一種海洋來源蛋白制備高F值寡肽的方法技術

本發明專利技術公開了一種海洋來源蛋白制備豐富支鏈氨基酸的寡肽的制備方法。具體方法包括：（1）海洋動植物蛋白清洗粉碎、勻漿。（2）按比例加入堿液浸泡后，加入復合蛋白酶制劑水解，水解完成后滅酶。（3）芳香族氨基酸脫除。（4）分子量＜1000Da的小分子肽的分離。（5）料液濃縮。（6）噴霧干燥。本發明專利技術公開的制備過程簡單，選用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和風味蛋白酶均為商業用酶，易于工業生產，產率較高，具有很強的抗氧化功效，并為高F值寡肽增加海洋方向的優質來源。

A method for the preparation of high F value oligopeptides by a marine source protein

The invention discloses a preparation method for the preparation of oligopeptides rich in branched chain amino acids by marine source protein. The specific methods include: (1) the marine animal and plant proteins are cleaned and crushed and homogenized. (2) after soaking in the alkaline solution in proportion, the compound protease preparation was added to hydrolyze and hydrolyze the enzyme after the hydrolysis was completed. (3) removal of aromatic amino acids. (4) the separation of small molecular peptides with molecular weight < 1000Da. (5) concentrate liquid. (6) spray drying. The preparation process is simple, and neutral protease, papain and flavour proteinase are all commercial enzymes. They are easy to produce in industry, yield is high, and they have strong antioxidant effect, and they are good sources for high F value oligopeptides to increase marine direction.

【技術實現步驟摘要】
一種海洋來源蛋白制備高F值寡肽的方法
本專利技術涉及水產品精深加工領域。更具體地，涉及一種利用復合蛋白酶水解海洋來源蛋白，工藝上去除芳香族氨基酸制備高F值寡肽的方法。
技術介紹
高F值寡肽具有很好營養作用，呈有一定生物活性。選用海洋優質的蛋白源作為制備高F值寡肽原料，如魚、蝦、海參、螺旋藻等制備寡肽具有較高的活性與生物效價。高F寡肽具有消除或減輕肝性腦病癥狀、改善肝功能和改善多種病人蛋白質營養失常及抗疲勞等功能，除可制作肝類疾病藥品外，還可廣泛用作保肝、護肝功能性食品，燒傷、外科手術、膿毒血癥及消化酶缺乏患者蛋白營養食品和腸道營養劑，高強度勞動者和運動員食品營養強化劑等。
技術實現思路
本專利技術的目的在于開發一種海洋來源蛋白制備豐富支鏈氨基酸的寡肽的制備方法。為達到上述目的，本專利技術提供一種利用海洋來源蛋白制備高F值寡肽的方法，具體步驟如下：S1、原料預處理：取新鮮海洋來源蛋白粉碎、制漿，得到蛋白漿液。S2、向步驟S1制得的蛋白漿液中加入所述漿液2~8倍質量的水，升溫至40~55℃后，加入2.5mol/L的NaOH溶液調節PH至9.0-10.0，預處理20-40min。S3、向步驟S2所述的蛋白漿液中加入占所述漿液總質量0.1~0.3%的復合蛋白酶，攪拌酶解3~6h后，升溫至80~95℃滅酶10~25min，得到酶解液；將所述酶解液離心分離，收集液相；所述復合蛋白酶的質量配比為：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：風味蛋白酶=2~4:3~5:3~5；S4、將步驟S3得到的液相采用切割分子量2000~8000Da的納濾膜分離，收集透過液；S5、將步驟S4收集的透過液加入β環狀糊精和活性炭，加入2.5mol/L的鹽酸矯正所述透過液PH至5~7，升溫至50~80℃，反應30~45min進行精制后，經板框壓濾機過濾脫碳，收集液相，即為精制液；所述β環狀糊精的加入量為所述透過液質量的0.01~0.05%，所述活性炭的加入量為所述透過液質量的0.1~1.0%；S6、將步驟S5制得的精制液通過膜濃縮設備濃縮至可溶性固形物含量占濃縮液總質量20~40%，噴霧干燥，得到牡蠣低聚肽粉。優選方式下，步驟S1具體為：取新鮮海洋來源蛋白源，利用絞肉機或粉碎機將所述蛋白源絞碎10~20min，得到蛋白漿液。優選方式下，步驟S3所述離心分離的條件為：采用搖擺型管式分離機，轉速為10000~16000r/min。優選方式下，步驟S5所述膜濃縮的操作條件為：采用切割分子量為10~100Da的納濾級、中空纖維膜，操作壓力為1.5~1.8Mpa。優選方式下，步驟S5所述噴霧干燥的條件為：進風溫度140℃，出風溫度85℃。本專利技術相比于現有技術的有益效果在于：1、本專利技術方法使用復合蛋白酶適合大部分海洋生物蛋白，且蛋白收率均高于60%。2、本專利技術方法制得的產品分子量小于1000Da的寡肽含量較高，能夠被人體完全吸收。3、本專利技術方法制得的寡肽粉無苦味、腥味，F值可以打到20左右，可作為蛋白營養補充劑直接食用。綜上，本專利技術利用海洋優質蛋白源制備高F值寡肽的方法提高了海洋生物附加值，所得產品中寡肽含量高，分子量在1000Da以下，支鏈氨基酸含量豐富，能夠被人體完全吸收，對推動我國海洋產業的迅速發展具有極其重要的現實意義。具體實施方式以下實例是對本專利技術的進一步說明。實施例1已牡蠣為原料（1）將牡蠣鮮肉1000kg用絞肉機粉碎15min，絞碎后進入膠體磨磨漿得漿液。（2）將漿液導入5m3酶解罐，所述5m3酶解罐為夾層式加熱反應釜，加入3倍牡蠣漿液質量的純水，調整體系溫度50℃，用2.5mol/L的NaOH溶液調PH至9.6，預處理25min。用2.5mol/L的HCL溶液調PH至8.5，加入所述牡蠣漿液總質量0.15%的復合蛋白酶；復合蛋白酶的質量配比為：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：風味蛋白酶=3:4:4，攪拌酶解4h，升溫80℃滅酶20min，采用管式離心機16000rpm離心進行固液分離，收集離心清液，導入5m3清液儲罐。（3）5m3分離液儲罐與膜分離裝置相連，將所得清液經切割分子量5000Da納濾膜分離裝置分離得透過液；（4）步驟（3）中透過液加入5m3精制罐為夾層式加熱反應釜，精制的條件為：加透過液質量0.02%的β環狀糊精、加透過液質量的0.8%活性炭，用2.5mol/L的HCL矯正分離液PH至6，加溫到65℃，反應40min。（5）所述5m3精制罐與板框壓濾機相連，經板框壓濾機脫碳，得到精制液。（6）所述板框壓濾機與膜濃縮設備相連，將精制液經切割分子量50Da納濾膜濃縮濃縮，使用1.6mpa壓力，濃縮至可溶性固含量占濃縮液質量30%，導入濃縮儲罐。（7）所述濃縮儲罐，設置有出料口，將濃縮料液從出料口取出后導入噴霧干燥塔進行噴霧干燥，噴霧干燥時進風溫度維持在140℃，出風溫度維持在85℃，得牡蠣低聚肽粉。本實施例制得的牡蠣低聚肽粉59.1千克，顏色為乳白色，F值測定為支鏈氨基酸含量/總氨基酸含量=20.15，分子量小于1000Da肽占總肽含量為98%，屬于優質高F值寡肽。實施例2已螺旋藻為原料（1）將螺旋藻粉1000kg用粉碎機粉碎15min，粉碎后進入膠體磨磨漿得海藻料液。（2）將料液導入5m3酶解罐，所述5m3酶解罐為夾層式加熱反應釜，加入3倍料液質量的純水，調整體系溫度50℃，用2.5mol/L的NaOH溶液調PH至9.6，預處理25min。用2.5mol/L的HCL溶液調PH至8.5，加入所述螺旋藻料液總質量0.15%的復合蛋白酶；復合蛋白酶的質量配比為：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：風味蛋白酶=4:4:2，攪拌酶解4h，升溫80℃滅酶20min，采用管式離心機16000rpm離心進行固液分離，收集離心清液，導入5m3清液儲罐。（3）5m3分離液儲罐與膜分離裝置相連，將所得清液經切割分子量5000Da納濾膜分離裝置分離得透過液；（4）步驟（3）中透過液加入5m3精制罐為夾層式加熱反應釜，精制的條件為：加透過液質量0.02%的β環狀糊精、加透過液質量的0.8%活性炭，用2.5mol/L的HCL矯正分離液PH至6，加溫到65℃，反應40min。（5）所述5m3精制罐與板框壓濾機相連，經板框壓濾機脫碳，得到精制液。（6）所述板框壓濾機與膜濃縮設備相連，將精制液經切割分子量50Da納濾膜濃縮濃縮，使用1.6mpa壓力，濃縮至可溶性固含量占濃縮液質量30%，導入濃縮儲罐。（7）所述濃縮儲罐，設置有出料口，將濃縮料液從出料口取出后導入噴霧干燥塔進行噴霧干燥，噴霧干燥時進風溫度維持在140℃，出風溫度維持在85℃，得螺旋藻低聚肽粉。本實施例制得的螺旋藻低聚肽粉65.5千克，顏色為淡綠色，F值測定為支鏈氨基酸含量/總氨基酸含量=22.32，分子量小于1000Da肽占總肽含量為96%，屬于優質高F值寡肽。以上所述，僅為本專利技術較佳的具體實施方式，但本專利技術的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本
的技術人員在本專利技術披露的技術范圍內，根據本專利技術的技術方案及其專利技術構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本專利技術的保護范圍之內。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種海洋來源蛋白制備高F值寡肽的方法，其特征在于，具體步驟如下：S1、原料預處理：取新鮮海洋來源蛋白粉碎、制漿，得到蛋白漿液；S2、向步驟S1制得的蛋白漿液中加入所述漿液2~8倍質量的水，升溫至40~55℃后，加入2.5mol/L的NaOH溶液調節PH至9.0?10.0，預處理20?40min；S3、向步驟S2所述的蛋白漿液中加入占所述漿液總質量0.1~0.3%的復合蛋白酶，攪拌酶解3~6h后，升溫至80~95℃滅酶10~25min，得到酶解液；將所述酶解液離心分離，收集液相；所述復合蛋白酶的質量配比為：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：風味蛋白酶=2~4:3~5:3~5；S4、將步驟S3得到的液相采用切割分子量2000~8000Da的納濾膜分離，收集透過液；S5、將步驟S4收集的透過液加入β環狀糊精和活性炭，加入2.5mol/L的鹽酸矯正所述透過液PH至5~7，升溫至50~80℃，反應30~45min進行精制后，經板框壓濾機過濾脫碳，收集液相，即為精制液；所述β環狀糊精的加入量為所述透過液質量的0.01~0.05%，所述活性炭的加入量為所述透過液質量的0.1~1.0%；S6、將步驟S5制得的精制液通過膜濃縮設備濃縮至可溶性固形物含量占濃縮液總質量20~40%，噴霧干燥，得到牡蠣低聚肽粉。...

【技術特征摘要】
1.一種海洋來源蛋白制備高F值寡肽的方法，其特征在于，具體步驟如下：S1、原料預處理：取新鮮海洋來源蛋白粉碎、制漿，得到蛋白漿液；S2、向步驟S1制得的蛋白漿液中加入所述漿液2~8倍質量的水，升溫至40~55℃后，加入2.5mol/L的NaOH溶液調節PH至9.0-10.0，預處理20-40min；S3、向步驟S2所述的蛋白漿液中加入占所述漿液總質量0.1~0.3%的復合蛋白酶，攪拌酶解3~6h后，升溫至80~95℃滅酶10~25min，得到酶解液；將所述酶解液離心分離，收集液相；所述復合蛋白酶的質量配比為：中性蛋白酶：木瓜蛋白酶：風味蛋白酶=2~4:3~5:3~5；S4、將步驟S3得到的液相采用切割分子量2000~8000Da的納濾膜分離，收集透過液；S5、將步驟S4收集的透過液加入β環狀糊精和活性炭，加入2.5mol/L的鹽酸矯正所述透過液PH至5~7，升溫至50~80℃，反應30~45min進行精制后，經板框壓濾機過濾脫碳，收集液相，即為精制液；所述β環狀糊精的加...

【專利技術屬性】
技術研發人員：包衛洋，王祖哲，楊大蘋，左愛華，
申請(專利權)人：大連深藍肽科技研發有限公司，
類型：發明
國別省市：遼寧,21