殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑及制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑及制備方法。本發(fā)明專利技術(shù)是以新型殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌新菌株B?Y7?1原粉為有效成分，以明膠和阿拉伯膠為載體材料，以甲殼素納米纖維為增韌劑，加入甲醛固化后與分散潤(rùn)濕劑、增稠劑、抗凍劑、防腐劑混合制備了穩(wěn)定的微膠囊懸浮劑。本發(fā)明專利技術(shù)的微膠囊懸浮劑包埋率85%以上，評(píng)價(jià)粒徑小于10μm，產(chǎn)品性能穩(wěn)定，具有良好抗紫外線能力，產(chǎn)品用于防治農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的蠐螬類害蟲(chóng)具有良好的防效和持效性，具有很好的應(yīng)用和推廣前景。

Kill the grubs pests of Bacillus thuringiensis microcapsule suspending agent and preparation method thereof

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑及制備方法
本專利技術(shù)涉及一株對(duì)蠐螬類害蟲(chóng)具有高效殺蟲(chóng)活性的蘇云金芽孢桿菌新菌株B-Y7-1的微膠囊懸浮劑及制備方法，屬于生物農(nóng)藥

技術(shù)介紹
蘇云金芽孢桿菌（Bacillusthuringiensis，Bt）是世界上研究最多、應(yīng)用最廣、對(duì)人畜安全、不破壞生態(tài)平衡的微生物殺蟲(chóng)劑。蘇云金桿菌作為生物殺蟲(chóng)劑具有顯著的優(yōu)勢(shì)，但由于Bt的主要?dú)⑾x(chóng)成分是殺蟲(chóng)晶體蛋白，抗紫外線和不良環(huán)境條件的能力較差，導(dǎo)致蘇云金桿菌制劑存在持效期短，防治效果易受陽(yáng)光、溫度、雨水等外界氣候和生態(tài)條件制約等缺點(diǎn)，其田間應(yīng)用殘效期短是制約該殺蟲(chóng)劑發(fā)展的瓶頸，如何提高其殺蟲(chóng)效果是相關(guān)研究機(jī)構(gòu)和生產(chǎn)企業(yè)所共同面臨的難題。青島農(nóng)業(yè)大學(xué)李長(zhǎng)友等從山東省各地分離和篩選了多株對(duì)蠐螬類害蟲(chóng)具有殺蟲(chóng)活性的Bt菌株，其中Bt新菌株B-Y7-1對(duì)華北大黑鰓金龜和暗黑鰓金龜?shù)染哂休^高殺蟲(chóng)活性，在蠐螬類地下害蟲(chóng)的防治方面顯示出較廣闊的應(yīng)用前景，該菌株及其殺蟲(chóng)晶體蛋白已獲國(guó)家專利技術(shù)專利授權(quán)（ZL201110318767.5，保藏編號(hào)：CCTCCNo.M2011267），但目前尚無(wú)相關(guān)制劑產(chǎn)品開(kāi)發(fā)。本專利技術(shù)針對(duì)目前蘇云金芽孢桿菌制劑的缺點(diǎn)，以對(duì)蠐螬類害蟲(chóng)具有高效殺蟲(chóng)活性Bt新菌株B-Y7-1芽孢及殺蟲(chóng)晶體蛋白為模型藥物，以高分子材料明膠、阿拉伯膠為載體、甲殼素納米纖維為增韌劑制備微膠囊懸浮劑，解決傳統(tǒng)Bt生物農(nóng)藥制劑藥效不穩(wěn)定、環(huán)境適應(yīng)性差的突出問(wèn)題，同時(shí)實(shí)現(xiàn)制劑產(chǎn)品的緩釋性，從而為殺蠐螬類害蟲(chóng)Bt新菌株B-Y7-1的應(yīng)用推廣奠定基礎(chǔ)。。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供一種殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢菌微膠囊懸浮劑及其制備方法，為實(shí)環(huán)境友好微生物農(nóng)藥的田間進(jìn)一步推廣應(yīng)用和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。本專利技術(shù)提供的一種殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑，按重量比由以下幾種組分組成：蘇云金芽孢桿菌原粉5~10%，甲殼素納米纖維0.5~1%，明膠1~4%，阿拉伯膠2~4%，黑色素2~4%，潤(rùn)濕分散劑5%~10%，增稠劑0.2~2%，抗凍劑2~5%，防腐劑0.1~0.5%，水補(bǔ)齊至100%。所述的活性成分為蠐螬具有高活性的蘇云金芽孢桿菌菌株B-Y7-1（保藏編號(hào)：CCTCCNo.M2011267）原粉，包括芽孢及殺蟲(chóng)晶體蛋白。所述的潤(rùn)濕分散劑為木質(zhì)素磺酸鈉或木質(zhì)素磺酸鈣、三苯乙烯基聚氧乙烯醚磷酸酯、聚氧乙烯聚氧丙烯基醚嵌段共聚物、聚羧酸鹽、烷基酚聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基萘磺酸鹽、烷基苯磺酸鹽和山梨醇聚氧乙烯醚中的一種或兩種。所述的增稠劑為黃原膠、硅酸鎂鋁、聚乙烯醇、膨潤(rùn)土和羧甲基纖維素中的至少一種。所述防凍劑為乙二醇、丙二醇、丙三醇、尿素中的至少一種。所述防腐劑為水楊酸鈉或苯甲酸鈉。所述的殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑的制備方法包括以下步驟：（1）取蘇云金芽孢桿菌原粉與5%吐溫-80水溶液、黑色素?cái)嚢杈鶆蚺渲瞥删鷳乙海唬?）將甲殼素納米纖維加入到蒸餾水中，室溫?cái)嚢?h，然后研磨10min，之后超聲分散30min，配制成甲殼素納米纖維懸浮液；（3）將步驟（2）制備的甲殼素納米纖維懸浮液加入到步驟（1）制備的菌懸液，持續(xù)攪拌1h，靜置脫氣，得到懸浮混合體系；（4）將明膠水溶液加入到步驟（3）制備的懸浮混合體系，繼續(xù)攪拌30min，同時(shí)打開(kāi)恒溫水浴鍋調(diào)節(jié)體系的溫度為45℃，設(shè)置攪拌速度為500r/min，得到菌懸液與明膠的混合體系；（5）當(dāng)步驟（4）的混合體系沒(méi)有氣體且溫度恒定時(shí)，調(diào)節(jié)體系pH為4，繼續(xù)攪拌20min后加入阿拉伯膠水溶液攪拌30min，最后加入適量25%的甲醛水溶液固化，繼續(xù)攪拌30min，得到微膠囊懸浮液，加入潤(rùn)濕分散劑、增稠劑、抗凍劑、防腐劑和余量水，攪拌均勻，既得蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑。以上所制備的蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑經(jīng)檢測(cè)包埋率在85%以上，粒徑小于10μm。本專利技術(shù)的有益效果為：本專利技術(shù)首次以新型環(huán)境友好的殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌新菌株B-Y7-1原粉（包括芽孢及殺蟲(chóng)晶體蛋白）為活性組分，以明膠和阿拉伯膠為載體，加入甲殼素納米纖維增強(qiáng)微膠囊機(jī)械強(qiáng)度和韌性，最后通過(guò)甲醛固化制備了殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑，提高了蘇云金芽孢桿菌制劑產(chǎn)品的穩(wěn)定性和抗紫外線能力，延長(zhǎng)了藥效，而且制劑產(chǎn)品為環(huán)境友好水基化劑型，符合綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展的要求，對(duì)生物農(nóng)藥蘇云金芽孢桿菌新菌株B-Y7-1的推廣應(yīng)用有重要意義。具體實(shí)施方式為了充分理解本專利技術(shù)，以下結(jié)合實(shí)施方式對(duì)本專利技術(shù)的上述內(nèi)容和技術(shù)方案作更詳細(xì)的說(shuō)明，但不應(yīng)將此理解為本專利技術(shù)上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。實(shí)施例殺蠐螬類害蟲(chóng)的5%蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑各組分按重量比計(jì)：蘇云金芽孢桿菌B-Y7-1原粉5%，明膠2%，阿拉伯膠2%，黑色素2%，三苯乙烯基聚氧乙烯醚磷酸酯5%，聚羧酸鹽5%，黃原膠0.2%，丙二醇5%，苯甲酸鈉0.2%，水補(bǔ)足至100%。制備方法：（1）取5g蘇云金芽孢桿菌原粉、2g黑色素和5%吐溫-80水溶液攪拌均勻配制成菌懸液；（2）將1g甲殼素納米纖維加入到蒸餾水中，室溫?cái)嚢?h，然后研磨10min，之后超聲分散30min，配制成甲殼素納米纖維懸浮液；（3）將步驟（2）制備的甲殼素納米纖維懸浮液加入到步驟（1）制備的菌懸液，持續(xù)攪拌1h，靜置脫氣，得到懸浮混合體系；（4）將還有2g的明膠水溶液加入到步驟（3）制備的懸浮混合體系，繼續(xù)攪拌30min，同時(shí)打開(kāi)恒溫水浴鍋調(diào)節(jié)體系的溫度為45℃，設(shè)置攪拌速度為500r/min，得到菌懸液與明膠的混合體系；（5）當(dāng)步驟（4）的混合體系沒(méi)有氣體且溫度恒定時(shí)，調(diào)節(jié)體系pH為4，繼續(xù)攪拌20min后加入含有2g阿拉伯膠水溶液攪拌30min，最后加入適量25%的甲醛水溶液固化，繼續(xù)攪拌30min，得到微膠囊懸浮液，加入5g三苯乙烯基聚氧乙烯醚磷酸酯，5g聚羧酸鹽，0.2g黃原膠，5g丙二醇，0.2g苯甲酸鈉，水補(bǔ)足至100g，攪拌混合均勻，既得蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑。所制備的蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑，其包囊率為87.4%，平均粒徑小于10μm，懸浮率90%以上，經(jīng)紫外線（30W）照射3h，所制備的蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑的芽孢存活率為80.13%。對(duì)比例殺蠐螬類害蟲(chóng)的5%蘇云金芽孢桿菌懸浮劑各組分按重量比計(jì)：蘇云金芽孢桿菌B-Y7-1原粉5%，苯乙基酚甲醛樹(shù)脂聚氧乙烯醚1.5%，十二烷基苯磺酸鈣4.5%，黃原膠0.2%，丙三醇4%，水補(bǔ)足至100%。制備方法（1）稱取5g蘇云金芽孢桿菌B-Y7-1原粉與1.5g乳化劑苯乙基酚甲醛樹(shù)脂聚氧乙烯醚、4.5g十二烷基苯磺酸鈣、適量水在磁力攪拌器中攪動(dòng)均勻成混合體系；（2）將4g丙三醇、含有0.2g黃原膠的水溶液加入步驟（1）制備的混合體系中攪拌混合，用水補(bǔ)足100g，充分?jǐn)嚢杈鶆颍心?.5h后得到5%殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌懸浮劑。所制備的懸浮劑平均粒徑小于8μm，懸浮率90%以上，經(jīng)紫外線（30W）照射3h，所制備的蘇云金芽孢桿菌懸浮劑的芽孢存活率為50.13%。試驗(yàn)例將上述制備的實(shí)施例5%蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑在田間進(jìn)行了對(duì)蠐螬的防治藥效試驗(yàn)，以對(duì)比例5%蘇云金芽孢桿菌懸浮劑為對(duì)照藥劑，采用土壤處理法進(jìn)行試驗(yàn)。調(diào)查方法參照GB/T本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑及制備方法，其特征在于，該懸浮劑由以下幾種組分按重量比組成：蘇云金芽孢桿菌原粉5~10%，甲殼素納米纖維0.5~1%，明膠1~4%，阿拉伯膠2~4%，黑色素2~4%，潤(rùn)濕分散劑5%~10%，增稠劑0.2~2%，抗凍劑2~5%，防腐劑0.1~0.5%，水補(bǔ)足至100%。

【技術(shù)特征摘要】
1.殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑及制備方法，其特征在于，該懸浮劑由以下幾種組分按重量比組成：蘇云金芽孢桿菌原粉5~10%，甲殼素納米纖維0.5~1%，明膠1~4%，阿拉伯膠2~4%，黑色素2~4%，潤(rùn)濕分散劑5%~10%，增稠劑0.2~2%，抗凍劑2~5%，防腐劑0.1~0.5%，水補(bǔ)足至100%。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑，其特征在于，所述的蘇云金芽孢桿菌原粉為對(duì)蠐螬具有高殺蟲(chóng)活性的蘇云金芽孢桿菌菌株B-Y7-1（保藏編號(hào)：CCTCCNo.M2011267）原粉，包括芽孢及殺蟲(chóng)晶體蛋白。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑，其特征在于，所述的潤(rùn)濕分散劑為木質(zhì)素磺酸鈉、木質(zhì)素磺酸鈣、三苯乙烯基聚氧乙烯醚磷酸酯、聚氧乙烯聚氧丙烯基醚嵌段共聚物、聚羧酸鹽、烷基酚聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基萘磺酸鹽、烷基苯磺酸鹽和山梨醇聚氧乙烯醚中的一種或兩種。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑，其特征在于，所述的增稠劑為黃原膠、硅酸鎂鋁、聚乙烯醇、膨潤(rùn)土和羧甲基纖維素中的至少一種。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殺蠐螬類害蟲(chóng)蘇云金芽孢桿菌微膠囊懸浮劑，其特征在于，所述防凍劑為乙二醇、丙二醇、丙三醇、尿素中的至少一種。6.根據(jù)...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張保華，李長(zhǎng)友，鄭桂玲，辛露露，張雨，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：青島農(nóng)業(yè)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：山東,37