藻紅膽素熒光蛋白的制備方法技術

本發明專利技術涉及藻紅膽素熒光蛋白的制備方法，包括以下步驟：１）將ａｐｏ－ＣＰＣ的基因或ａｐｏ－ＡＰＣ的基因克隆于表達載體中；２）將重組的表達載體轉入到大腸桿菌中，挑取單克隆，得到大腸桿菌工程菌；３）表達此工程菌，將所得的工程菌于磷酸緩沖液中破碎、離心，透析，得到ａｐｏ－ＣＰＣ或ａｐｏ－ＡＰＣ溶液；４）將ＰＥＢ的二甲亞砜溶液按ＰＥＢ與ａｐｏ－ＣＰＣ或ａｐｏ－ＡＰＣ摩爾比１∶１地加入到ａｐｏ－ＣＰＣ或ａｐｏ－ＡＰＣ溶液中；５）提純ＰＥＢ－ＣＰＣ或ＰＥＢ－ＡＰＣ粗產物，即得。本發明專利技術有利于實現工業化生產，具有更大的開發價值，為藻膽蛋白類色素蛋白質熒光材料應用于食品、醫學、化妝品、生物材料等領域奠定了基礎。

【技術實現步驟摘要】

【技術保護點】
藻紅膽素熒光蛋白的制備方法，其特征在于包括有以下步驟：　　　　１）采用基因工程方法，將ａｐｏ－ＣＰＣ的基因：ｃｐｃＡ、ｃｐｃＢ或ａｐｏ－ＡＰＣ的基因：ａｐｃＡ分別克隆于表達載體中；　　　　２）將此重組的表達載體分別轉入到大腸桿菌中，挑取單克隆，從而得到相應的能表達ａｐｏ－ＣＰＣ或ａｐｏ－ＡＰＣ的大腸桿菌工程菌；　　　　３）通過發酵工程按需要大量培養此大腸桿菌工程菌，將所得的大腸桿菌工程菌于磷酸緩沖液中破碎、離心，所得上清液對ｐＨ７．５磷酸緩沖液透析，得到ａｐｏ－ＣＰＣ或ａｐｏ－ＡＰＣ溶液；　　　　４）將ＰＥＢ的二甲亞砜溶液按ＰＥＢ與ａｐｏ－ＣＰＣ或ａｐｏ－ＡＰＣ溶液摩爾比為１∶１地加入到步驟３）得到的ａｐｏ－ＣＰＣ或ａｐｏ－ＡＰＣ溶液中，在反應溫度２０～４０℃，ｐＨ７．５～８．５條件下反應，得到ＰＥＢ－ＣＰＣ或ＰＥＢ－ＡＰＣ粗產物；　　　　５）采用生物工程提純技術提純ＰＥＢ－ＣＰＣ或ＰＥＢ－ＡＰＣ粗產物，即得到高熒光的ＰＥＢ－ＣＰＣ或ＰＥＢ－ＡＰＣ。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：周巍，
申請(專利權)人：周巍，
類型：發明
國別省市：83[]