一種免疫印跡薄膜及其制備方法技術

本發明專利技術公開了一種免疫印跡薄膜及其制備方法。所述免疫印跡薄膜表面具有以疏水區域間隔的多個平行的條狀親水區域，所述條狀親水區域具有一個或多個結合區，所述結合區上具有目標抗原，用于結合免疫印跡的目標抗體。本發明專利技術的免疫印跡薄膜上，可以同時檢測多個目標抗體的蛋白樣本，從而提高了平行檢測的反應效率。同時，免疫印跡薄膜具有以疏水區域間隔的多個平行的條狀親水區域，通過親水區域的吸附力與目標抗體結合，從而更加節省試劑，同時適用于痕量檢測。

【技術實現步驟摘要】
一種免疫印跡薄膜及其制備方法
本專利技術屬于蛋白質分析領域，更具體地，涉及一種免疫印跡薄膜及其制備方法與應用。
技術介紹
免疫印跡(WesternBlot)技術是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測的技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。結合化學發光檢測，可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。由于免疫印跡具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡技術所用的薄膜為硝酸纖維素膜、尼龍膜或聚偏氟乙烯膜，形狀為條狀(《抗體技術實驗指南》，科學出版社，2002.9)。該薄膜僅能進行單個待測樣本的單次檢測，若需進行多個待測樣本的平行檢測，則需將該多個蛋白樣本轉移到不同的薄膜上后，針對不同的薄膜單獨進行孵育，同時進行振蕩以加快反應速度。因此使用該薄膜具有以下缺點：一、在進行平行檢測時，反應效率低下；二、由于免疫印跡薄膜需要浸泡在待測樣本溶液中，所需的樣本量大，耗費試劑，且難以進行痕量檢測；三、薄膜需要進行干燥后顯色拍照，再進行分析，從而無法實現原位檢測；四、由于薄膜通常浸泡在不同窗口或反應槽中，不同薄膜的反應條件略有差異，從而影響免疫印跡的準確性。以上缺點也間接導致了應用該薄膜進行免疫印跡的自動檢測儀器的結構較為復雜，生產成本較高。
技術實現思路
針對現有技術的以上缺陷或改進需求，本專利技術提供了一種免疫印跡薄膜及其制備方法，其目的在于將薄膜表面劃分為多個親水區域，從而實現多個蛋白樣本的平行檢測。為實現上述目的，按照本專利技術的一個方面，提供了一種免疫印跡薄膜，所述免疫印跡薄膜表面具有以疏水區域間隔的多個平行的條狀親水區域，所述條狀親水區域具有一個或多個結合區，所述結合區上具有目標抗原，用于結合免疫印跡的目標抗體。優選地，所述條狀親水區域具有多個結合區，所述多個結合區包括實驗區以及對照區。作為進一步優選地，所述對照區包括陽性對照區、陰性對照區或結合物對照區。優選地，所述條狀親水區域的材料為硝酸纖維素、尼龍或聚偏氟乙烯。優選地，所述疏水區域具有硅烷基。作為進一步優選地，所述疏水區域的材料為聚二甲基硅氧烷或其衍生物。優選地，所述條狀親水區域以及疏水區域的寬度為1mm～5mm。優選地，所述免疫印跡薄膜沿條狀親水區域的方向繞制為卷軸結構。作為進一步優選地，所述卷軸結構的直徑為2cm～6cm。作為進一步優選地，所述卷軸結構繞制于支撐軸上。作為更進一步優選地，所述支撐軸為圓柱狀或圓筒狀。按照本專利技術的另一方面，還提供了一種上述免疫印跡薄膜的制備方法，包括：在襯底膜上結合目標抗原，以形成與目標抗原的數量相同的結合帶，所述襯底膜的材料為硝酸纖維素、尼龍或聚偏氟乙烯；用疏水涂料在襯底膜上形成疏水區域，以將襯底膜分隔為多個條狀親水區域，同時將結合帶分隔為結合區，使得每個條狀親水區域都具有與目標抗原的數量相同的結合區。按照本專利技術的另一方面，還提供了一種上述免疫印跡薄膜的制備方法，包括：將多個條狀親水薄膜平行貼制于疏水薄膜上，使得所述疏水薄膜上具有與多個條狀親水薄膜形成的多個平行的條狀親水區域，所述條狀親水區域以疏水區域相間隔。優選地，所述疏水薄膜表面具有與條狀親水薄膜相配合的凹槽，所述凹槽用于固定條狀親水薄膜。總體而言，通過本專利技術所構思的以上技術方案與現有技術相比，由于通過疏水區域，將免疫印跡薄膜分隔為多個平行的條狀親水區域，能夠取得下列有益效果：1、在同一張免疫印跡薄膜上，可以檢測多個目標抗體的樣本，從而提高了平行檢測的反應效率；2、免疫印跡薄膜具有以疏水區域間隔的多個平行的條狀親水區域，通過親水區域的吸附力與目標抗體結合，從而更加節省試劑，同時適用于痕量檢測；3、免疫印跡薄膜由于通過親水區域的吸附力與目標抗體結合，從而使得所需的溶液量較少，簡化了檢測步驟，更適用于原位檢測；4、多個目標抗體的樣本結合于同一張免疫印跡薄膜上，從而更適于在完全相同的條件下進行反應，更容易進行平行對照，提高了檢測的準確率。附圖說明圖1為本專利技術實施例1俯視圖；圖2為本專利技術實施例1制作過程示意圖；圖3為本專利技術實施例2制作過程示意圖；圖4為本專利技術實施例3制作過程示意圖；圖5為本專利技術實施例4結構示意圖；在所有附圖中，相同的附圖標記用來表示相同的元件或結構，其中：1-免疫印跡薄膜，11-疏水區域，12-親水區域，13-結合區，2-支撐軸。具體實施方式為了使本專利技術的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合附圖及實施例，對本專利技術進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本專利技術，并不用于限定本專利技術。此外，下面所描述的本專利技術各個實施方式中所涉及到的技術特征只要彼此之間未構成沖突就可以相互組合。本專利技術提供了一種免疫印跡薄膜1，所述免疫印跡薄膜1表面具有以疏水區域11間隔的多個條狀親水區域12，所述條狀親水區域12的材料為硝酸纖維素、尼龍或聚偏氟乙烯，以便結合目標抗原，所述疏水區域11通常為具有硅烷基的有機疏水聚合物，同時還可能攜帶有硅氧基或硅羥基，如聚二甲基硅氧烷或其衍生物；所述條狀親水區域12沿其長度方向具有一個或多個結合區13，所述結合區13上具有目標抗原，所述目標抗原用于與免疫印跡的目標蛋白結合；當所述條狀親水區域12包括多個結合區13時，結合區13可分為實驗區以及對照區，實驗區用于與目標蛋白結合，而對照區根據其功能，可分為陽性對照區、陰性對照區或結合物對照區；其中，陽性對照區通常含有能與待測溶液中除目標抗體以外的其它成分結合的抗原，例如，當以血液為待測溶液時，陽性對照區的目標抗原則可采用血清抗體，陽性對照區顯色證明免疫印跡薄膜1未變質，且待測溶液種類無誤；而陰性對照區可涂覆有未標記的二抗，使得在標準條件下陰性對照區無法顯色，若其顯色，證實可能有免疫印跡薄膜1變質等異常情況，應該更換免疫印跡薄膜1而重新測定；而結合物對照區的目標抗原為IgG結合物、IgM結合物或IgA結合物，由于IgG、IgM和IgA為常見的免疫球蛋白，結合物對照區的存在可指示目標抗體是否已經成功結合。所述條狀親水區域12以及疏水區域11的寬度通常為1mm～5mm，在便于做免疫印跡測試的同時，可保證各條狀親水區域12完全間隔，同時有效利用免疫印跡薄膜1的空間。為了便于儲存和使用，所述免疫印跡薄膜1可沿條狀親水區域的方向圍繞圓柱狀或圓筒狀的支撐軸2繞制為直徑為2cm～6cm的卷軸結構，如圖5所示。該免疫印跡薄膜1的制備方法大致分為兩種：第一種：在襯底膜上結合目標抗原，以形成與目標抗原的數量相同的結合帶，所述襯底膜的材料為硝酸纖維素、尼龍或聚偏氟乙烯；用疏水涂料在襯底膜上形成疏水區域11，以將襯底膜分隔為多個條狀親水區域12，同時將結合帶與結合帶對應的結合區13，使得每個條狀親水區域12都具有與目標抗原的數量相同的結合區13；該疏水涂料需要無毒，且在37度以下即可干燥，以免影響目標抗原的活性，如專利文件CN201380057250中的疏水涂層。第二種：將多個條狀親水薄膜平行貼制于疏水薄膜上，使得所述疏水薄膜上具有與多個條狀親水薄膜形成的條狀親水區域12，所述條狀親水區域12以疏水區域11相間隔；所述疏水薄膜表面可以設置有與條狀親水薄膜相配合的凹槽，以于與條狀親水薄膜結合并固定，使得條狀親水區本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種免疫印跡薄膜(1)，其特征在于，所述免疫印跡薄膜(1)表面具有以疏水區域(11)間隔的多個平行的條狀親水區域(12)，所述條狀親水區域(12)具有一個或多個結合區(13)。

【技術特征摘要】
1.一種免疫印跡薄膜(1)，其特征在于，所述免疫印跡薄膜(1)表面具有以疏水區域(11)間隔的多個平行的條狀親水區域(12)，所述條狀親水區域(12)具有一個或多個結合區(13)。2.如權利要求1所述的免疫印跡薄膜(1)，其特征在于，所述疏水區域(11)具有硅烷基。3.如權利要求1所述的免疫印跡薄膜(1)，其特征在于，所述條狀親水區域(12)以及疏水區域(11)的寬度為1mm～5mm。4.如權利要求1-3中任意一項所述的免疫印跡薄膜(1)，其特征在于，所述免疫印跡薄膜(1)沿條狀親水區域(12)的方向繞制為卷軸結構。5.如權利要求4所述的免疫印跡薄膜(1)，其特征在于，所述卷軸結構繞制于支撐軸(2)上。6.一種制備如權利要求1-5中任意一項所述...

【專利技術屬性】
技術研發人員：黃世海，
申請(專利權)人：武漢優視科技有限公司，
類型：發明
國別省市：湖北,42