一種納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物及其制備方法技術

本發明專利技術公開了一種納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物及其制備方法。所述納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物由異種脫細胞神經移植物和附著于其表面的可降解聚酯納米纖維膜組成，異種脫細胞神經移植物為健康哺乳動物的離體周圍神經經脫細胞處理得到的細胞外基質。納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物經過冷凍干燥處理后水分含量極低，性能穩定，滅菌、封裝后可以實現無保護液、常溫保存；本發明專利技術納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物，來源廣泛、價格低廉，同時無免疫原性、生物相容性好、使用安全；完整保留了周圍神經細胞外基質的微結構，為神經軸突再生、恢復神經傳導功能提供天然的管道支架和營養環境。

Heterogeneous Acellular nerve graft with surface modification of nano fiber and preparation method thereof

The invention discloses a xenogeneic acellular nerve graft modified by nano fiber surface and a preparation method thereof. The nano fiber surface modification of xenogeneic acellular nerve graft by acellular nerve graft and attached to the surface of the biodegradable polyester nano fiber membrane, acellular nerve graft for in vitro mammalian peripheral nerve health by acellular extracellular matrix obtained. Nano fiber surface modified acellular nerve graft after freeze-drying treatment after the moisture content is extremely low, stable performance, sterilization, packaging can be achieved without the protection liquid, normal temperature preservation; the nano fiber surface modified acellular nerve graft, wide source, low price, and no immunogenicity and good biocompatibility and safety; retain the integrity of the micro structure of peripheral nerve extracellular matrix, for axonal regeneration and functional recovery of nerve conduction pipe support and provide natural nutrition environment.

【技術實現步驟摘要】
一種納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物及其制備方法
本專利技術涉及一種納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物及其制備方法，屬于生物醫用材料領域。
技術介紹
周圍神經損傷可能造成機體感覺和運動功能的部分或全部喪失，從而嚴重影響機體的功能行使和病患的生活質量。周圍神經缺損的修復，尤其是長距離缺損的修復，一直是臨床上較為棘手的難題。目前最常用的方法是利用自體神經移植來橋接斷端以修復損傷，雖然修復效果良好，但存在諸如來源有限、導致二次創傷及易形成供區神經瘤等缺點，極大限制了其臨床應用。近年來發展起來的神經導管類修復材料，雖具有一定的周圍神經缺損修復效果，但由于其內部一般為中空結構，無法有效引導細胞的遷移和增殖，因此對于長距離缺損修復無能為力。目前在臨床上應用的同種異體脫細胞神經保留了天然神經內部的微結構，可用于修復長距離周圍神經損傷，但由于受供體來源限制導致價格昂貴，患者可接受度較差。異種脫細胞神經同樣有著接近人周圍神經的網架微結構，材料本身所保留的成分有引導或誘導組織再生的能力，同時具備來源廣泛、免疫原性低的特點，因此在用于構建組織工程神經以修復周圍神經缺損方面具有明顯的優勢。在周圍神經損傷及修復過程中，粘連的形成具有普遍性。上述脫細胞神經移植物在植入體內后，雖然能修復神經缺損部位，但同時，必定會促使成纖維細胞大量增生，分泌大量膠原纖維，形成瘢痕、粘連，不利于神經之間的銜接，影響手術效果，有時還可導致嚴重的術后并發癥。因此，臨床上長期需要一種能有效預防組織粘連、可修復長距離缺損同時來源廣泛、價格低廉的脫細胞神經移植物。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物及其制備方法；本專利技術采用靜電紡絲工藝在異種脫細胞神經移植物表面沉積一層可降解聚酯高分子納米纖維膜，以期在用于外科手術中修復周圍神經缺損的同時，防止組織粘連的發生，加快神經修復和神經傳導的重建。本專利技術所提供的納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物，由異種脫細胞神經移植物和附著于其表面的可降解聚酯納米纖維膜組成；所述異種脫細胞神經移植物為健康哺乳動物的離體周圍神經經脫細胞處理得到的細胞外基質，所述脫細胞處理可在常規工藝條件下進行。所述納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物中，所述可降解聚酯納米纖維膜的厚度可為0.01～0.5mm，具體可為0.05～0.1mm、0.05mm、0.07mm、0.08mm或0.2mm。所述納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物中，所述可降解聚酯納米纖維膜由可降解聚酯制成；所述可降解聚酯可為聚乳酸、聚己內酯、聚乙醇酸、聚對二氧環己酮、聚三亞甲基碳酸酯、聚乙二醇、聚羥基丁酸酯、聚羥基乙酸、聚羥基戊酸酯、聚丁二酸丁二醇酯和聚氨酯中至少一種或其中至少兩種的共聚物；所述可降解聚酯的重均分子量可為30～500Kda，具體可為150～300Kda、150Kda、200Kda、250Kda或300Kda。本專利技術納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物中的可降解聚酯納米纖維膜，具有多孔纖維狀結構，且結合牢固、分布均勻；同時其具有結構同人體天然細胞外基質相似、孔隙率高、比表面積大及孔徑小等特點，在再生醫學領域得到了廣泛的應用。高分子纖維膜內部納米級孔結構的存在可實現良好的組織粘連阻隔效果，起到防止神經移植物和周圍組織粘連的作用，同時還可以實現膜兩側的組織液流通順暢，有利于營養物質的交換并促進神經再生。本專利技術進一步提供了所述納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物的制備方法，包括如下步驟：利用可降解聚酯配制紡絲液，利用靜電紡絲工藝將所述紡絲液沉積于所述異種脫細胞神經移植物的表面形成所述可降解聚酯納米纖維膜，然后依次經去除溶劑步驟、冷凍干燥和滅菌處理即得所述納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物。上述的制備方法中，所述紡絲液中，所述可降解聚酯的質量體積濃度可為0.02～0.2g/ml，具體可為0.06～0.15g/ml、0.06g/ml、0.075g/ml、0.08g/ml或0.15g/ml。上述的制備方法中，所述紡絲液的溶劑可為丙酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、四氫呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、去離子水、1,4-二氧六環、六氟異丙醇、乙醇、二甲基亞砜和三氟乙酸中至少一種，優選丙酮、二氯甲烷或六氟異丙醇。上述的制備方法中，所述靜電紡絲工藝的條件如下：所述紡絲液的供給流量可為0.1～20ml/h，具體可為1～3ml/h、1ml/h、2ml/h或3ml/h；高壓發生端與收集裝置之間的距離可為3～30cm，具體可為10～15cm、10cm、12.5cm、13cm或15cm，所述收集裝置包括滾軸和固定其上的所述異種脫細胞神經移植物，所述異種脫細胞神經移植物可隨所述滾軸勻速轉動；所述高壓發生端提供的電壓可為0.1～40KV，具體可為10～15KV、10KV、12.5KV、13KV或15KV；所述滾軸的轉速可為100～1000轉/分，具體可為100～300轉/分、100轉/分、200轉/分、250轉/分或300轉/分。上述的制備方法中，所述去除溶劑步驟包括依次在乙醇和水中浸泡的步驟，各浸泡6～24小時，具體可為6～12小時、6小時、8小時、10小時或12小時，重復2～8次。上述的制備方法中，所述冷凍干燥的溫度可為-10℃～-45℃，具體可為-10℃～-30℃、-10℃、-15℃、-20℃或-30℃，時間可為6小時～12小時，具體可為6小時、8小時、10小時或12小時；所述滅菌處理采用下述1)-2)中任一種方式：1)環氧乙烷滅菌2)鈷-60或電子束輻照滅菌，輻照劑量可為10～15KGy，具體可為12～15KGy、12KGy、13KGy或15KGy；上述滅菌方式可以降低對所得產物的降解性能的破壞。本專利技術納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物可應用于周圍神經缺損的修復。本專利技術具有如下有益效果：(1)本專利技術納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物，來源廣泛、價格低廉，同時無免疫原性、生物相容性好、使用安全；完整保留了周圍神經細胞外基質的微結構，為神經軸突再生、恢復神經傳導功能提供天然的管道支架和營養環境。(2)通過靜電紡絲工藝將可降解高分子納米纖維膜包覆在異種脫細胞神經的表面，納米級孔隙具有很好的物理阻隔作用，保證了防粘連的效果；多孔結構的存在又可以實現膜兩側的組織液流通順暢，有利于營養物質的交換，促進神經再生。(3)可以通過改變電紡的電壓、距離、時間等參數，很方便的調控納米纖維膜的厚度、孔隙率、纖維直徑，可以根據植入環境的要求獲得具有不同形貌結構和降解時間的纖維膜。(4)納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物經過冷凍干燥處理后水分含量極低，性能穩定，滅菌、封裝后可以實現無保護液、常溫保存。附圖說明圖1是本專利技術納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物的結構示意圖，其中1表示異種脫細胞神經，2表示可降解高分子納米纖維膜。具體實施方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。下述實施例中所用的異種脫細胞神經移植物是按照如下方法制備的：取健康哺乳動物周圍神經，利用中國專利技術專利申請CN106139250A中公開的脫細胞工藝處理后，即得到異種脫細胞神經移植物。實施例1：1本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物，其特征在于：其由異種脫細胞神經移植物和附著于其表面的可降解聚酯納米纖維膜組成；所述異種脫細胞神經移植物為健康哺乳動物的離體周圍神經經脫細胞處理得到的細胞外基質。

【技術特征摘要】
1.一種納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物，其特征在于：其由異種脫細胞神經移植物和附著于其表面的可降解聚酯納米纖維膜組成；所述異種脫細胞神經移植物為健康哺乳動物的離體周圍神經經脫細胞處理得到的細胞外基質。2.根據權利要求1所述的異種脫細胞神經移植物，其特征在于：所述可降解聚酯納米纖維膜的厚度為0.01～0.5mm。3.根據權利要求1或2所述的異種脫細胞神經移植物，其特征在于：所述可降解聚酯納米纖維膜由可降解聚酯制成；所述可降解聚酯為聚乳酸、聚己內酯、聚乙醇酸、聚對二氧環己酮、聚三亞甲基碳酸酯、聚乙二醇、聚羥基丁酸酯、聚羥基戊酸酯、聚羥基乙酸、聚丁二酸丁二醇酯和聚氨酯中至少一種或其中至少兩種的共聚物；所述可降解聚酯的重均分子量為30～500KDa。4.權利要求1-3中任一項所述納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物的制備方法，包括如下步驟：利用可降解聚酯配制紡絲液，利用靜電紡絲工藝將所述紡絲液沉積于所述異種脫細胞神經移植物的表面形成所述可降解聚酯納米纖維膜，然后依次經去除溶劑步驟、冷凍干燥和滅菌處理即得所述納米纖維表面改性的異種脫細胞神經移植物。5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：所述紡絲液中，所述可降解聚酯的...

【專利技術屬性】
技術研發人員：竇源東，尹曉彤，孫先昌，陳振華，任志偉，
申請(專利權)人：煙臺正海生物科技股份有限公司，
類型：發明
國別省市：山東,37