用于核酸檢測和定量的同組異序引物延伸法及試劑盒制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種用同組異序引物延伸法檢測和／或定量樣品中存在的靶ＤＮＡ或ＲＮＡ的方法。本方法包括于不存在某一游離核苷酸時進行引物延伸反應(yīng)，從而當(dāng)不存在的該核苷酸要被插入時，引物延伸反應(yīng)被終止。所以，檢測引物延伸產(chǎn)物中標記的核苷酸摻入的量，就可確定樣品中靶ＲＮＡ或ＤＮＡ的量。（*該技術(shù)在2021年保護過期，可自由使用*）

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

【技術(shù)保護點】
一種檢測或定量樣品中的靶核酸的方法，其特征在于，所述方法包括：　　　　（ａ）制備至少一種與靶核酸上的預(yù)定位點特異性配對的引物，其中，所述靶核酸是非酶促合成的；　　　?。ǎ猓⑺龅模ǎ幔┑闹辽僖环N引物與靶核酸退火，在該靶核酸的預(yù)定位點上獲得引物－靶核酸雙鏈體；　　　?。ǎ悖ⅲǎ猓┇@得的引物－靶核酸雙鏈體與非終止子核苷酸混合物混合，其中，該非終止子核苷酸混合物中缺少至少一種選自Ａ、Ｔ、Ｇ或Ｃ的非終止子核苷酸，且至少有一種未缺少的非終止子核苷酸被可檢測的標記物標記；　　　　（ｄ）在核酸的緩沖液中采用酶或化學(xué)反應(yīng)進行同組異序引物延伸反應(yīng)，其中，所述引物延伸在與（ｃ）的核苷酸混合物中缺少的非終止子核苷酸互補的靶核酸核苷酸處停止；和　　　　（ｅ）檢測或定量同組異序引物延伸產(chǎn)物的標記信號的量。

【技術(shù)特征摘要】
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【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王小兵，
申請(專利權(quán))人：王小兵，森澤紳勝，
類型：發(fā)明
國別省市：US[美國]