一種跌打丸質量標準檢測方法技術

本發明專利技術提供了一種跌打丸質量標準檢測方法，屬于中藥技術領域，包括如下步驟：(1)對照品溶液的制備；(2)供試品溶液的制備；(3)陰性樣品溶液的制備；(4)分別精密吸取供試樣品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液注入高效液相色譜儀進行測定，即得。采用本發明專利技術的方法，能夠提高血竭素在鹽酸中的穩定性，跌打丸中血竭素含量被充分提取，避免血竭素含量合格率低，提高檢測方法的準確性與穩定性。

【技術實現步驟摘要】
一種跌打丸質量標準檢測方法
本專利技術涉及屬于中藥
，具體是一種跌打丸質量標準檢測方法。
技術介紹
跌打丸是骨傷科常用的中成藥，由三七、紅花、血竭、骨碎補、乳香、沒藥、甘草等24種中藥研制而成，具有活血散淤、消腫止血之功效，主治跌打損傷、瘀血腫痛、閃腰岔氣等癥，一般多用于內服。跌打丸為天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂制藥廠生產的藥品，其質量標準收載于《中華人民共和國藥典》2015版一部。現跌打丸質量標準中血竭素含量測定的方法為高效液相色譜法，該方法采用3％磷酸甲醇25mL加熱回流提取30min，經過方法學考察與驗證后，發現此方法對跌打丸中血竭素含量提取不充分，并且血竭素在磷酸中穩定性差，從而導致跌打丸的血竭素含量合格率低。本專利技術重新研究了跌打丸質量標準檢測方法，能夠提高檢測方法的準確度和穩定性，為跌打丸的質量標準檢測提供了新的思路。
技術實現思路
有鑒于此，本專利技術旨在提供一種跌打丸質量標準檢測方法。為達到上述目的，本專利技術的技術方案是這樣實現的：一種跌打丸質量標準檢測方法，包括如下步驟：(1)對照品溶液的制備：取血竭素高氯酸鹽對照品，精密稱定，加3％鹽酸甲醇制成每1mL含血竭素高氯酸鹽20μg的溶液，相當于血竭素14.52μg，即得；(2)供試品溶液的制備：取樣品適量，剪碎，取2g，精密稱定，精密加入3％鹽酸甲醇溶液50mL，密塞，稱定重量，加熱回流15min，放冷，再稱定重量，用3％鹽酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，離心，上清液用0.45μm微孔濾膜濾過，續濾液，即得；(3)陰性樣品溶液的制備：按處方稱取血竭素的各味藥材，按處方工藝制得樣品，再按照所述步驟(2)供試樣品溶液的制備方法，制得陰性樣品溶液；(4)分別精密吸取供試樣品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液注入高效液相色譜儀進行測定，即得。進一步地，所述步驟(4)的色譜條件如下：色譜柱：GLInertsilODS-3，250mm×4.6mm，5μm；流動相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液，兩者體積比為49：51；柱溫：35℃；流速：0.8mL/min；檢測波長：440nm；理論板數按血竭素峰計算應不低于4000。進一步地，所述步驟(2)中的樣品為小蜜丸或大蜜丸。進一步地，所述小蜜丸每10丸重2g；所述大蜜丸每丸重3g。進一步地，所述步驟(4)中注入高效液相色譜的溶液為10μL。進一步地，所述樣品含血竭以血竭素計，小蜜丸每1g不得少于0.10mg，大蜜丸每丸不得少于0.30mg。相對于現有技術，本專利技術具有以下優勢：(1)采用本專利技術的方法，能夠提高血竭素在鹽酸中的穩定性，跌打丸中血竭素含量被充分提取，避免血竭素含量合格率低，提高檢測方法的準確性與穩定性。(2)采用本專利技術的方法，有效排除了其他雜質的干擾，穩定性好、精密度高、重現性好、便捷且易于掌握，檢測起來更加方便、快捷。附圖說明圖1為對照品色譜圖(GLInertsil)。圖2為供試品色譜圖(GLInertsil)。圖3為陰性色譜圖(GLInertsil)。圖4為血竭素標準曲線。圖5為對照品色譜圖(迪馬柱)。圖6為供試品色譜圖(迪馬柱)。圖7為對照品色譜圖(菲羅門柱)。圖8為供試品色譜圖(菲羅門柱)。具體實施方式方法學考察1.1儀器和試劑儀器：島津LC-20AD高效液相色譜儀。試劑：乙腈(色譜純，Fish公司)，甲醇(色譜純，Fish公司)，鹽酸(分析純，天津科密歐化學試劑科貿公司，純度35-37％)，磷酸二氫鈉(色譜純，天津市科密歐化學試劑有限公司)，水為純化水。對照品：血竭素高氯酸鹽(中國食品藥品檢定研究院購置，批號：110811-201506，供含量測定用，純度為98.6％)，跌打丸：天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂制藥廠(批號：4510031、4510033、4510038、4510039、4510040、4510043、4510044、4510046、4518001、4518002、4518003)。1.2色譜條件色譜柱：GLInertsilODS-3，250mm×4.6mm，5μm；流動相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液，兩者體積比為49：51；柱溫：35℃；流速：0.8mL/min；檢測波長：440nm；理論板數按血竭素峰計算應不低于4000。1.3提取溶劑的選擇取同一批號(4510046)樣品適量，剪碎，取2g，精密稱定，分別精密加入3％磷酸甲醇溶液25mL和3％鹽酸甲醇溶液25mL，密塞，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，分別補足減失的重量，搖勻，離心，上清液用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，分別在0h、4h、8h、12h、18h、24h進樣，峰面積見表1。表1提取溶劑的考察結果表明，用鹽酸甲醇做提取溶劑時血竭素含量高于用磷酸甲醇作為提取溶劑，并且用磷酸作為提取溶劑時，日間穩定性差，RSD超過了規定范圍3％，而鹽酸甲醇的RSD則合格，日間穩定性好，故把提取溶劑改為3％鹽酸甲醇進行下一步考察。1.4提取方法的考察與確定1.4.1提取方式與提取時間的考察取同一批號(4510046)樣品適量，剪碎，取2g，精密稱定，精密加入3％鹽酸甲醇溶液25mL，密塞，稱定重量，分別采用加熱回流法、超聲波法與震蕩法三種提取方式，時間分別為15min、30min、45min、60min，放冷，再稱定重量，用3％鹽酸甲醇補足減失的重量，搖勻，離心，上清液用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，測定樣品中的血竭素含量，結果見表2。表2血竭素提取方法與時間的比較結果表明，加熱回流法提取15min時血竭素含量最高，隨著加熱時間增加，血竭素含量逐漸降低，由此可推斷出，血竭素對熱不穩定，加熱時間過長會破壞血竭素含量，故選擇采用加熱回流法提取15min的方式進行提取。1.4.2提取溶劑濃度的考察對照品溶液的制備：取血竭素高氯酸鹽對照品適量，精密稱定，分別加入0.5％、1％、3％、6％、9％的鹽酸甲醇溶液配制成每1mL含血竭素高氯酸鹽20μg的溶液(相當于血竭素14.52μg)，即得。供試品溶液的制備：取同一批號(4510046)樣品適量，剪碎，取2g，精密稱定，分別精密加入0.5％、1％、3％、6％、9％鹽酸甲醇溶液25mL，密塞，稱定重量，采用加熱回流提取方式，時間為15min，放冷，再稱定重量，分別用0.5％、1％、3％、6％、9％鹽酸甲醇補足減失的重量，搖勻，離心，上清液用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，進行測定，分別用相對應濃度的鹽酸甲醇對照品和樣品計算血竭素含量，結果見表3。表3提取溶劑濃度的比較結果表明，提取溶劑濃度為3％時，血竭素含量最高，隨著溶劑濃度增加，血竭素含量逐漸減小，由此可推斷出，高濃度的鹽酸甲醇對血竭素有破壞性，因此提取溶劑濃度確定為3％。1.4.3提取溶劑用量的考察取同一批號(4510046)樣品適量，剪碎，取2g，精密稱定，分別精密加入3％鹽酸甲醇溶液15mL、25mL、50mL、75mL，密塞，稱定重量，加熱回流15min，放冷，再稱定重量，用3％鹽酸甲醇補足減失的重量，搖勻，離心，上清液用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，測定樣品中血竭素含量，結果見表4。表4提取溶劑用量的比較結果表明，隨著溶劑用量逐漸增大，含量也逐漸增大提，取越充分，本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種跌打丸質量標準檢測方法，其特征在于：包括如下步驟：(1)對照品溶液的制備：取血竭素高氯酸鹽對照品，精密稱定，加3％鹽酸甲醇制成每1mL含血竭素高氯酸鹽20μg的溶液，相當于血竭素14.52μg，即得；(2)供試品溶液的制備：取樣品適量，剪碎，取2g，精密稱定，精密加入3％鹽酸甲醇溶液50mL，密塞，稱定重量，加熱回流15min，放冷，再稱定重量，用3％鹽酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，離心，上清液用0.45μm微孔濾膜濾過，續濾液，即得；(3)陰性樣品溶液的制備：按處方稱取血竭素的各味藥材，按處方工藝制得樣品，再按照所述步驟(2)供試樣品溶液的制備方法，制得陰性樣品溶液；(4)分別精密吸取供試樣品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液注入高效液相色譜儀進行測定，即得。

【技術特征摘要】
1.一種跌打丸質量標準檢測方法，其特征在于：包括如下步驟：(1)對照品溶液的制備：取血竭素高氯酸鹽對照品，精密稱定，加3％鹽酸甲醇制成每1mL含血竭素高氯酸鹽20μg的溶液，相當于血竭素14.52μg，即得；(2)供試品溶液的制備：取樣品適量，剪碎，取2g，精密稱定，精密加入3％鹽酸甲醇溶液50mL，密塞，稱定重量，加熱回流15min，放冷，再稱定重量，用3％鹽酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，離心，上清液用0.45μm微孔濾膜濾過，續濾液，即得；(3)陰性樣品溶液的制備：按處方稱取血竭素的各味藥材，按處方工藝制得樣品，再按照所述步驟(2)供試樣品溶液的制備方法，制得陰性樣品溶液；(4)分別精密吸取供試樣品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液注入高效液相色譜儀進行測定，即得。2.根據權利要求1所述的跌打丸質量標準檢測方法，其特征在于：所述...

【專利技術屬性】
技術研發人員：江永萍，袁婷婷，商丹丹，曲磊，孟亞飛，宋立平，
申請(專利權)人：天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂制藥廠，
類型：發明
國別省市：天津,12