一種新的多肽——人甲硫基腺苷磷酸化酶37和編碼這種多肽的多核苷酸制造技術

本發(fā)明專利技術公開了一種新的多肽－人甲硫基腺苷磷酸化酶３７，編碼此多肽的多核苷酸和經ＤＮＡ重組技術產生這種多肽的方法。本發(fā)明專利技術還公開了此多肽用于治療多種疾病的方法，如多種腫瘤，嘌呤代謝缺陷病，發(fā)育紊亂癥，炎癥，免疫性疾病，ＨＩＶ感染等。本發(fā)明專利技術還公開了抗此多肽的拮抗劑及其治療作用。本發(fā)明專利技術還公開了編碼這種新的人甲硫基腺苷磷酸化酶３７的多核苷酸的用途。（*該技術在2020年保護過期，可自由使用*）

【技術實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術屬于生物
，具體地說，本專利技術描述了一種新的多肽--人甲硫基腺苷磷酸化酶37，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本專利技術還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。許多人類惡性腫瘤細胞缺少甲硫基腺苷磷酸化酶(MTAP)活性。由于沒有找到適合于MTAP基因的探針，我們使用從PFGE和細胞系中獲得的信息來為MTAP進行定位，發(fā)現(xiàn)編碼這種酶的基因位于人類染色體9的短臂端的p21-22位置上(Diaz，M.O.，Rubin，C.M.，Harden，A.et al.，1990；Olopade，O.I.，Bohlander，S.K.et al.，1992)。并且發(fā)現(xiàn)在腫瘤生長的倍增期，染色體上的這個區(qū)域頻繁地被刪除掉。9p上的不平衡的轉位或間隙刪除在許多腫瘤類型中產生非常重要的影響，其中包括劇烈的成淋巴細胞白血病、神經膠質瘤、黑素瘤、腦癌、頸癌等(Mitelman，F(xiàn).，1994)。在9p位置上DNA序列的純合子的刪除和純合性的喪失發(fā)生在大量的腫瘤類型中(Diaz，M.O.，Zieman，S.，Le Beau，M.M.et al，1988；Diaz，M.O.，Rubin，C.M.，Harden，A.et al.，1990)。許多9p基因刪除的細胞系和病例都缺少甲硫基磷酸化酶活性。在很多情況下，這種包括IFN基因簇和MTAP基因的刪除都是間隙的，并且是亞顯微的。在腫瘤細胞系中同源IFN基因刪除恰巧使得MTAP酶活性喪失，證明了MTAP與IFN較為緊密地相連，并且發(fā)現(xiàn)兩者之間有TSG基因的存在。MTAP涉及嘌呤補充通路，通過該通路甲硫腺苷酸循環(huán)到嘌呤核苷儲藏庫，如果MTAP發(fā)生，則補充通路被阻斷。在人類惡性腫瘤中MTAP的缺失現(xiàn)象使得在化學治療上采用藥劑對MTAP陰性細胞殺死的選擇性能力有所提高。另外，在至今沒有更為有效的理療方法的前提下，正常的細胞和惡性腫瘤細胞的這種主要不同可以用來設計出有效的神經膠質瘤、肺癌以及其它多種癌癥的方法。本專利技術的多肽與上述的甲硫基腺苷磷酸化酶有41％的相同性，63％的相似性，并且包含甲硫基腺苷磷酸化酶家族特征性的保守序列，因此認為此蛋白是一種新的嘌呤補充通路相關酶，具有與甲硫基腺苷磷酸化酶相類似的生物學功能，并且命名為人甲硫基腺苷磷酸化酶37。由于如上所述人甲硫基腺苷磷酸化酶37蛋白在調節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人甲硫基腺苷磷酸化酶37蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人甲硫基腺苷磷酸化酶37蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。本專利技術的一個目的是提供分離的新的多肽--人甲硫基腺苷磷酸化酶37以及其片段、類似物和衍生物。本專利技術的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼人甲硫基腺苷磷酸化酶37的多核苷酸的重組載體。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼人甲硫基腺苷磷酸化酶37的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。本專利技術的另一個目的是提供生產人甲硫基腺苷磷酸化酶37的方法。本專利技術的另一個目的是提供針對本專利技術的多肽--人甲硫基腺苷磷酸化酶37的抗體。本專利技術的另一個目的是提供了針對本專利技術多肽--人甲硫基腺苷磷酸化酶37的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。本專利技術的另一個目的是提供診斷治療與人甲硫基腺苷磷酸化酶37異常相關的疾病的方法。本專利技術涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本專利技術還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體(a)編碼具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種(a)具有SEQ ID NO1中308-1321位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1588位的序列。本專利技術另外涉及一種含有本專利技術多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細胞和回收表達產物的制備本專利技術多肽的方法。本專利技術還涉及一種能與本專利技術多肽特異性結合的抗體。本專利技術還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制人甲硫基腺苷磷酸化酶37蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本專利技術的多肽。本專利技術還涉及用該方法獲得的化合物。本專利技術還涉及一種體外檢測與人甲硫基腺苷磷酸化酶37蛋白異常表達相關的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測生物樣品中本專利技術多肽的量或生物活性。本專利技術也涉及一種藥物組合物，它含有本專利技術多肽或其模擬物、激活劑、拮抗劑或抑制劑以及藥學上可接受的載體。本專利技術還涉及本專利技術的多肽和/或多核苷酸在制備用于治療癌癥、發(fā)育性疾病或免疫性疾病或其它由于人甲硫基腺苷磷酸化酶37表達異常所引起疾病的藥物的用途。本專利技術的其它方面由于本文的技術的公開，對本領域的技術人員而言是顯而易見的。本說明書和權利要求書中使用的下列術語除非特別說明具有如下的含義“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因組或合成的DNA或RNA，它們可以是單鏈或雙鏈的，代表有義鏈或反義鏈。類似地，術語“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白質序列及其片段或部分。當本專利技術中的“氨基酸序列”涉及一種天然存在的蛋白質分子的氨基酸序列時，這種“多肽”或“蛋白質”不意味著將氨基酸序列限制為與所述蛋白質分子相關的完整的天然氨基酸。蛋白質或多核苷酸“變體”是指一種具有一個或多個氨基酸或核苷酸改變的氨基酸序列或編碼它的多核苷酸序列。所述改變可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替換。變體可具有“保守性”改變，其中替換的氨基酸具有與原氨基酸相類似的結構或化學性質，如用亮氨酸替換異亮氨酸。變體也可具有非保守性改變，如用色氨酸替換甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一個或多個氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改變導致與天然存在的分子相比，一個或多個氨基酸或核苷酸的增加。“替換”是指由不同的氨基酸或核苷酸替換一個或多個氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的結構、調控或生物化學功能的蛋白質。類似地，術語“免疫學活性”是指天然的、重組的或合成蛋白質及其片段在合適的動物或細胞中誘導特定免疫反應以及與特異性抗體結合的能力。“激動劑”是指當與人甲硫基腺苷磷酸化酶37結合時，一種可引起該蛋白質改變從而調節(jié)該蛋白質活性的分子。激動劑可以包括蛋白質、核酸、碳水化合物或任何其它可結合人甲硫基腺苷磷酸化酶37的分子。“拮抗劑”或“抑制物”是指當與人甲硫基腺苷磷酸化酶37結合時，一種可封閉或調節(jié)人甲硫基腺苷磷酸化酶37的生物學活性或免疫學活性的分子。拮抗劑和抑制物可以包括蛋白質、核酸、碳水化合物或任何其它可結本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種分離的多肽－人甲硫基腺苷磷酸化酶３７，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、類似物或衍生物。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：毛裕民，謝毅，
申請(專利權)人：上海博德基因開發(fā)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：31[中國|上海]