牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法技術

本發明專利技術涉及醫學檢驗技術領域，尤其涉及一種牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法。包括如下步驟：A牛血采集；B牛血處理；C牛血中五種金屬元素本底值檢測；D牛血標準物質配制；E分裝。本發明專利技術通過在準確測定采集牛血中鈣、鎂、銅、鐵、鋅的含量的基礎上，結合臨床檢測人血樣品中該五種元素的含量范圍，配制兩個濃度的牛血基質二級標準物質。使用該五種元素的一級純溶液標準物質配制標準曲線，通過原子吸收光譜法和ICP?MS方法檢測牛血中元素含量；并對其進行均勻性，穩定性的考察，在多家實驗室獨立開展定值試驗，得到牛血中五種金屬元素的標準物質的定值結果。

Preparation method of five kinds of metal elements in standard substances in bovine blood

【技術實現步驟摘要】
牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法
本專利技術涉及醫學檢驗
，尤其涉及一種牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法。
技術介紹
標準物質是統一量值，是準確檢測的基礎。由于水中無機元素的物理化學性質穩定，檢測方法相對成熟，費用低廉，因此水基質或酸基質中無機元素標準物質研制起步早，品種齊，研制單位較多。由于水質和酸性基質中無機元素標準物質不適用生物樣本檢測的需要，我國生物基質中無機元素標準物質不僅數量少，且組分較少，濃度范圍窄，難以適應生物樣本檢測的需要。我國全血基質中無機元素的標準物質研制相對落后，主要原因是血液成分復雜，配制工藝技術要求較高。近年來隨著人們健康意識的不斷提高，以及臨床醫學的需要，檢測人體內微量元素鋅、銅、鐵及常量元素鈣、鎂的含量成為越來越迫切的需求。為了滿足目前血液中五種元素檢測的要求，研制全血基質中五種金屬元素的標準物質。綜上可知，現有技術在實際使用上顯然存在不便與缺陷，所以有必要加以改進。
技術實現思路
針對上述的缺陷，本專利技術的目的在于提供一種牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法，通過在準確測定采集牛血中鈣、鎂、銅、鐵、鋅五種微量元素的含量的基礎上、結合臨床檢測人體血液樣品中該五種微量元素的含量范圍，配制該五種元素各兩個濃度的牛血基質二級標準物質，使用該五種元素的一級純溶液標準物質配制標準曲線、通過原子吸收光譜法和ICP-MS方法檢測牛血中鈣、鎂、銅、鐵、鋅的含量，并對其進行均勻性，穩定性的考察，在多家不同實驗室開展定值試驗，得到牛血中五種金屬元素的標準物質的定值結果。使用該標準物質用于對人體內微量元素鐵、銅、鋅及常量元素鈣、鎂的檢測，以便滿足預防醫學、臨床醫學的需要。為了實現上述目的，本專利技術提供一種牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法，包括如下步驟：A：牛血采集采集牛齡10-18個月，體重大于150Kg的健康牛的牛血，并將其分裝到若干采血桶中；所述采血桶經過采血前處理；B：牛血處理在所述采血桶中加入適量的肝素鈉抗凝劑，并充分混勻后過濾，去除牛血中的凝血塊等不溶物；然后每個采血桶各取45-55ml試樣轉入下個步驟，剩余牛血冷凍保存；保存溫度-18～-25℃；C：牛血中五種金屬元素本底值檢測所述五種金屬元素分別為鐵、鎂、鈣、鋅、銅；將B步驟所述各采血桶所取試樣分別渦旋混勻，備用；測定鐵、鎂：按下表所述的操作完成取樣、定容、稀釋然后上機檢測；測定鈣、鋅、銅：按下表所述的操作完成取樣、定容；之后靜置13～17min沉淀蛋白，混合均勻后轉移至離心管中，12000～14000rpm離心4～6min，取上清液按下表所述的操作完成稀釋，然后上機檢測；D：牛血標準物質配制選取C步驟檢測結果中與預期濃度接近的血樣；在所述選取的血樣中加入一定濃度的所述金屬元素的水溶液，磁力攪拌，混勻；E：分裝將D步驟配制好的血樣磁力攪拌，混勻，裝入包裝瓶；分裝環境溫度20-25℃，相對濕度不大于60％RH。F：所述標準物質的保存溫度為：-18～-25℃。取所述C步驟本底值檢測結果為鐵：454μg/ml，鎂：23.2μg/ml，鈣：52.1μg/ml，鋅：2.47μg/ml，銅：1.30μg/ml的血樣1250mL，加入含有鋅、銅、鎂三種金屬元素的混合水溶液250mL；然后磁力攪拌28～33min混勻；得低濃度五種金屬元素標準物質；所述混合水溶液中的鋅含量：2.78mg，銅含量：0.325mg，鎂含量：12.55mg。取所述C步驟本底值檢測結果為鐵：487μg/ml，鎂：23.7μg/ml，鈣：44.4μg/ml，鋅：3.52μg/ml，銅：0.86μg/ml的血樣1400mL，加入含有鐵、鈣、鋅、銅、鎂五種金屬元素的混合水溶液100mL；然后磁力攪拌28～33min混勻；得高濃度五種金屬元素標準物質；所述混合水溶液中的鐵含量：147.33mg，鈣含量：63.38mg，鎂含量：35.36mg，銅含量：4.6mg，鋅含量：5.5mg。步驟A中所述采血桶為2.5kg白色塑料桶；采血前，用自來水和去離子水清洗干凈，再用30％硝酸充滿，浸泡24小時，之后用去離子水清洗5～6次，晾干備用。所述肝素鈉抗凝劑濃度為6.037mg/mL，每10mL牛血加入0.2mL。所述包裝瓶為2ml具螺旋帽的高密度低壓聚乙烯瓶；所述每個包裝瓶裝1ml血樣；所述高密度低壓聚乙烯瓶耐低溫、無金屬。所述低濃度五種金屬元素標準物質的特性量值為，鐵：352±28μg/ml，鎂：23.3±1.6，鈣：38.8±2.5，鋅：3.43±0.18，銅：1.02±0.07μg/ml。所述高濃度五種金屬元素標準物質的特性量值為，鐵：527±26μg/ml，鎂：41.5±2.7，鈣：83.1±2.8，鋅：6.82±0.38，銅：3.63±0.25μg/ml。所述五種金屬元素標準物質的長期穩定性有效期為24個月。所述短期穩定性有效期為7天。本專利技術的目的在于提供一種牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法，通過在準確測定采集牛血中鈣、鎂、銅、鐵、鋅五種微量元素的含量的基礎上、結合臨床檢測人體血液樣品中該五種微量元素的含量范圍，配制該五種元素各兩個濃度的牛血基質二級標準物質，使用該五種元素的一級純溶液標準物質配制標準曲線、通過原子吸收光譜法和ICP-MS方法檢測牛血中鈣、鎂、銅、鐵、鋅的含量，并對其進行均勻性，穩定性的考察，在多家不同實驗室開展定值試驗，得到牛血中五種金屬元素的標準物質的定值結果。使用該標準物質用于對人體內微量元素鐵、銅、鋅及常量元素鈣、鎂的檢測，以便滿足預防醫學、臨床醫學的需要。附圖說明圖1是本專利技術的低濃度標準物質長期穩定性測試趨勢圖；圖2是本專利技術的高濃度標準物質長期穩定性測試趨勢圖；圖3是本專利技術的低濃度標準物質短期穩定性測試趨勢圖；圖4是本專利技術的高濃度標準物質短期穩定性測試趨勢圖。具體實施方式為了使本專利技術的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例，對本專利技術進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本專利技術，并不用于限定本專利技術。本專利技術參考《JJF1342-2012標準物質研制生產機構通用技術要求》，其技術指標原則上按國家計量局頒布的《一級標準物質的審定和授權生產辦法》，并結合本專利技術的實際情況進行。本專利技術提供一種牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法，包括如下步驟：A：牛血采集采集牛齡10-18個月，體重大于150Kg的健康牛的牛血，并將其分裝到若干采血桶中；所述采血桶編號；所述采血桶經過采血前處理；B：牛血處理在所述采血桶中加入適量的肝素鈉抗凝劑，并充分混勻后過濾，去除牛血中的凝血塊等不溶物；所述肝素鈉抗凝劑濃度為6.037mg/mL，每10mL牛血加入0.2mL。然后每個采血桶各取45-55ml試樣轉入下個步驟，剩余牛血冷凍保存；保存溫度-18～-25℃；C：牛血中五種金屬元素本底值檢測所述五種金屬元素分別為鐵、鎂、鈣、鋅、銅；將B步驟所述各采血桶所取試樣分別渦旋混勻，備用；測定鐵、鎂：按表1所述的操作完成取樣、定容、稀釋然后上機檢測；測定鈣、鋅、銅：按表1所述的操作完成取樣、定容；之后靜置13～17min沉淀蛋白，混合均勻后轉移至離心管中，12000～14000rpm離心4～6min，取上清液按按表1所述的操作完成稀釋，然后本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：A：牛血采集采集牛齡10?18個月，體重大于150Kg的健康牛的牛血，并將其分裝到若干采血桶中；所述采血桶經過采血前處理；B：牛血處理在所述采血桶中加入適量的肝素鈉抗凝劑，并充分混勻后過濾，去除牛血中的凝血塊等不溶物；然后每個采血桶各取45?55ml試樣轉入下個步驟，剩余牛血冷凍保存；保存溫度?18～?25℃；C：牛血中五種金屬元素本底值檢測所述五種金屬元素分別為鐵、鎂、鈣、鋅、銅；將B步驟所述各采血桶所取試樣分別渦旋混勻，備用；測定鐵、鎂：按下表所述的操作完成取樣、定容、稀釋然后上機檢測；測定鈣、鋅、銅：按下表所述的操作完成取樣、定容；之后靜置13～17min沉淀蛋白，混合均勻后轉移至離心管中，12000～14000rpm離心4～6min，取上清液按下表所述的操作完成稀釋，然后上機檢測；

【技術特征摘要】
1.一種牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：A：牛血采集采集牛齡10-18個月，體重大于150Kg的健康牛的牛血，并將其分裝到若干采血桶中；所述采血桶經過采血前處理；B：牛血處理在所述采血桶中加入適量的肝素鈉抗凝劑，并充分混勻后過濾，去除牛血中的凝血塊等不溶物；然后每個采血桶各取45-55ml試樣轉入下個步驟，剩余牛血冷凍保存；保存溫度-18～-25℃；C：牛血中五種金屬元素本底值檢測所述五種金屬元素分別為鐵、鎂、鈣、鋅、銅；將B步驟所述各采血桶所取試樣分別渦旋混勻，備用；測定鐵、鎂：按下表所述的操作完成取樣、定容、稀釋然后上機檢測；測定鈣、鋅、銅：按下表所述的操作完成取樣、定容；之后靜置13～17min沉淀蛋白，混合均勻后轉移至離心管中，12000～14000rpm離心4～6min，取上清液按下表所述的操作完成稀釋，然后上機檢測；D：牛血標準物質配制選取C步驟檢測結果中與預期濃度接近的血樣；在所述選取的血樣中加入一定濃度的所述金屬元素的水溶液，磁力攪拌，混勻；E：分裝將D步驟配制好的血樣磁力攪拌，混勻，裝入包裝瓶；分裝環境溫度20-25℃，相對濕度不大于60％RH。F：所述標準物質的保存溫度為：-18～-25℃。2.根據權利要求1所述的牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法，其特征在于，取所述C步驟本底值檢測結果為鐵：454μg/ml，鎂：23.2μg/ml，鈣：52.1μg/ml，鋅：2.47μg/ml，銅：1.30μg/ml的血樣1250mL，加入含有鋅、銅、鎂三種金屬元素的混合水溶液250mL；然后磁力攪拌28～33min混勻；得低濃度五種金屬元素標準物質；所述混合水溶液中，鋅含量：2.78mg，銅含量：0.325mg，鎂含量：12.55mg。3.根據權利要求1所述的牛血中五種金屬元素標準物質的制備方法，其特征在于，取所述C步驟本底值檢測結果為鐵：487μg/ml，鎂：23.7μg/ml，鈣：...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉鴻君，杜克賀，楚利敏，建旭平，王倩，邵立軍，
申請(專利權)人：匯智泰康生物技術北京有限公司，
類型：發明
國別省市：北京,11