本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種富含天冬氨酰胺酶水溶液的生產(chǎn)工藝，它是將畜類瘦肉（或肝臟）經(jīng)四級(jí)發(fā)酵，再經(jīng)滅菌處理而得，本發(fā)明專利技術(shù)與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有工藝簡(jiǎn)單，原料及能源消耗低等優(yōu)點(diǎn)，由于采用了天然組合多菌種和酶聯(lián)合分階段連貫式發(fā)酵的獨(dú)特工藝，不需要提純菌種和酶，不需要單獨(dú)生產(chǎn)ＡＴＰ、天冬氨酰胺等多種中間產(chǎn)物，因此生產(chǎn)成本可大大降低。有利于天冬氨酰胺酶作為重要的抗癌藥物的推廣應(yīng)用。（*該技術(shù)在2015年保護(hù)過期，可自由使用*）
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種抗癌藥物的生產(chǎn)工藝，屬于微生物發(fā)酵領(lǐng)域。癌癥是本世紀(jì)威脅人類生命最嚴(yán)重的疾病之一，目前主要的治療手段還是依賴外科手續(xù)及放療、化療。這些手段雖能起到一定的療效，但其副作用極大，患者一般都愿意用藥物治療。在眾多抗癌藥物中，天冬氨酰胺酶是一種重要的抗癌藥物，由于它能分解某些腫瘤細(xì)胞繁殖所必需的天冬氨酰胺，從而抑制了這些腫瘤細(xì)胞的繁殖，但對(duì)正常細(xì)胞則無損害，對(duì)白血病、急性淋巴腫瘤有較好的療效。本專利技術(shù)的目的在于提供一種用微生物發(fā)酵的方法來生產(chǎn)富含天冬氨酰胺酶的水溶液，從而可大大降低生產(chǎn)成本，提供給人們較廉價(jià)的抗癌、防癌療效食品。本專利技術(shù)是這樣構(gòu)成的它是將畜類瘦肉(或肝臟)經(jīng)四級(jí)發(fā)酵，再經(jīng)滅菌處理而得，具體工藝如下①、一級(jí)發(fā)酵處理選畜類瘦肉(或肝臟)為原料，天然根瘤菌類菌體，滅菌大豆?jié){；將根瘤菌類菌體清洗、消毒、粉碎后，制成懸液，按1∶10的比例將懸液注入大豆?jié){培養(yǎng)液中，在PH5、30℃～40℃的條件下發(fā)酵2小時(shí)，制成一級(jí)菌種；如此再反復(fù)做兩次，制成三級(jí)菌種；將畜類瘦肉磨成肉漿，高溫高壓作滅菌及蛋白質(zhì)變性處理；然后將等量三級(jí)菌種注入到等量肉漿中，在PH5、40℃條件下發(fā)酵2小時(shí)；再將發(fā)酵物高壓加熱15分鐘，殺滅全部微生物；②、二級(jí)發(fā)酵處理制備畜、禽胃腸腺菌酶混合三級(jí)菌種(方法與制備上述三級(jí)菌種相同)；按生大豆?jié){1熟碗豆?jié){3熟天門冬漿2的比例混合制成培養(yǎng)基，傾注入一級(jí)發(fā)酵物中；將混合三級(jí)菌種按0.5∶1的比例注入肉漿一級(jí)發(fā)酵物中；按每公斤加入10毫克VB5、2毫克VB2，在PH5.8、溫度40℃條件下發(fā)酵1小時(shí)；③、三級(jí)發(fā)酵處理制備原料1/2量的生牛肉漿，倒入二級(jí)發(fā)酵物中，加入1.2％黃芪漿，在PH6，37℃條件下發(fā)酵1小時(shí)；每千克加入5毫克VB2，升溫至45℃發(fā)酵1小時(shí)；加入熟葡萄甜酒，反應(yīng)10分鐘，高壓加熱20分鐘，殺滅全部微生物；④、四級(jí)發(fā)酵處理制取0.5倍三級(jí)發(fā)酵物的葡萄糖水溶液，將畜、禽胃腸腺菌酶混合懸液按1∶10的比例倒入葡萄糖培養(yǎng)液中，加入37％黃芪漿，在PH6、37℃下發(fā)酵24小時(shí)，得到高濃度大腸桿菌；將三級(jí)發(fā)酵物與高濃度大腸桿菌混合，在PH8.5、37℃條件下發(fā)酵2小時(shí)；最后經(jīng)過過濾、殺滅大腸桿菌及酵母，即得成品。本專利技術(shù)與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有工藝簡(jiǎn)單，原料及能源消耗低等優(yōu)點(diǎn)，由于采用了天然組合多菌種和酶聯(lián)合分階段連貫式發(fā)酵的獨(dú)特工藝，不需要提純菌種和酶，不需要單獨(dú)生產(chǎn)ATP、天冬氨酰胺等多種中間產(chǎn)物，因此生產(chǎn)成本可大大降低。有利于天冬氨酰胺酶作為重要的抗癌藥物的推廣應(yīng)用。具體實(shí)施例方式菌種a.天然根瘤類菌體菌種，b.畜、禽胃腸腺分泌物，c.自制高濃度大腸桿菌；原料瘦牛肉培養(yǎng)基大豆?jié){、豌豆?jié){、天門冬漿、葡萄糖溶液；催化劑VB6、黃芪漿、VB2；①、一級(jí)發(fā)酵處理將2克根瘤菌類菌體清洗、消毒、粉碎后，制成懸液，將懸液注入到20克滅菌大豆?jié){(含水90％)培養(yǎng)液中，在PH5、30℃～40℃的條件下發(fā)酵2小時(shí)，制成一級(jí)菌種；如此再反復(fù)做兩次，制成2公斤三級(jí)菌液；將瘦牛肉磨成2公斤肉漿(含水50％)，在蒸汽壓力每平方厘米1公斤、溫度121.6℃條件下加熱20分鐘，作滅菌及蛋白質(zhì)變性處理；然后將三級(jí)菌液注入到肉漿中，在PH5、40℃條件下發(fā)酵2小時(shí)，再將發(fā)酵物在上述蒸汽壓力下加熱15分鐘，殺滅全部微生物，然后冷卻至40℃；②、二級(jí)發(fā)酵處理將2克畜、禽胃腸腺分泌物菌酶混合懸液注入20克大豆?jié){培養(yǎng)液中，在PH5、40℃條件下發(fā)酵2小時(shí)，制成一級(jí)菌種，如此再反復(fù)做兩次，制成2公斤三級(jí)菌種；將2公斤生大豆?jié){、6公斤熟豌豆?jié){、4公斤熟天門冬漿(均含水90％)制成混合培養(yǎng)基，再加入180毫克VB6，在PH5.8、40℃條件下發(fā)酵1小時(shí)；③、三級(jí)發(fā)酵處理制取1公斤生牛肉漿(含水50％)，注入二級(jí)發(fā)酵物中，加入230克黃芪漿，在PH6，37℃條件下發(fā)酵1小時(shí)，加入97毫克VB2，升溫至45℃，發(fā)酵1小時(shí)，加入970克熟葡萄甜酒，反應(yīng)10分鐘，在蒸汽壓力每平方厘米1公斤，121.6℃條件下，加熱20分鐘，殺滅全部微生物，然后冷卻至37℃；④、四級(jí)發(fā)酵處理制取10公斤葡萄糖水溶液，將1公斤畜、禽胃腸腺菌酶混合懸液注入葡萄糖培養(yǎng)液中，加入3.7公斤黃芪漿，在PH6、37℃下發(fā)酵24小時(shí)，得到高濃度大腸桿菌13.7公斤，將三級(jí)發(fā)酵物與高濃度大腸桿菌混合，在PH8.5、37℃條件下發(fā)酵2小時(shí)；將全部發(fā)酵物用多層紗布過濾，得到富含L-天冬氨酰胺酶的水溶液；將天冬氨酰胺酶的水溶液恢復(fù)至PH8.5，緩慢加熱至45℃，立即置于-10℃溫度下，殺滅大腸桿菌，用800千赫/秒超聲波處理該溶液10分鐘，殺滅酵母，冷凍保存。權(quán)利要求1.一種富含天冬氨酰胺酶水溶液的生產(chǎn)工藝，它是將畜類瘦肉(或肝臟)經(jīng)四級(jí)發(fā)酵，再經(jīng)滅菌處理而得，其特征在于①、一級(jí)發(fā)酵處理選畜類瘦肉(或肝臟)為原料，天然根瘤菌類菌體，滅菌大豆?jié){；將根瘤菌類菌體清洗、消毒、粉碎后，制成懸液，按1∶10的比例將懸液注入大豆?jié){培養(yǎng)液中，在PH5、30℃～40℃的條件下發(fā)酵2小時(shí)，制成一級(jí)菌種；如此再反復(fù)做兩次，制成三級(jí)菌種；將畜類瘦肉磨成肉漿，高溫高壓作滅菌及蛋白質(zhì)變性處理；然后將等量三級(jí)菌種注入到等量肉漿中，在PH5、40℃條件下發(fā)酵2小時(shí)；再將發(fā)酵物高溫高壓加熱15分鐘，殺滅全部微生物；②、二級(jí)發(fā)酵處理制備畜、禽胃腸腺菌酶混合三級(jí)菌種(方法與制備上述三級(jí)菌種相同)；按生大豆?jié){1熟碗豆?jié){3熟天門冬漿2的比例混合制成培養(yǎng)基，傾注入一級(jí)發(fā)酵物中；將混合三級(jí)菌種按0.5∶1的比例注入肉漿一級(jí)發(fā)酵物中；按每公斤加入10毫克VB6、2毫克VB2，在PH5.8、溫度40℃條件下發(fā)酵1小時(shí)；③、三級(jí)發(fā)酵處理制備原料1/2量的生牛肉漿，倒入二級(jí)發(fā)酵物中，加入1.2％黃芪漿，在PH6，37℃條件下發(fā)酵1小時(shí)；每千克加入5毫克VB2，升溫至45℃再發(fā)酵1小時(shí)，加入5％熟葡萄甜酒，反應(yīng)10分鐘，高壓加熱20分鐘，殺滅全部微生物；④、四級(jí)發(fā)酵處理制取0.5倍三級(jí)發(fā)酵物的葡萄糖水溶液，將畜、禽胃腸腺菌酶混合懸液按1∶10的比例倒入葡萄糖培養(yǎng)液中，加入37％黃芪漿，在PH6、37℃下發(fā)酵24小時(shí)，得到高濃度大腸桿菌；將三級(jí)發(fā)酵物與高濃度大腸桿菌混合，在PH8.5、37℃條件下發(fā)酵2小時(shí)；最后經(jīng)過過濾、殺滅大腸桿菌及酵母，即得成品。全文摘要本專利技術(shù)公開了一種富含天冬氨酰胺酶水溶液的生產(chǎn)工藝，它是將畜類瘦肉(或肝臟)經(jīng)四級(jí)發(fā)酵，再經(jīng)滅菌處理而得，本專利技術(shù)與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有工藝簡(jiǎn)單，原料及能源消耗低等優(yōu)點(diǎn)，由于采用了天然組合多菌種和酶聯(lián)合分階段連貫式發(fā)酵的獨(dú)特工藝，不需要提純菌種和酶，不需要單獨(dú)生產(chǎn)ATP、天冬氨酰胺等多種中間產(chǎn)物，因此生產(chǎn)成本可大大降低。有利于天冬氨酰胺酶作為重要的抗癌藥物的推廣應(yīng)用。文檔編號(hào)A61K38/46GK1137064SQ95116140公開日1996年12月4日 申請(qǐng)日期1995年10月20日 優(yōu)先權(quán)日1995年10月20日專利技術(shù)者傅責(zé)中 申請(qǐng)人:傅責(zé)中本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種富含天冬氨酰胺酶水溶液的生產(chǎn)工藝，它是將畜類瘦肉（或肝臟）經(jīng)四級(jí)發(fā)酵，再經(jīng)滅菌處理而得，其特征在于：①、一級(jí)發(fā)酵處理：選畜類瘦肉（或肝臟）為原料，天然根瘤菌類菌體，滅菌大豆?jié){；將根瘤菌類菌體清洗、消毒、粉碎后，制成懸液，按１∶１ ０的比例將懸液注入大豆?jié){培養(yǎng)液中，在ＰＨ５、３０℃～４０℃的條件下發(fā)酵２小時(shí)，制成一級(jí)菌種；如此再反復(fù)做兩次，制成三級(jí)菌種；將畜類瘦肉磨成肉漿，高溫高壓作滅菌及蛋白質(zhì)變性處理；然后將等量三級(jí)菌種注入到等量肉漿中，在ＰＨ５、４０℃條件下發(fā) 酵２小時(shí)；再將發(fā)酵物高溫高壓加熱１５分鐘，殺滅全部微生物；②、二級(jí)發(fā)酵處理：制備畜、禽胃腸腺菌酶混合三級(jí)菌種（方法與制備上述三級(jí)菌種相同）；按生大豆?jié){１∶熟碗豆?jié){３∶熟天門冬漿２的比例混合制成培養(yǎng)基，傾注入一級(jí)發(fā)酵物中；將混合三 級(jí)菌種按０．５∶１的比例注入肉漿一級(jí)發(fā)酵物中；按每公斤加入１０毫克ＶＢ６、２毫克ＶＢ２，在ＰＨ５．８、溫度４０℃條件下發(fā)酵１小時(shí)；③、三級(jí)發(fā)酵處理：制備原料１／２量的生牛肉漿，倒入二級(jí)發(fā)酵物中，加入１．２％黃芪漿，在ＰＨ６，３７℃條 件下發(fā)酵１小時(shí)；每千克加入５毫克ＶＢ２，升溫至４５℃再發(fā)酵１小時(shí)，加入５％熟葡萄甜酒，反應(yīng)１０分鐘，高壓加熱２０分鐘，殺滅全部微生物；④、四級(jí)發(fā)酵處理：制取０．５倍三級(jí)發(fā)酵物的葡萄糖水溶液，將畜、禽胃腸腺菌酶混合懸液按１∶１０的比例 倒入葡萄糖培養(yǎng)液中，加入３７％黃芪漿，在ＰＨ６、３７℃下發(fā)酵２４小時(shí)，得到高濃度大腸桿菌；將三級(jí)發(fā)酵物與高濃度大腸桿菌混合，在ＰＨ８．５、３７℃條件下發(fā)酵２小時(shí)；最后經(jīng)過過濾、殺滅大腸桿菌及酵母，即得成品。...
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：傅責(zé)中，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：傅責(zé)中，
類型：發(fā)明
國別省市：52[中國|貴州]
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