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    一種分離、純化及提取脂肪間充質干細胞的方法技術

    技術編號:1711172 閱讀:265 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
    本發明專利技術涉及生物細胞提取及應用領域,提供一種分離、純化及提取脂肪間充質干細胞的方法,包括以下步驟:首先無菌條件下脂肪源抽取,然后通過緩沖液浸泡、沖洗,再采用營養液水浴振蕩消化,所得消化物過篩后取過濾液進行離心處理,獲其基質微管層,沉淀部分除去紅細胞,然后再離心處理后用營養液離心洗滌,將消化分離出的細胞用生理鹽水稀釋;接著將電泳槽用尼龍篩布均勻橫向分為三格,按一定體積比置入氯化鉀及葡萄糖酸鈣溶液,交流電持續輸入2~5分鐘,然后將上述所得細胞溶液置入中間格電泳槽攪勻,直流電電泳15~30分鐘,抽取正電極側電泳槽內細胞液,即得脂肪間充質干細胞。該方法周期短,不會造成DNA雙旋鏈上的基因排序紊亂或突變。

    【技術實現步驟摘要】

    【技術保護點】
    一種分離、純化及提取脂肪間充質干細胞的方法,其特征在于,主要包括以下步驟:    a、脂肪源抽取、分離、純化    無菌條件下脂肪源抽取,然后通過緩沖液浸泡、沖洗,再采用營養液水浴振蕩消化,所得消化物過篩后取過濾液進行離心處理,獲其基質微管層,沉淀部分除去紅細胞,然后再離心處理后用營養液離心洗滌,將消化分離出的細胞用生理鹽水稀釋;    b、間充質干細胞電泳、提取    將電泳槽用尼龍篩布均勻橫向分為三格,按一定體積比置入氯化鉀及葡萄糖酸鈣溶液,交流電持續輸入2~5分鐘,然后將上述所得細胞溶液置入中間格電泳槽攪勻,直流電電泳15~30分鐘,抽取正電極側電泳槽內細胞液,即得脂肪間充質干細胞。

    【技術特征摘要】

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:劉岱良
    申請(專利權)人:劉岱良
    類型:發明
    國別省市:31[中國|上海]

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