕓苔素內酯對小麥、玉米、西瓜、黃瓜、烤煙、葡萄、水稻等作物進行增產試驗。結果表明，濃度為0.01～0.1ppm的蕓苔素內酯類激素，可使小麥增產10％，玉米增產9.8％～18.4％，西瓜增產20％。蕓苔素內酯不但對多種農作物有促生和增產的作用，在植物抗病抗逆性方面也同樣起到不可或缺的作用。農作物經常遭受惡劣干旱氣候的威脅，這種高溫干旱天氣會使植物細胞膜結構受到損害、削弱光合作用能力、使其生長受到抑制。BRs可通過改善植物的滲透調節、提高植物體內多種保護酶如過氧化物酶(POD)、超氧化物氣化酶(SOD)等酶的活性來增強植物的抗逆能力。但蕓苔素內酯單獨使用幾乎無抑制病菌的功能，因此通過與生防木霉菌混配可能提高其防病效果，彌補這一不足。目前，利用木霉菌進行生物防治的效果已經獲得國內外肯定，木霉菌與其他化學農藥復配也已經有很廣泛的研究。但這些復配制劑在應用時仍存在諸多問題：一、木霉菌復配制劑的防效仍不及化學殺菌劑的防治效果，多種化學殺菌劑對木霉菌本身的生長具有抑制作用，間接影響木霉菌的生防效果。田間應用時，木霉菌的穩定性較差，活性物質易受環境影響。二、木霉菌與化學農藥的復配仍對環境有一定污染，并沒有達到生物防治無污染的目的。三、國內市場上所生產的木霉菌可濕性粉劑在溶于水后仍殘留部分沉淀，懸浮率較低。
技術實現思路
針對生防木霉菌和蕓苔素內酯各自不足和互補優勢，本專利技術提供了一種木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑及其制備方法和應用，有效用于番茄灰霉病的防治。本專利技術是從大量的木霉菌資源中篩選獲得的拮抗木霉菌株，對番茄灰霉病具有很好的抑制作用。同時，將天然蕓苔素內酯與木霉菌聯用，發揮各自優勢作用的同時，對番茄灰霉病的防治具有協同增效作用。本專利技術的目的是通過以下技術方案實現的：第一方面，本專利技術提供了一種木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑，包括木霉菌孢子菌絲勻漿、蕓苔素內酯、食品級羥基淀粉醚混合得到的粉末，其中，所述粉末中木霉菌孢子菌絲勻漿與食品級羥基淀粉醚的質量比為2:1；所述可濕性粉劑還包括糊精、木質素磺酸鈉、分散劑NNO、甲基纖維素、羧甲基纖維素、殼聚糖，上述各組分的質量分別為所述木霉菌孢子菌絲勻漿、蕓苔素內酯、食品級羥基淀粉醚混合得到的粉末質量的8.0-10.0％、4.0-6.0％、4.0-6.0％、9.5-11.0％、4.0-6.0％、3％。優選地，所述蕓苔素內酯的加入量為：每500g木霉菌孢子菌絲勻漿中加入800mL0.1％蕓苔素內酯稀釋10倍液。優選地，所述可濕性粉劑中，木霉菌的濃度為7.5-8.0×108個/g。優選地，所述木霉菌為深綠木霉菌CGMCCNo.6479(該菌株見中國專利技術專利文獻CN103484377A中的記載)。優選地，所述木霉菌孢子菌絲勻漿的制備方法如下：以0.5％的接種量將一級菌種接種于優化后的木霉菌液體發酵培養基中，發酵培養7天后，30Hz高速離心機離心5min，即得木霉菌孢子菌絲勻漿。優選地，所述一級菌種是通過將木霉菌菌餅以3-5片/三角瓶的接種量于PD培養基中、180r/min、28℃條件下培養4d獲得。優選地，所述優化后的木霉菌液體發酵培養基組成包括：玉米粉5.0g，葡萄糖2.0g，大豆蛋白胨2.0g，K2HPO41.0g，FeSO40.01g，MgSO40.5g，KCl0.5g；培養基的裝液量為100mL/250mL。優選地，所述發酵培養的條件為：溫度28.33℃，PH＝6.28，轉速183.72r/min。第二方面，本專利技術提供了一種木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑的制備方法，所述方法包括以下步驟：將木霉菌孢子菌絲勻漿、蕓苔素內酯、食品級羥基淀粉醚混合得到的粉末與糊精、木質素磺酸鈉、分散劑NNO、甲基纖維素、羧甲基纖維素、殼聚糖按比例混合均勻后，進行干燥，即得所述可濕性粉劑。第三方面，本專利技術提供了一種木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑作為生防制劑在防治番茄灰霉病中的應用。第四方面，本專利技術提供了一種木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑在防治番茄灰霉病中的使用方法，所述使用方法具體為：將所述可濕性粉劑溶解在水中形成混合溶液，葉面噴施即可；所述混合溶液中可濕性粉劑的濃度為2g/L。本專利技術經過木霉菌初篩，復篩純化后保存于凍存管中。在上述優化培養基中進行液體發酵使其產生木霉菌孢子發酵液，將含有大量孢子的發酵液裝入30Hz高速離心機中離心5min，與蕓苔素內酯、蕓苔素內酯、食品級羥基淀粉醚、糊精、木質素磺酸鈉、分散劑NNO、甲基纖維素、羧甲基纖維素、殼聚糖；按照最佳配比混合制成木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑，將所述可濕性粉劑(10g/5L)溶解在水中，在溫室與田間葉面噴施。與對照相比，防治番茄灰霉病效果顯著，平均達70％以上。本專利技術的可濕性粉劑具有配制方便，包衣容易，高效低毒，對環境相對安全，對番茄灰霉病具有良好的防效。與現有技術相比，本專利技術具有如下的有益效果：1、該木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑中不僅含有大量木霉菌孢子和菌絲體，同時還有蕓苔素內酯天然植物激素。研究表明，木霉菌孢子發酵液有抑制多種病原菌的功能。而本專利技術采用的深綠木霉菌CGMCCNo.6479，經過反復試驗得出，其對番茄灰霉病的防治具有明顯的效果。蕓苔素內酯，作為一種新型植物生長調節劑，可在植物的各個階段起到調控作用。不但可以促進細胞的伸長和分裂，促進光合作用，提高作物抗高溫、抗干旱等抗逆性；幼苗期促進根的伸長、營養期促進莖葉的生長、生殖期促進果實成熟。蕓苔素內酯能夠有利于植物過氧化氫CAT、超氧化物酶SOD、過氧化物酶POD活性的提高，增強細胞自我保護功能。2、該木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑是由專門針對番茄灰霉病具有很好防治效果的深綠木霉菌及天然植物生長調節劑蕓苔素內酯優化組配而成，功能上優勢互補；二者不僅在防治灰霉病的機制上具有協同增效作用，同時對植物的生長指標有顯著的促進作用，對種子的萌發及發芽勢具有顯著促進作用。3、該木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑的載體選用的是可溶于水且對木霉菌及蕓苔本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑，其特征在于，包括木霉菌孢子菌絲勻漿、蕓苔素內酯、食品級羥基淀粉醚混合得到的粉末，其中，所述粉末中木霉菌孢子菌絲勻漿與食品級羥基淀粉醚的質量比為2:1；所述可濕性粉劑還包括糊精、木質素磺酸鈉、分散劑NNO、甲基纖維素、羧甲基纖維素、殼聚糖，上述各組分的質量分別為所述木霉菌孢子菌絲勻漿、蕓苔素內酯、食品級羥基淀粉醚混合得到的粉末質量的8.0?10.0％、4.0?6.0％、4.0?6.0％、9.5?11.0％、4.0?6.0％、3％。

【技術特征摘要】
1.一種木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑，其特征在于，包括木霉菌孢子菌絲勻漿、蕓苔素內酯、食品級羥基淀粉醚混合得到的粉末，其中，所述粉末中木霉菌孢子菌絲勻漿與食品級羥基淀粉醚的質量比為2:1；所述可濕性粉劑還包括糊精、木質素磺酸鈉、分散劑NNO、甲基纖維素、羧甲基纖維素、殼聚糖，上述各組分的質量分別為所述木霉菌孢子菌絲勻漿、蕓苔素內酯、食品級羥基淀粉醚混合得到的粉末質量的8.0-10.0％、4.0-6.0％、4.0-6.0％、9.5-11.0％、4.0-6.0％、3％。2.根據權利要求1所述的木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑，其特征在于，所述蕓苔素內酯的加入量為：每500g木霉菌孢子菌絲勻漿中加入800mL質量分數為0.01％蕓苔素內酯。3.根據權利要求1所述的木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑，其特征在于，所述木霉菌為深綠木霉菌CGMCCNo.6479。4.根據權利要求1所述的木霉菌·蕓苔素內酯可濕性粉劑，其特征在于，所述木霉菌孢子菌絲勻漿的制備方法如下：先將木霉菌菌餅以3-5片/三角瓶的接種量于PD培養基中、180r/min、28℃條件下培養4-5d獲得一級菌種；再以0.5％的接種量將一級菌種接種于優化后的木霉菌液體發酵培養基中，發酵培養7天后，30Hz高速離心機離心5m...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張婧迪，陳捷，林潤澤，劉志誠，王猛，孫佳楠，賀安樂，
申請(專利權)人：上海交通大學，
類型：發明
國別省市：上海,31