乙酰胺類化合物及其用途制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種乙酰胺類化合物及其用途。本發(fā)明專利技術(shù)公開(kāi)了一類結(jié)構(gòu)新穎的N?(4?取代苯乙基)酰胺類化合物。通過(guò)體外活性測(cè)試實(shí)驗(yàn)表明該類化合物對(duì)半胱氨酸蛋白酶(FP?2)和二氫葉酸還原酶(DHFR)具有酶抑制活性，且經(jīng)殺瘧實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：該類化合物對(duì)野生、耐藥瘧原蟲都具有抑制作用。

Acetamide compounds and uses thereof

The present invention relates to a acetamide compound and uses thereof. The invention discloses a novel structure of N (4 replaced Ben Yiji) amide compounds. Show that this kind of compounds on cysteine protease by in vitro activity test (FP 2) and dihydrofolate reductase (DHFR) enzyme inhibitory activity, and kill malaria by experimental results show that the compounds have inhibitory effect on wild and resistant plasmodium.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
乙酰胺類化合物及其用途
本專利技術(shù)涉及一種乙酰胺類化合物及其用途，具體地說(shuō)，涉及一種N-(4-取代苯基)乙酰胺類化合物及其用途。
技術(shù)介紹
瘧疾是世界上最嚴(yán)重的流行病之一。有100多個(gè)國(guó)家和地區(qū)的大約30億人口受到瘧疾的威脅，全球每年患瘧疾的人有3.5～5億，每年死于瘧疾的患者為150～270萬(wàn)，其中約一半為兒童，90％的病例發(fā)生在非洲和亞洲的貧困國(guó)家。在我國(guó)流行瘧區(qū)主要包括海南和云南等19個(gè)省市，自治區(qū)，約數(shù)百萬(wàn)人發(fā)病。雖然目前已存在有效的抗瘧疾藥物，但瘧疾患者的死亡率逐年上升，主要原因是瘧原蟲對(duì)有限的抗瘧藥物很快適應(yīng)，產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗藥性。瘧疾防治在很大程度上還依賴于化學(xué)藥物的預(yù)防和治療。近70多年來(lái)，只有少數(shù)藥物適用于臨床，而抗藥性瘧原蟲株日漸增多。隨著生物化學(xué)、分子生物學(xué)和分子藥理學(xué)等相關(guān)學(xué)科的不斷發(fā)展，揭示了許多酶和受體在生物體內(nèi)的生物化學(xué)過(guò)程中的作用，以在生物體內(nèi)起關(guān)鍵性作用的酶，作為藥物作用靶點(diǎn)進(jìn)行新藥設(shè)計(jì)已經(jīng)成為新藥研究開(kāi)發(fā)的發(fā)展趨勢(shì)。新型抗瘧原蟲藥物的設(shè)計(jì)是以一種在瘧原蟲生命周期中起重要作用的半胱氨酸蛋白酶(falcipain)為靶點(diǎn)，推動(dòng)這個(gè)發(fā)展過(guò)程的是人們對(duì)木瓜蛋白酶半胱氨酸蛋白酶這個(gè)藥物靶標(biāo)認(rèn)識(shí)的不斷深入。瘧原蟲通過(guò)消化紅細(xì)胞，作為主要的氨基酸來(lái)源用于自身的蛋白質(zhì)合成。已知在血紅蛋白的降解過(guò)程中，有三種瘧原蟲蛋白酶起重要的作用。其中PlasmepainI和II屬天門冬氨酸蛋白酶，falcipain屬半胱氨酸蛋白酶。天門冬氨酸蛋白酶抑制劑主要作用于分瓣原蟲和紅細(xì)胞破裂；半胱氨酸蛋白酶抑制劑主要作用于原蟲營(yíng)養(yǎng)體，特異性地作用于瘧原蟲生命周期中紅細(xì)胞降解的第一步，使瘧原蟲因缺少合成自身蛋白的自由氨基酸而死亡。而臨床上廣泛應(yīng)用的抗瘧藥氯喹則通過(guò)抑制游離血紅素的聚合，使瘧原蟲被游離原血紅素釋放的大量游離基殺死。顯然半胱氨酸蛋白酶抑制劑殺死瘧原蟲的機(jī)制和氯喹不同。因此選擇半胱氨酸蛋白酶作為抗瘧新藥研究的靶點(diǎn)，可望克服抗瘧藥物的耐藥性問(wèn)題。半胱氨酸蛋白酶是Mr約為21,000～30,000的蛋白質(zhì)，在pH4～6.5時(shí)具有最高水解活性，它的活性部位具有半胱氨酸殘基，原蟲的半胱氨酸蛋白酶屬于木瓜蛋白酶家族。已知的瘧原蟲半胱氨酸蛋白酶有四個(gè)亞型，falcipain-1，falcipain-2A，falcipain-2B和falcipain-3。Falcipain-1是第一個(gè)表達(dá)得到的瘧原蟲半胱氨酸蛋白酶，其生物學(xué)研究表明，它對(duì)瘧原蟲的無(wú)性生殖階段并無(wú)影響，但能顯著的影響卵囊的功能。falcipain-2A和falcipain-2B具有97％的同源性，氨基酸序列的7位有所不同。通過(guò)寡核苷酸探針的監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，falcipain-2BmRNA的表達(dá)水平比f(wàn)alcipain-2A低。然而falcipain-2A和falcipain-2B在瘧原蟲營(yíng)養(yǎng)體晚期其表達(dá)的時(shí)間依賴性和峰值極為相似，這表明兩種不同的亞型具有相似的生物學(xué)功能。falcipain-3與falcipain-2(FP-2)在催化域有66.6％的同源性，但是它們表達(dá)的階段有所不同。falcipain-2在營(yíng)養(yǎng)體階段表達(dá)達(dá)到最高峰，而falcipain-3在更為成熟的瘧原蟲階段表達(dá)達(dá)到高峰。falcipain-3的晶體結(jié)構(gòu)還未見(jiàn)報(bào)道。在這幾種亞型中falcipain-2的研究最多，因此其抑制劑的開(kāi)發(fā)亦受到更為廣泛的關(guān)注。除了對(duì)半胱氨酸蛋白酶falcipain-2有抑制作用，對(duì)二氫葉酸還原酶(dihydrofolatereductase，DHFR)也有抑制作用。二氫葉酸還原酶(DHFR)是核酸代謝中關(guān)鍵的酶之一，是癌癥，抗瘧，抗菌藥物治療中的主要靶酶，近年來(lái)得到廣泛的研究。二氫葉酸還原酶抑制劑能選擇性的與二氫葉酸還原酶結(jié)合，抑制其催化還原活性，使二氫葉酸不能順利轉(zhuǎn)變?yōu)樗臍淙~酸，而后者變成輔酶F后，可為胸腺嘧啶、嘌呤、絲氨酸、蛋氨酸等體內(nèi)生物合成提供一碳單位。如果阻礙葉酸代謝過(guò)程，將干擾DNA和蛋白質(zhì)的合成，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。二氫葉酸還原酶(dihydrofolatereductase，DHFR)幾乎存在于所有生物的細(xì)胞內(nèi)，在藥物研發(fā)領(lǐng)域已成為抗瘧、抗癌、抗菌藥物治療中的主要靶酶之一，近年來(lái)因其廣泛的生物活性倍受關(guān)注。因此，可通過(guò)抑制falcipain-2(FP-2)和DHFR來(lái)抑制瘧原蟲的生長(zhǎng)、繁殖，篩選出強(qiáng)效的FP-2&DHFR雙重抑制劑來(lái)治療瘧疾。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的專利技術(shù)人設(shè)計(jì)、并合成了一類N-(4-取代苯乙基)酰胺類化合物。通過(guò)體外活性測(cè)試表明：該類乙酰胺類化合物對(duì)半胱氨酸蛋白酶(falcipain-2，F(xiàn)P-2)和二氫葉酸還原酶(DihydrofolateReductase，DHFR)具有酶抑制活性。并且殺瘧實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：該類乙酰胺類化合物對(duì)野生、耐藥瘧原蟲都具有抑制作用。本專利技術(shù)一個(gè)目的在于，提供一種結(jié)構(gòu)新穎的乙酰胺類化合物；本專利技術(shù)所述的乙酰胺類化合物，為式I所示化合物、或其在藥學(xué)上可接受的鹽：式I中：R1為式A或B所示基團(tuán)：R2為由苯基取代的C1～C4的直鏈或支鏈烷基，C4～C10的環(huán)烷基、雜環(huán)基或芳環(huán)基，或取代的C4～C10的環(huán)烷基、雜環(huán)基或芳環(huán)基；其中，所述雜環(huán)基的雜原子為氮(N)、氧(O)或/和硫(S)，所述取代的C4～C10的環(huán)烷基、雜環(huán)基或芳環(huán)基的取代基選自下列基團(tuán)中一種或兩種以上(含兩種，下同)：C1～C4的直鏈或支鏈烷基，鹵代的C1～C4的直鏈或支鏈烷基，C1～C4的直鏈或支鏈烷氧基，鹵素(F、Cl、Br或I)，硝基(NO2)或n為1或2。本專利技術(shù)另一個(gè)目的在于，揭示上述乙酰胺類化合物一種用途。即：式I所示化合物、或其在藥學(xué)上可接受的鹽在制備半胱氨酸蛋白酶(FP-2)和二氫葉酸還原酶(DHFR)抑制劑中的應(yīng)用；及式I所示化合物、或其在藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療瘧疾(特別是由瘧原蟲引起的瘧疾)的藥物中的應(yīng)用。本專利技術(shù)還有一個(gè)目的在于，提供一種制備式I所示化合物的方法。所述方法包括如下步驟：(1)由4-溴苯乙胺與羧酸(R2COOH)反應(yīng)，制備式II所示化合物的步驟；(2)由式II所示化合物制備式III所示化合物的步驟；(3)由鹽酸胍與2-氯-5-硝基苯甲腈反應(yīng)，得到式IV所示化合物的步驟；(4)由式IV所示化合物經(jīng)催化加氫反應(yīng)，得到式V所示化合物的步驟；和，(5)由式III所示化合物與式V所示化合物反應(yīng)，得到目標(biāo)物(式I所示化合物)的步驟。其中，R2的定義與前文所述相同。附圖說(shuō)明圖1.紫外檢測(cè)法測(cè)試抑制二氫葉酸還原酶(DHFR)的活性數(shù)據(jù)的原理示意圖；圖2.為化合物IA-10和化合物IA-14對(duì)惡性瘧原蟲(3D7C8)生長(zhǎng)抑制曲線(體外)；圖3.化合物IA-10和化合物IA-14對(duì)氯喹抗性惡性瘧原蟲(Dd2)生長(zhǎng)抑制曲線(體外)；圖4.為化合物IA-10和化合物IA-14對(duì)惡性瘧原蟲(3D7C8)生長(zhǎng)抑制曲線(體內(nèi))。具體實(shí)施方式在本專利技術(shù)一個(gè)優(yōu)選技術(shù)方案中，R1為式A所示基團(tuán)；R2為由苯基取代的C1～C4的直鏈或支鏈烷基，呋喃基，噻吩基，環(huán)己基，苯基，吡啶基，萘基，或取代的環(huán)己基或苯基；所述取代的環(huán)己基、苯基或芴基的取代基選自下列基團(tuán)中一種或兩種以上：C1～C4的直鏈或支鏈烷基，氟代的C1～C4的直鏈或支鏈烷基，C1～本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種乙酰胺類化合物，為式I所示化合物、或其在藥學(xué)上可接受的鹽：

【技術(shù)特征摘要】
1.一種乙酰胺類化合物，為式I所示化合物、或其在藥學(xué)上可接受的鹽：式I中：R1為式A或B所示基團(tuán)：R2為由苯基取代的C1～C4的直鏈或支鏈烷基，C4～C10的環(huán)烷基、雜環(huán)基或芳環(huán)基，或取代的C4～C10的環(huán)烷基、雜環(huán)基或芳環(huán)基；其中，所述雜環(huán)基的雜原子為氮、氧或/和硫，所述取代的C4～C10的環(huán)烷基、雜環(huán)基或芳環(huán)基的取代基選自下列基團(tuán)中一種或兩種以上：C1～C4的直鏈或支鏈烷基，鹵代的C1～C4的直鏈或支鏈烷基，C1～C4的直鏈或支鏈烷氧基，鹵素，硝基或n為1或2。2.如權(quán)利要求1所述的乙酰胺類化合物，其特征在于，其中，R1為式A所示基團(tuán)；R2為由苯基取代的C1～C4的直鏈或支鏈烷基，呋喃基，噻吩基，環(huán)己基，苯基，吡啶基，萘基，或取代的環(huán)己基或苯基；所述取代的環(huán)己基、苯基或芴基的取代基選自下列基團(tuán)中一種或兩種以上：C1～C4的直鏈或支鏈烷基，氟代的C1～C4的直鏈或支鏈烷基，C1～C4的直鏈或支鏈烷氧基，鹵素，硝基或n為1或2。3.如權(quán)利要求2所述的乙酰胺類化合物，其特征在于，其中，R2為芐基，苯乙基，2-呋喃基，2-噻吩基，環(huán)己基，4-吡啶基，2-萘基，或取代的環(huán)己基或苯基；所述取代的環(huán)己基或苯基的取代基選自下列基團(tuán)中一種或兩種以上：甲氧基，叔丁基，三氟甲基，鹵素，硝基，或n為1或2。4.如權(quán)利要求3所述的乙酰胺類化合物，其特征在于，其中R2為芐基，苯乙基，4-叔丁基環(huán)己基，2-氟-苯基，3-氟苯基，4-氟-苯基，3-甲氧基-苯基，4-甲氧基-苯基，4-硝基-苯基，4-三氟甲基-苯基，3,4-二甲氧基-苯基，3,5-二甲氧基-苯基，3-氯-4-甲氧基-苯基，5.如權(quán)利要求4所述的乙酰胺類化合物，其特征在于，所述乙酰胺類化合物為下列化合物中一種：N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-4-硝基苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧芑-6-甲酰胺，N-(4-((((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)苯并[d][1,3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-3,4-二甲氧基苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-4-氟苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-2-氟苯甲酰胺，4-氯-N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-2-氟苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-3-氟苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-4-對(duì)甲氧基苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-3-對(duì)甲氧基苯甲酰胺，3-氯-N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-4-對(duì)甲氧基苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：朱進(jìn)，黃瑾，陳文華，姚雪，凌大正，王曼炯，蔣華良，李劍，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：華東理工大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：上海,31