一種快速創制花生新種質的方法技術

本發明專利技術公開了一種快速創制花生新種質的方法，它包括以下步驟：選擇抗病性、適應性和莢果、籽仁性狀較好的花生品種，以期通過誘變提高品種的優質特性，利用蒸餾水進行浸種；將種子浸泡于EMS磷酸緩沖液中，流水處理晾干；單粒播種，秋季單株收獲；利用南繁或第二季繼續進行單粒單行播種，收獲單株后代，淘汰單株結果數少于10粒莢果的單株；利用近紅外儀器進行單株品質檢測，保留變異的粗脂肪、粗蛋白、高油酸等品質特點突出的試材；種子第二次誘變處理：選擇品質性狀比原有品質性狀有所增加的種子進行混合，重復進行誘變處理。該方法提高了EMS誘變效率，加快了優異花生創制，推動了花生產業化發展。

【技術實現步驟摘要】
一種快速創制花生新種質的方法
本專利技術涉及一種加快不創制花生新品種的方法，特別是涉及一種重復利用甲基磺酸乙酯（EMS）誘變處理花生種子的方法。
技術介紹
花生栽培種（ArachishypogaeaL.）是一種異源四倍體作物，基因組來源于花生野生種，目前研究結果表明，花生栽培品種遺傳多態性極低，單純依靠品種間雜交要育成突破性的品種已十分困難，因此國內外育種工作者在常規育種工作的基礎上，把目光投向了誘變育種研究。甲基磺酸乙酯（ethylmethanesulfonateEMS）是一種烷化劑，是目前應用最廣泛、應用效果最好的化學誘變劑。能使一些堿基烷基化，比如使鳥苷酸甲基化，影響mRNA的轉錄，從而使蛋白質的表達紊亂，使得蛋白質重組，而改變了性狀。其特點是突變頻率高，產生的顯性突變體相對較多；誘變范圍廣，出現的突變體類型較多；后代較易穩定，一般可穩定遺傳。花生中利用EMS有過相關報道，由于其突變的隨機性，誘變獲得的有益突變所占比例較小，所以為保證有益突變的獲得，其要求是處理的花生起始種子基數較大，一般需要1萬粒以上的種子量，誘變后代的M2代和M3代占地非常大，田間統計和后代品質分析繁瑣，大大增加了人力和物力。
技術實現思路
為克服現有技術的不足，本專利技術通過多年實踐，提供一種快速創制優質花生新種質的方法，該方法是起始樣品僅需要200粒~1000粒花生種子，經EMS誘變處理后，淘汰單株結果數少于10粒莢果的單株，選擇M3代品質性狀比原有品質性狀有所增加的種子進行混合，重復進行EMS誘變處理，經M3代或M4代以上的單株后代進行單株檢測，獲得大批的高油、高蛋白和高油酸的花生誘變單株，加快創制了優質花生新種質，且方法簡單、效果好，節省了大量人力和物力。為了解決現有技術存在的問題，本專利技術采用的技術方案是：一種快速創制花生新種質的方法，包括以下步驟：（1）種子選擇：選擇抗病性、適應性和莢果、籽仁性狀較好的花生品種，以期通過誘變提高品種的優質特性，利用蒸餾水進行浸種；（2）種子第一次誘變處理：挑選步驟（1）所述的花生種子，浸泡于甲基磺酸乙酯（EMS）磷酸緩沖液中，而后流水處理，晾干；（3）誘變后管理：處理后的花生種子，在田間進行單粒播種，秋季進行單株收獲；單株收獲后，利用南繁或第二季繼續進行單粒單行播種，收獲單株后代，淘汰單株結果數少于10粒莢果的單株；（4）誘變種子后代檢測：利用近紅外儀器進行單株品質檢測，保留變異的粗脂肪、粗蛋白、高油酸等品質特點突出的試材；（5）種子第二次誘變處理：選擇品質性狀比原有品質性狀有所增加的種子進行混合，重復進行誘變處理，按照步驟（2）、（3）、（4）進行品質分析。步驟（2）所述的花生種子為當季的飽滿種子，用蒸餾水浸種4h~5h。甲基磺酸乙酯原液利用乙醇稀釋后配制，濃度為0.3%~0.4%。所述的甲基磺酸乙酯磷酸緩沖液的濃度為0.1mol/L，用NaOH調至PH值為7.0，用量為每粒種子1ml~3ml。步驟（2）中所述的花生種子浸泡于甲基磺酸乙酯（EMS）磷酸緩沖液中的處理時間為6h~8h。所述的花生種子浸種后，取出流水處理1h~2h，通風廚下晾干，準備播種。本專利技術所具有的優點與效果是：本專利技術一種快速創制花生新種質的方法可以減少誘變起始的花生樣品，可以減少大量的人力與物力；結合南繁加代，利用三年時間就可以獲得粗脂肪、粗蛋白、油酸等品質性狀提高的種質資源；通過兩次誘變，增加了后代的突變率，有益的突變率增加。提高了EMS誘變效率，加快了優異花生創制，推動了花生產業化發展。具體實施方式下面結合具體實施例對本專利技術進行詳細描述：一種快速創制花生新種質的方法，包括以下步驟：（1）種子選擇：選擇抗病性、適應性和莢果、籽仁性狀較好的花生品種，以期通過誘變提高品種的優質特性，利用蒸餾水進行浸種；（2）種子第一次誘變處理：挑選步驟（1）所述的花生種子，浸泡于甲基磺酸乙酯（EMS）磷酸緩沖液中，而后流水處理，晾干；（3）誘變后管理：處理后的花生種子，在田間進行單粒播種，秋季進行單株收獲；單株收獲后，利用南繁或第二季繼續進行單粒單行播種，收獲單株后代，淘汰單株結果數少于10粒莢果的單株；（4）誘變種子后代檢測：利用近紅外儀器進行單株品質檢測，保留變異的粗脂肪、粗蛋白、高油酸等品質特點突出的試材；（5）種子第二次誘變處理：選擇品質性狀比原有品質性狀有所增加的種子進行混合，重復進行誘變處理，按照步驟（2）、（3）、（4）進行品質分析。步驟（2）所述的花生種子為當季的飽滿種子，用蒸餾水浸種4h~5h。甲基磺酸乙酯原液利用乙醇稀釋后配制，濃度為0.3%~0.4%。所述的甲基磺酸乙酯磷酸緩沖液的濃度為0.1mol/L，用NaOH調至PH值為7.0，用量為每粒種子1ml~3ml。步驟（2）中所述的花生種子浸泡于甲基磺酸乙酯（EMS）磷酸緩沖液中的處理時間為6h~8h。所述的花生種子浸種后，取出流水處理1h~2h，通風廚下晾干，準備播種。實施例1：下面以遼寧省阜新地區選育的高油、高蛋白、高油酸花生新品系為例，對本專利技術進行詳細說明。（1）種子選擇：第一年春季選擇遼寧地區生產上適應性廣的阜花12號花生品種作為誘變起始材料，經檢測誘變起始材料的粗脂肪平均值為50.6%、粗蛋白平均值為24.33%、油酸平均值為39.0%。經試材整理，選擇1000粒飽滿、整齊一致的種仁，在播種前一日的上午8時~9時，利用蒸餾水進行浸泡，浸種4h~5h。（2）種子第一次誘變處理：取10gEMS加10ml乙醇混溶后，加入到2.5L0.1mol/L的KH2PO4中，將浸種后的種子放入誘變劑中6h~8h；取出后用流水沖洗1h~2h。隨后將處理后的花生種仁平攤，通風廚下晾干，次日單粒播種在田間。（3）誘變后管理：處理后的花生種子在田間進行單粒播種，秋季進行田間調查，致死率在50%-70%之間，收獲M2代單株試材，結合海南進行單粒單行播種加代一季，繼續收獲單株，收獲M3代單株試材，淘汰單株結果數少于10粒莢果的單株，繼續收獲單株。（4）誘變種子后代檢測：利用FOSS福斯集團公司生產的近紅外分析儀對單株收獲的后代的粗脂肪、粗蛋白和油酸進行檢測，候選出粗脂肪、粗蛋白、油酸等品質性狀優異試材，第二年繼續單株播種，其余M3代單株種仁，選擇品質性狀比原有品質性狀有所增加的種子400粒進行混合。（5）重復誘變處理：方法與第一年相同，秋季繼續調查出苗率，單株收獲重復誘變獲得的M2代種子，繼續結合海南或繼續進行單粒單行播種，獲得重復誘變的M3代種子，淘汰單株結果數少于10粒莢果的單株，繼續單株播種。（6）待收獲到重復誘變獲得的M3代或更高世代單株，繼續利用近紅外儀器進行品質檢測。結果表明，經重復誘變后，M3代種子中粗脂肪、粗蛋白、油酸等品質性狀突變率明顯提高。經檢測，經兩次誘變后的阜花12號粗脂肪平均值為56.1%、粗蛋白平均值為21.3%、油酸平均值為44.7%。經M4代單株后代進行品質檢測，均穩定遺傳，誘變效果較好。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種快速創制花生新種質的方法，其特征在于包括以下步驟：（1）種子選擇：選擇抗病性、適應性和莢果、籽仁性狀較好的花生品種，以期通過誘變提高品種的優質特性，利用蒸餾水進行浸種；（2）種子第一次誘變處理：挑選步驟（1）所述的花生種子，浸泡于甲基磺酸乙酯磷酸緩沖液中，而后流水處理，晾干；（3）誘變后管理：處理后的花生種子，在田間進行單粒播種，秋季進行單株收獲；單株收獲后，利用南繁或第二季繼續進行單粒單行播種，收獲單株后代，淘汰單株結果數少于10粒莢果的單株；（4）誘變種子后代檢測：利用近紅外儀器進行單株品質檢測，保留變異的粗脂肪、粗蛋白、高油酸等品質特點突出的試材；（5）種子第二次誘變處理：選擇品質性狀比原有品質性狀有所增加的種子進行混合，重復進行誘變處理，按照步驟（2）、（3）、（4）進行品質分析。

【技術特征摘要】
1.一種快速創制花生新種質的方法，其特征在于包括以下步驟：（1）種子選擇：選擇抗病性、適應性和莢果、籽仁性狀較好的花生品種，以期通過誘變提高品種的優質特性，利用蒸餾水進行浸種；（2）種子第一次誘變處理：挑選步驟（1）所述的花生種子，浸泡于甲基磺酸乙酯磷酸緩沖液中，而后流水處理，晾干；（3）誘變后管理：處理后的花生種子，在田間進行單粒播種，秋季進行單株收獲；單株收獲后，利用南繁或第二季繼續進行單粒單行播種，收獲單株后代，淘汰單株結果數少于10粒莢果的單株；（4）誘變種子后代檢測：利用近紅外儀器進行單株品質檢測，保留變異的粗脂肪、粗蛋白、高油酸等品質特點突出的試材；（5）種子第二次誘變處理：選擇品質性狀比原有品質性狀有所增加的種子進行混合，重復進行誘變處理，按照步驟（2）、（3）、（4）進行品質分析。2.根據...

【專利技術屬性】
技術研發人員：于樹濤，于國慶，孫泓希，任亮，王虹，史普想，尤淑麗，崔雪艷，趙立仁，王海新，于洪波，
申請(專利權)人：遼寧省風沙地改良利用研究所，
類型：發明
國別省市：遼寧,21