本發(fā)明專利技術提供一種消除多菌靈農藥殘留的降解菌及其降解菌劑，屬于生物高技術領域。所用的菌株ＤＪＬ－６，經(jīng)鑒定其為紅球菌屬（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ?。螅穑?。主要生物學特性為：Ｇ＋，菌體為球桿狀，沒有鞭毛；接觸酶和Ｖ－Ｐ反應為陽性；氧化酶反應陰性；能夠利用麥芽糖、甘露糖、檸檬酸鹽、乙酰胺和天冬酰胺為唯一碳或氮源進行生長，不能以乳糖、苦杏仁酸為唯一碳源進行生長；在ＬＢ培養(yǎng)基上培養(yǎng)時菌落呈橙色。降解菌產(chǎn)品直接施用可使作物中農藥殘留量降低９５％上，解決了農業(yè)生產(chǎn)中農藥殘留超標問題，可生產(chǎn)出無毒無公害的綠色農產(chǎn)品。
【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術一種多菌靈農藥殘留降解菌及其生產(chǎn)的菌劑，屬于生物高
，是利用微生物的方法降解化學農藥殘留，適用于現(xiàn)代農業(yè)生產(chǎn)中綠色無公害農產(chǎn)品的生產(chǎn)與加工。二、技術背景化學農藥的使用大大地促進了現(xiàn)代農業(yè)的發(fā)展，為農業(yè)生產(chǎn)挽回了大量因病蟲害等原因造成的損失，并極大地提高了農業(yè)生產(chǎn)的勞動效率和機械化程度，在農業(yè)生產(chǎn)的現(xiàn)代化進程中起了不可估量的作用。但同時農藥都是一些有毒有害化學物質，它們進入生態(tài)環(huán)境后，不僅殺死了對人類有害的生物，同時也對生態(tài)系統(tǒng)造成了嚴重的危害。農藥的大量使用引起農產(chǎn)品中農藥殘留超標，嚴重影響了人民的身體健康及農產(chǎn)品的出口創(chuàng)匯。隨著人們生活水平的提高和環(huán)境保護意識的增強，全社會對農藥殘留帶來的直接危害和潛在影響亦愈來愈關注，人們迫切需要無農藥殘留污染的清潔的綠色農產(chǎn)品。但從目前我國的農業(yè)生產(chǎn)形式和人口狀況來看，以停止農藥使用降低農業(yè)產(chǎn)量為代價的無公害生產(chǎn)模式是行不通的，農藥作為控制病蟲害的有效手段還將繼續(xù)在農業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮巨大的作用。如何能解決農業(yè)生產(chǎn)中的這個兩難問題就成為各個學科的研究熱點。實驗室和實際應用研究都表明利用微生物來降解消除土壤中的農藥殘留“庫”容量，從而降低糧食、蔬菜、茶葉等農產(chǎn)品中的農藥殘留，提高農產(chǎn)品的品質和經(jīng)濟價值是可行的。
技術實現(xiàn)思路
技術問題 本專利技術的目的在于針對生產(chǎn)實踐中的實際問題和需求，開發(fā)研制出一種新型的農藥殘留降解菌劑，使用本菌劑可以使多菌靈的殘留量降低90％以上。技術方案 下面為本專利技術的主要內容本專利技術提供一種消除多菌靈農藥殘留的降解菌，其菌株是一株革蘭氏染色反應陽性菌DJL-6(2005年10月12日寄存于中國微生物菌種保存管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCC NO.1478)，經(jīng)鑒定為紅球菌屬(Rhodococcus sp.)。主要生物學特性為G+，菌體為球桿狀，沒有鞭毛；接觸酶和V-P反應為陽性；氧化酶反應陰性；能夠利用麥芽糖、甘露糖、檸檬酸鹽、乙酰胺和天冬酰胺為唯一碳或氮源進行生長，不能以乳糖、苦杏仁酸為唯一碳源進行生長；在LB培養(yǎng)基上培養(yǎng)時菌落呈橙色，不能夠利用苯甲酸鈉為唯一碳源進行生長。它的16S rDNA的Genbank登陸號為DQ090961。使用上述多菌靈農藥殘留降解菌生產(chǎn)菌劑的工藝為斜面種—搖瓶種—種子罐—生產(chǎn)罐—產(chǎn)品(包裝劑型為液體菌劑或固體吸附菌劑)。本專利技術的詳細實施步驟為1)將多菌靈農藥殘留降解菌DJI-6的試管種接種于LB培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期；2)將上述培養(yǎng)好的菌種按種子罐培養(yǎng)基的10％接種量接種入500升種子罐，培養(yǎng)至對數(shù)生長期，種子罐所用的培養(yǎng)基配方為葡萄糖0.8％，(NH4)2SO41％，K2HPO40.2％，MgSO40.05％，NaCl 0.01％，CaCO30.3％，酵母膏0.02％，pH值7.2-7.5；3)將種子液按生產(chǎn)罐培養(yǎng)基的10％接種量接入生產(chǎn)罐培養(yǎng)，生產(chǎn)罐所用培養(yǎng)基與種子罐培養(yǎng)基相同；在種子罐和生產(chǎn)罐的培養(yǎng)過程中無菌空氣的通氣量為1∶0.6-1.2，攪拌速度為180-240轉/分，培養(yǎng)溫度為30-35℃，全流程培養(yǎng)時間為48-60小時，發(fā)酵結束后菌體數(shù)量達到10億個/ml以上，發(fā)酵完成后培養(yǎng)液出罐直接用塑料包裝桶或包裝瓶分裝成液體劑型或采用泥炭吸附用包裝袋分裝成固體菌劑劑型。有益效果使用該專利技術生產(chǎn)的農藥殘留降解菌劑具有生產(chǎn)使用成本低，使用方便，去除效果好的優(yōu)點，適合在全國糧油蔬菜生產(chǎn)出口基地或有綠色食品商標標志的地方大面積推廣使用。本專利技術對于保護生態(tài)環(huán)境，保護人民的身體健康，提高農產(chǎn)品的附加值具有重要的意義。使用該降解菌劑可以在農作物的正常生長過程中正常使用化學農藥進行病蟲害防治而保證農產(chǎn)品中農藥殘留含量符合綠色食品要求降解菌DJL-6具有較高的降解效率，能使多菌靈農藥的殘留量降解90％以上，大大降低了生產(chǎn)和使用過程中的工作量，降低了生產(chǎn)和使用成本。使用該降解菌劑可以在農作物的正常生長過程中正常使用化學農藥進行病蟲害防治而保證農產(chǎn)品中農藥殘留含量符合綠色食品要求。并且該菌為革蘭氏陽性菌，在田間的存活時間適當不會影響以后農藥使用的效果。本專利技術成功地解決了農業(yè)生產(chǎn)中多菌靈農藥殘留超標問題，既充分發(fā)揮了化學農藥在植物病蟲害防治中的高效快速的作用，又可以生產(chǎn)出無毒無公害的綠色農產(chǎn)品。具體實施例方式以下敘述本專利技術的實施例。將本專利技術的降解菌DJL-6的原種在培養(yǎng)皿上活化，并測定降解性能，接種于試管斜面上備用。試管種接種于1000ml搖瓶中，里面添加200ml的LB培養(yǎng)基，恒溫振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期，準備接種種子罐。種子罐500升，投料量400升，培養(yǎng)基配方為葡萄糖0.8％，(NH4)2SO41％，K2HPO40.2％，MgSO40.05％，NaCl 0.01％，CaCO30.3％，酵母膏0.02％，pH值7.2-7.5。投料完畢后121℃高壓濕熱滅菌，冷卻至33℃后，將上述培養(yǎng)好的搖瓶菌種按10％的接種量接種入500升種子罐，培養(yǎng)至對數(shù)生長期，攪拌速度為220轉/分，無菌空氣通入量為1∶0.8。將到達對數(shù)期的種子液按10％的接種量接入生產(chǎn)罐培養(yǎng)，生產(chǎn)罐所用培養(yǎng)基成分與種子罐培養(yǎng)基相同。生產(chǎn)罐容量5噸，投料量4.5噸。投料后的生產(chǎn)罐1.1kg/cm2的壓力下，121℃高壓濕熱滅菌，滅菌后冷卻至35℃以下，通無菌空氣保持無菌狀態(tài)備用。接種后的生產(chǎn)罐溫度控制在30-35℃，生產(chǎn)罐的培養(yǎng)過程中無菌空氣的通氣量為1∶0.8-1.0，攪拌速度為240轉/分，整個工藝流程培養(yǎng)時間為48-60小時。發(fā)酵結束后菌體數(shù)量達到10億個/ml以上。發(fā)酵完成后培養(yǎng)液出罐直接用塑料包裝桶或包裝瓶分裝成液體劑型或采用泥炭吸附用包裝袋分裝成固體菌劑劑型。用上述方法所得的產(chǎn)品進行土壤、水體等農藥殘留降解試驗示范。在土壤或水體施用過多菌靈農藥后，將上述菌劑按使用方法要求在土壤或水體中保留3天后，取適量土壤或水體經(jīng)提取后，用液相色譜法測定土壤或蔬菜中多菌靈殘留的含量(由山西省農藥重點實驗室(太原)測定)，從結果中看出經(jīng)降解菌處理后能大大降低土壤和水體中的殘留農藥(表1)。表1菌株DJL-6降解土壤和水體中的多菌靈殘留檢測結果 檢測報告檢測報告編號0415 編制秦曙審核王霞 簽發(fā)人(職務、簽字)實驗室主任 喬雄梧簽發(fā)日期2004年11月26日山西省農藥重點實驗室權利要求1.一種多菌靈農藥殘留降解菌，其特征在于，該微生物是革蘭氏染色陽性的紅球菌屬(Rhodococcus sp.)的菌株DJL-6，2005年10月12日寄存于中國微生物菌種保存管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCC NO.1478，主要生物學特性為G+，菌體為球桿狀，沒有鞭毛；接觸酶和V-P反應為陽性；氧化酶反應陰性；能夠利用麥芽糖、甘露糖、檸檬酸鹽、乙酰胺和天冬酰胺為唯一碳或氮源進行生長，不能以乳糖、苦杏仁酸為唯一碳源進行生長；在LB培養(yǎng)基上培養(yǎng)時菌落呈橙色，不能夠利用苯甲酸鈉為唯一碳源進行生長，它的16S rDNA的Genbank登陸號為DQ090961。2.一種用權利要求1所述的多菌靈農藥殘留降解菌生產(chǎn)的農藥殘留降解菌劑，是通過以下方法生產(chǎn)而成1)將多菌靈農藥殘留降解菌DJL-6的試管種接種于LB培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)至對數(shù)本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術保護點】
一種多菌靈農藥殘留降解菌，其特征在于，該微生物是革蘭氏染色陽性的紅球菌屬（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．）的菌株ＤＪＬ－６，２００５年１０月１２日寄存于中國微生物菌種保存管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為ＣＧＭＣＣＮＯ．１４７８， 主要生物學特性為：Ｇ↑［＋］，菌體為球桿狀，沒有鞭毛；接觸酶和Ｖ－Ｐ反應為陽性；氧化酶反應陰性；能夠利用麥芽糖、甘露糖、檸檬酸鹽、乙酰胺和天冬酰胺為唯一碳或氮源進行生長，不能以乳糖、苦杏仁酸為唯一碳源進行生長；在ＬＢ培養(yǎng)基上培養(yǎng)時菌落呈橙色，不能夠利用苯甲酸鈉為唯一碳源進行生長，它的１６ＳｒＤＮＡ的Ｇｅｎｂａｎｋ登陸號為ＤＱ０９０９６１。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：李順鵬，許敬亮，沈標，何健，洪青，
申請(專利權)人：南京農業(yè)大學，
類型：發(fā)明
國別省市：84[中國|南京]
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