一種成熟水稻種子次生休眠特性的快速檢測方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及成熟水稻種子次生休眠特性的快速檢測方法，包括：（1）誘導(dǎo)次生休眠：取100粒成熟水稻種子放入墊有雙層濾紙的培養(yǎng)皿中，注入10ml去離子水浸泡，同時(shí)做4～8組平行樣；將培養(yǎng)皿裝入箱子進(jìn)行黑暗保存誘導(dǎo)次生休眠；（2）檢測休眠率：步驟（1）完成后在500～600nm綠色安全光照下將種子清洗后轉(zhuǎn)移到裝有10ml去離子水的培養(yǎng)皿中，繼續(xù)黑暗保存，非休眠種子將發(fā)芽；在500～600nm綠色安全光照下剔除發(fā)芽的種子；將所有剩下的種子清洗后再換入裝有8ml3%的雙氧水的培養(yǎng)皿中處理，如果能夠發(fā)芽，則屬于次生休眠種子。使用該方法完成一次次生休眠檢測需22天，獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好，為進(jìn)一步揭示水稻次生休眠的發(fā)生機(jī)制提供了重要的技術(shù)支持。

Rapid detection method for secondary dormancy characteristics of mature rice seeds

The present invention relates to a method for rapid detection of mature rice seed dormancy characteristics, including: (1) secondary induction of secondary dormancy: take 100 grains of Rice Mature Seeds in the pad dish with double filter paper in 10ml injection immersion in deionized water, and 4 to 8 groups of parallel samples; will dish into boxes of dark induced secondary preservation dormancy; (2) the detection rate of dormancy: step (1) after the completion of 500 ~ 600nm in the green light to Ann cleaned seeds transferred to Petri dishes containing 10ml of deionized water in the dark to save, non dormant seeds will germinate; in 500 ~ 600nm green light under an elimination of the seed germination process; dish all the remaining seeds after washing with 8ml3% in hydrogen peroxide, if can germinate, belong to dormant seeds. Using this method to complete a secondary dormancy test takes 22 days, and the obtained experimental results are accurate and reproducible. It provides important technical support for further revealing the mechanism of secondary dormancy in rice.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種成熟水稻種子次生休眠特性的快速檢測方法
本專利技術(shù)涉及植物生理生態(tài)
，尤其涉及一種成熟水稻種子次生休眠特性的快速檢測方法。
技術(shù)介紹
在水稻產(chǎn)區(qū)，由于收獲期間種子落粒以及地下種子庫持續(xù)存在，地下種子一旦條件適宜便萌發(fā)形成自生苗。水稻自生苗不僅與栽培稻競爭生長資源，又是作物病原菌及害蟲的中間寄主，同時(shí)還會(huì)污染制種田種子純度，對(duì)水稻產(chǎn)量和品質(zhì)造成嚴(yán)重影響。而種子的次生休眠性(所謂次生休眠，是指原來不休眠或解除休眠后的種子由于高濕、低氧、干旱、低溫等不適宜環(huán)境條件的影響而誘發(fā)的休眠)可能是導(dǎo)致這些落粒種子成為自生苗的重要原因。目前，國內(nèi)外關(guān)于種子次生休眠的研究主要集中在油菜、大麥等作物上，對(duì)于水稻種子次生休眠的研究十分薄弱，相關(guān)的檢測方法更是未見報(bào)道。水稻是世界上最重要的糧食作物之一，在我國糧食生產(chǎn)中占有舉足輕重的地位。提高水稻產(chǎn)量，對(duì)于確保谷物基本自給、保障國家糧食安全，具有極其重要的戰(zhàn)略意義。通過考察我國主栽水稻品種的次生休眠特性，發(fā)掘出休眠性弱的品種，可以有利于防止自生苗；選擇休眠性強(qiáng)的品種，則有利于防止收獲前穗發(fā)芽。探明水稻次生休眠發(fā)生的原因與規(guī)律，可以找到改變水稻休眠特性的方法，有效的預(yù)防自生苗危害，為我國水稻育種和生產(chǎn)管理提供科學(xué)依據(jù)。而開展上述研究工作的必要前提正是水稻種子次生休眠特性的檢測與篩選。植物種子的休眠是一個(gè)復(fù)雜的問題，不同植物具有不同的休眠特性，檢測方法也不盡相同。申請(qǐng)人一直從事種子次生休眠的研究，已專利技術(shù)了成熟油菜種子次生休眠特性的PEG化學(xué)檢測方法(趙祥祥等.成熟油菜種子次生休眠特性的化學(xué)檢測方法.2013.3,中國,ZL201210108031.X)，但此方法并不完全適用于水稻種子的次生休眠檢測。因此，研究一種適用于檢測水稻種子次生休眠的方法顯得尤為重要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)要解決的技術(shù)問題是設(shè)計(jì)一種適用于檢測水稻種子次生休眠的方法，解決現(xiàn)有的技術(shù)問題。為解決上述技術(shù)問題，本專利技術(shù)的成熟水稻種子次生休眠特性的快速檢測方法包括如下步驟：(1)誘導(dǎo)次生休眠：取100粒成熟水稻種子放入墊有雙層濾紙的培養(yǎng)皿中，注入10ml去離子水浸泡，同時(shí)做4～8組平行樣；將培養(yǎng)皿裝入箱子進(jìn)行黑暗保存，誘導(dǎo)次生休眠；(2)檢測休眠率：步驟(1)完成后在500～600nm綠色安全光照下將種子清洗后轉(zhuǎn)移到裝有10ml去離子水的培養(yǎng)皿中，繼續(xù)在黑暗條件下保存，非休眠種子將發(fā)芽；在500～600nm綠色安全光照下剔除發(fā)芽的種子；將所有剩下的種子清洗后再換入裝有8ml3％的雙氧水的培養(yǎng)皿中處理，如果能夠發(fā)芽，則屬于次生休眠種子。進(jìn)一步的，步驟(1)中培養(yǎng)皿黑暗保存的條件為在8℃黑暗保存14天。進(jìn)一步的，步驟(2)中培養(yǎng)皿黑暗保存的條件為在25℃黑暗條件下保存7天。進(jìn)一步的，步驟(2)中種子在3％的雙氧水的培養(yǎng)皿中25℃處理24h。進(jìn)一步的，培養(yǎng)皿的直徑為9cm。進(jìn)一步的，實(shí)驗(yàn)以不經(jīng)次生休眠低溫誘導(dǎo)處理(適宜溫度25℃)的發(fā)芽結(jié)果為對(duì)照。進(jìn)一步的，實(shí)驗(yàn)中的水稻種子為成熟水稻的干種子。本專利技術(shù)的有益效果：本專利技術(shù)的成熟水稻種子次生休眠特性的快速檢測方法是利用水稻種子在吸脹期受低溫條件的影響下可誘發(fā)種子產(chǎn)生次生休眠的特點(diǎn)，通過該方法，可以篩選出次生休眠特性具有顯著差異的水稻品種，本專利技術(shù)的成熟水稻種子次生休眠特性的快速檢測方法完成一次完整的次生休眠檢測需22天，且獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好，為進(jìn)一步揭示水稻次生休眠的發(fā)生機(jī)制提供了重要的技術(shù)支持，同時(shí)也可為其他植物種子次生休眠檢測提供技術(shù)參考。附圖說明下面結(jié)合附圖對(duì)本專利技術(shù)的具體實(shí)施方式做進(jìn)一步闡明。圖1為經(jīng)低溫誘導(dǎo)休眠后25℃萌發(fā)，只有少量種子發(fā)芽的次生休眠性特強(qiáng)品種；圖2為經(jīng)低溫誘導(dǎo)休眠后25℃萌發(fā)，只有極少數(shù)種子未發(fā)芽的次生休眠性特弱品種。具體實(shí)施方式本實(shí)施例以江蘇、浙江、安徽、遼寧等我國主要的水稻產(chǎn)區(qū)的269個(gè)水稻品種(品系)的成熟種子為材料，探究我國水稻品種次生休眠特性的遺傳多樣性。(1)誘導(dǎo)次生休眠：取100粒成熟水稻種子放入墊有雙層濾紙的培養(yǎng)皿中，注入10ml去離子水浸泡，同時(shí)做4～8組平行樣；將培養(yǎng)皿裝入箱子進(jìn)行黑暗保存，誘導(dǎo)次生休眠；(2)檢測休眠率：步驟(1)完成后在500～600nm綠色安全光照下將種子清洗后轉(zhuǎn)移到裝有10ml去離子水的培養(yǎng)皿中，繼續(xù)在黑暗條件下保存，非休眠種子將發(fā)芽；在500～600nm綠色安全光照下剔除發(fā)芽的種子；將所有剩下的種子清洗后再換入裝有8ml3％的雙氧水的培養(yǎng)皿中處理，如果能夠發(fā)芽，則屬于次生休眠種子。進(jìn)一步的，步驟(1)中培養(yǎng)皿黑暗保存的條件為在8℃黑暗保存14天。進(jìn)一步的，步驟(2)中培養(yǎng)皿黑暗保存的條件為在25℃黑暗條件下保存7天。進(jìn)一步的，步驟(2)中種子在3％的雙氧水的培養(yǎng)皿中25℃處理24h。進(jìn)一步的，培養(yǎng)皿的直徑為9cm。進(jìn)一步的，實(shí)驗(yàn)中的水稻種子為成熟水稻的干種子。本實(shí)施例以不經(jīng)次生休眠低溫誘導(dǎo)處理(適宜溫度25℃)的發(fā)芽結(jié)果為對(duì)照。申請(qǐng)人在大量反復(fù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，在本實(shí)施例中列舉不同次生休眠特性的水稻品種經(jīng)低溫誘導(dǎo)后的休眠率，按本實(shí)施例的檢測方法分別對(duì)休眠率特強(qiáng)、休眠率中等和休眠率特弱的水稻品種進(jìn)行4組檢測，不同次生休眠特性的水稻品種經(jīng)低溫誘導(dǎo)后的休眠率的檢測結(jié)果如下表所示：如圖1所示為次生休眠性特強(qiáng)品種，經(jīng)低溫誘導(dǎo)后加水萌發(fā)，只有少量的種子發(fā)芽(為非休眠種子)，剩余的大部分種子未發(fā)芽(為休眠種子)，次生休眠率達(dá)70％；如圖2所示為次生休眠性特弱品種，經(jīng)低溫誘導(dǎo)后加水萌發(fā)，大部分的種子發(fā)芽(為非休眠種子)，只有極少數(shù)種子未發(fā)芽(為休眠種子)，次生休眠率不超過3％。結(jié)論：我國水稻品種間次生休眠性差異極為顯著，次生休眠性特強(qiáng)品種的次生休眠率可達(dá)70％以上，平均在73.5％左右，次生休眠性特中等品種的次生休眠率在44％左右，次生休眠性特弱品種的次生休眠率則不超過3％，平均在1％左右。在以上的描述中闡述了很多具體細(xì)節(jié)以便于充分理解本專利技術(shù)。但是以上描述僅是本專利技術(shù)的較佳實(shí)施例而已，本專利技術(shù)能夠以很多不同于在此描述的其它方式來實(shí)施，因此本專利技術(shù)不受上面公開的具體實(shí)施的限制。同時(shí)任何熟悉本領(lǐng)域技術(shù)人員在不脫離本專利技術(shù)技術(shù)方案范圍情況下，都可利用上述揭示的方法和
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
對(duì)本專利技術(shù)技術(shù)方案做出許多可能的變動(dòng)和修飾，或修改為等同變化的等效實(shí)施例。凡是未脫離本專利技術(shù)技術(shù)方案的內(nèi)容，依據(jù)本專利技術(shù)的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所做的任何簡單修改、等同變化及修飾，均仍屬于本專利技術(shù)技術(shù)方案保護(hù)的范圍內(nèi)。本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種成熟水稻種子次生休眠特性的快速檢測方法，其特征在于：包括如下步驟：(1)誘導(dǎo)次生休眠：取100粒成熟水稻種子放入墊有雙層濾紙的培養(yǎng)皿中，注入10ml去離子水浸泡，同時(shí)做4～8組平行樣；將培養(yǎng)皿裝入箱子進(jìn)行黑暗保存，誘導(dǎo)次生休眠；(2)檢測休眠率：步驟(1)完成后在500～600nm綠色安全光照下將種子清洗后轉(zhuǎn)移到裝有10ml去離子水的培養(yǎng)皿中，繼續(xù)在黑暗條件下保存，非休眠種子將發(fā)芽；在500～600nm綠色安全光照下剔除發(fā)芽的種子；所有剩下的種子清洗后再換入裝有8ml?3％的雙氧水的培養(yǎng)皿中處理，如果能夠發(fā)芽，則屬于次生休眠種子。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種成熟水稻種子次生休眠特性的快速檢測方法，其特征在于：包括如下步驟：(1)誘導(dǎo)次生休眠：取100粒成熟水稻種子放入墊有雙層濾紙的培養(yǎng)皿中，注入10ml去離子水浸泡，同時(shí)做4～8組平行樣；將培養(yǎng)皿裝入箱子進(jìn)行黑暗保存，誘導(dǎo)次生休眠；(2)檢測休眠率：步驟(1)完成后在500～600nm綠色安全光照下將種子清洗后轉(zhuǎn)移到裝有10ml去離子水的培養(yǎng)皿中，繼續(xù)在黑暗條件下保存，非休眠種子將發(fā)芽；在500～600nm綠色安全光照下剔除發(fā)芽的種子；所有剩下的種子清洗后再換入裝...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：唐瑭，趙祥祥，劉福霞，陳桂敏，卜翠平，顧思凱，王亞楠，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：淮陰師范學(xué)院，
類型：發(fā)明
國別省市：江蘇,32