靈芝10噸罐發酵工藝制造技術

本發明專利技術涉及一種靈芝大規模液體深層發酵工藝，通過對靈芝發酵工藝的步驟、參數和培養基配方等的綜合改進，成功建立了靈芝１０噸罐發酵工藝，打破了以往靈芝發酵只限于５噸以下小規模的局限，并解決了靈芝大規模發酵產率低、質量差的問題。本發明專利技術工藝的靈芝菌絲干粉得率達到２．６－３．３％，每百克菌絲干粉的靈芝多糖含量達到６－８ｇ。（*該技術在2018年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種靈芝大規模(10噸罐)液體深層發酵工藝。靈芝是一種具有很高經濟價值的真菌，自古以來就是滋補、強身、防病、治病的珍品。現代醫學證明，靈芝的主要有效成分靈芝多糖具有增強機體免疫力和抗病能力的作用，特別是對肝炎、腫瘤等高難病癥具有獨特的療效。因此，人們越來越重視對靈芝應用的開發研究。近年來，對靈芝的應用已不限于藥用，還用于制造各種功能性保健食品。但是，靈芝的野生資源很少，難以滿足需要，工業生產上所需的靈芝主要是通過人工栽培和菌絲體發酵獲得。人工栽培占地大、周期長、成本高；菌絲體發酵具有占地少、周期短、適于工業化生產等優點。但到目前為止對靈芝工業化發酵的研究還不多，僅有一些小規模的發酵技術，而缺乏對大規模發酵技術的研究。特別是當發酵增加到一定規模時，各種參數的控制對整個發酵的質量甚至成敗起著相當重要的作用；不同規模的發酵，所需的綜合控制參數不同，如果將小規模發酵工藝直接套用于大規模發酵上，往往會出現參數控制失調，導致大量菌絲衰老或自溶，使菌絲體產量很低，而且質量差，達不到工業化生產的要求。正是由于上述原因，造成已有的靈芝發酵生產都局限于較小的規模(5噸以下)，這難以滿足市場上對靈芝日益增長的需求。本專利技術的目的是通過對靈芝發酵工藝的研究和改進，提供一種較大規模(10噸罐)的靈芝液體深層發酵工藝，使靈芝菌絲體的產量、產率和質量都得到明顯提高，從而解決已有技術所存在的上述問題。本專利技術中所說的10噸罐，是按發酵行業慣例，指發酵罐中所裝發酵液的量，而不是指發酵罐的總容量。本專利技術的靈芝10噸罐發酵工藝包括以下步驟(1).將靈芝斜面菌種分別接入10個裝有100ml搖瓶培養基的500ml搖瓶中，25-28℃培養84-108小時；(2).將每兩瓶500ml搖瓶中的菌種轉接入一個裝有1000ml搖瓶培養基的5000ml搖瓶中，25-28℃培養36-60小時。(3).將5瓶5000ml搖瓶中的菌種轉接入一個裝有50L發酵培養基的100L種子罐中，調pH至5.5-6.0，保持罐溫25-28℃，罐壓20-40kPa，攪拌速率110-140r/min，通氣量1∶0.3-0.5，發酵36-48小時；(4).將種子罐菌種轉接到一個裝有1噸發酵培養基的3噸發酵罐中，調pH至5.5-6.0，保持罐溫25-28℃，罐壓40-60kPa，攪拌速率110-130r/min，通氣量1∶0.2-0.4，發酵40-48小時；(5)將3噸罐中菌種轉接到一個裝有10噸發酵培養基的15噸發酵罐中，調pH至5.5-6.0，保持罐溫25-28℃，罐壓10-30kPa，攪拌速率150-180r/min，通氣量1∶0.5-0.8，發酵96-120小時，然后放罐，將發酵液壓濾，得濕菌絲體。將濕菌絲體烘干粉碎即成為菌絲干粉。通常放罐的標準為當發酵液變得非常粘稠，鏡檢有大量菌絲體，且多數菌絲體開始衰老，少數菌絲體發生自溶，即應放罐。本專利技術發酵工藝中所用的搖瓶培養基的成分及其配比(重量百分比)為馬鈴薯20，葡萄糖2，硫酸鎂0.02，磷酸二氫鉀0.1，維生素B10.005，其余為水。所用的發酵培養基的成分及其配比(重量百分比)為玉米粉3-5，豆餅粉1-2，葡萄糖2-5，硫酸鎂0.02-0.04，磷酸二氫鉀0.1-0.3，維生素B10.001-0.005，其余為水。本專利技術的發酵工藝適用于已有的各種靈芝菌種。本專利技術通過對靈芝發酵工藝的綜合改進，成功地建立了10噸罐大規模靈芝液體深層發酵工藝，解決了以往大規模靈芝發酵產率低、質量差的問題，從而打破了以往靈芝發酵只限于小規模(5噸以下)的局限，這對于推動靈芝發酵及靈芝應用于產業的發展具有重要的意義。本專利技術工藝一次發酵規模即達到10噸，大大提高了靈芝發酵的單位時間產量，同時，產率(單位培養基的菌絲產量)和菌絲質量均得到明顯提高，達到了2.6-3.3％的菌絲干粉得率，菌絲干粉的靈芝多糖含量達到每百克菌絲干粉6-8g，均比以往技術有顯著提高。以下通過實施例對本專利技術作進一步說明。實施例1將新鮮的斜面菌種接入十個500ml(盛有搖瓶培養基100ml)三角瓶中，27℃下在搖床上培養96小時。然后把每兩個500ml搖瓶菌種倒入一個5000ml(盛有1000ml搖瓶培養基)的三角瓶中，共得到5瓶5000ml搖瓶種，將5瓶搖瓶種于25℃下在搖床上培養48小時。然后將5瓶搖瓶種轉接入一個100L(盛有50L發酵培養基)的種子罐中，調pH至6.0，保持罐溫在26℃，罐壓為20kPa，攪拌速率為130轉/分，通氣量為1∶0.4，發酵48小時后，轉接到一個三噸發酵罐(盛有1噸發酵培養基)中，調pH至6.0，保持罐溫為28℃，罐壓為40kPa，攪拌速率為140轉/分，通氣量為1∶0.4，發酵48小時后，轉接到一個十五噸罐(盛有10噸發酵培養基)中，調pH至6.0，保持罐溫為27℃，罐壓為30kPa，攪拌速率為150轉/分，通氣量為1∶0.55，發酵100小時后，發酵液變得非常粘稠，鏡檢，發現發酵液中有大量靈芝菌絲體，且多數菌絲開始衰老，少量菌絲發生自溶。立即放罐，壓濾，得到濕菌絲體。濕菌絲體烘干后粉碎，得到菌絲干粉，其得率為2.8％。取少量菌絲干粉樣品，按照苯酚一蒽酮法測得干粉中靈芝多糖的含量為8.08g/100g靈芝干粉。實施例2將新鮮的斜面菌種接入十個500ml(盛有搖瓶培養基100ml)三角瓶中，26℃下在搖床上培養90小時。然后把每兩個500ml搖瓶菌種倒入一個5000ml(盛有1000ml搖瓶培養基)的三角瓶中，共得到5瓶5000ml搖瓶種，將5瓶搖瓶種于28℃下在搖床上培養48小時。然后將5瓶搖瓶種轉接入一個100L(盛有50L發酵培養基)的種子罐中，調pH至5.8，保持罐溫在28℃，罐壓為30kPa，攪拌速率為130轉/分，通氣量為1∶0.4，發酵45小時后，轉接到一個三噸發酵罐(盛有1噸發酵培養基)中，調pH至5.8，保持罐溫為27℃，罐壓為40kPa，攪拌速率為120轉/分，通氣量為1∶0.3，發酵40小時后，轉接到一個十五噸罐(盛有10噸發酵培養基)中，調pH至5.8，保持罐溫為28℃，罐壓為20kPa，攪拌速率為150轉/分，通氣量為1∶0.6，發酵120小時后，發酵液變得非常粘稠，鏡檢，發現發酵液中有大量靈芝菌絲體，且多數菌絲開始衰老，少量菌絲發生自溶。立即放罐，壓濾，得到濕菌絲體。濕菌絲體烘干后粉碎，得到菌絲干粉，其得率為3.09％。取少量菌絲干粉樣品，按照苯酚-蒽酮法測得干粉中靈芝多糖的含量為7.62g/100g靈芝干粉。實施例3將新鮮的斜面菌種接入十個500ml(盛有搖瓶培養基100ml)三角瓶中，28℃下在搖床上培養92小時。然后把每兩個500ml搖瓶菌種倒入一個5000ml(盛有1000ml搖瓶培養基)的三角瓶中，共得到5瓶5000ml搖瓶種，將5瓶搖瓶種于27℃下在搖床上培養45小時。然后將5瓶搖瓶種轉接入一個100L(盛有50L發酵培養基)的種子罐中，調pH至5.5，保持罐溫在27℃，罐壓為20kPa，攪拌速率為110轉/分，通氣量為1∶0.3，發酵48小時后，轉接到一個三噸發酵罐(盛有1噸發酵培養基)中，調pH至5.5，保持罐溫為28℃，罐壓為60kPa，攪拌速率為130轉/分，通氣量為1本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種靈芝１０噸罐發酵工藝，其特征是包括以下步驟：（１）．將靈芝斜面菌種分別接入１０個裝有１００ｍｌ搖瓶培養基的５００ｍｌ搖瓶中，２５－２８℃培養８４－１０８小時；（２）．將每兩瓶５００ｍｌ搖瓶中的菌種轉接入一個裝有１０００ｍｌ搖瓶培 養基的５０００ｍｌ搖瓶中，２５－２８℃培養３６－６０小時；（３）．將５瓶５０００ｍｌ搖瓶中的菌種轉接入一個裝有５０Ｌ發酵培養基的１００Ｌ種子罐中，調ｐＨ至５．５－６．０，保持罐溫２５－２８℃，罐壓２０－４０ｋＰａ，攪拌速率１１０－１４０ ｒ／ｍｉｎ，通氣量１∶０．３－０．５，發酵３６－４８小時；（４）．將種子罐菌種轉接到一個裝有１噸發酵培養基的３噸發酵罐中，調ｐＨ至５．５－６．０，保持罐溫２５－２８℃，罐壓４０－６０ｋＰａ，攪拌速率１１０－１３０ｒ／ｍｉｎ，通氣量１∶０ ．２－０．４，發酵４０－４８小時；（５）．將３噸罐中菌種轉接到一個裝有１０噸發酵培養基的１５噸發酵罐中，調ｐＨ至５．５－６．０，保持罐溫２５－２８℃，罐壓１０－３０ｋＰａ，攪拌速率１５０－１８０ｒ／ｍｉｎ，通氣量１∶０．５－０．８，發酵 ９６－１２０小時，然后放罐，將發酵液壓濾，得濕菌絲體。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：李寶健，黎泉深，李剛，
申請(專利權)人：李寶健，黎泉深，李剛，
類型：發明
國別省市：81[中國|廣州]