結(jié)合藻紅膽素的藻藍蛋白熒光探針的制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種結(jié)合藻紅膽素的藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)的制備方法，通過應(yīng)用藻膽蛋白ｂｅｔａ裂合酶催化藻紅膽素與藻藍蛋白類脫輔基蛋白共價結(jié)合，制備結(jié)合藻紅膽素的藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)；本發(fā)明專利技術(shù)的方法應(yīng)用生物過程生產(chǎn)新型的藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)，是一種環(huán)境友好的生產(chǎn)方法；藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)能應(yīng)用于食品、保健與醫(yī)藥功能材料領(lǐng)域，特別是應(yīng)用為生物和醫(yī)學(xué)分子監(jiān)測領(lǐng)域的熒光探針。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

【技術(shù)保護點】
一種結(jié)合藻紅膽素的藻藍蛋白熒光探針的制備方法，其特征在于包括下述步驟：?。ǎ保┯没蚬こ谭椒?，將ｂｅｔａ裂合酶基因或其同源基因克隆于表達載體中，得到ｂｅｔａ裂合酶表達質(zhì)粒；?。ǎ玻┯没蚬こ谭椒▽⒃逅{蛋白類脫輔基蛋白基因或其同源 基因克隆于第二個表達載體中，得到脫輔基蛋白表達質(zhì)粒；　（３）用基因工程方法將藻紅膽素生物合成酶基因ｈｏｌ和ｐｅｂＢ或其同源基因克隆于第三個表達載體中，得到ｈｏｌ和ｐｅｂＢ表達質(zhì)粒；?。ǎ矗┯没蚬こ谭椒▽⒃寮t膽素生物合成酶基因ｐ ｅｂＡ或其同源基因克隆于第四個表達載體中，得到ｐｅｂＡ表達質(zhì)粒；　（５）將ｂｅｔａ裂合酶表達質(zhì)粒、脫輔基蛋白表達質(zhì)粒、ｈｏｌ和ｐｅｂＢ表達質(zhì)粒及ｐｅｂＡ表達質(zhì)粒依次轉(zhuǎn)入配套的宿主菌，當(dāng)這些表達質(zhì)粒都轉(zhuǎn)入宿主菌后，得到相應(yīng)的工程菌，應(yīng)用 此工程菌通過發(fā)酵工程能生產(chǎn)結(jié)合藻紅膽素的藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)；發(fā)酵后，按常規(guī)蛋白質(zhì)提純技術(shù)，提純得到相應(yīng)的結(jié)合藻紅膽素的藻藍蛋白類熒光蛋白質(zhì)。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：伍賢軍，夏坤，趙開弘，周明，
申請(專利權(quán))人：廣州天寶頌原生物科技開發(fā)有限公司，華中科技大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：81[中國|廣州]