蛋白酶體抑制劑和甲病毒在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及蛋白酶體抑制劑(proteasome?inhibitor)和甲病毒在制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。本發(fā)明專利技術(shù)首次發(fā)現(xiàn)蛋白酶體抑制劑可以用于制備甲病毒抗腫瘤增效劑。發(fā)明專利技術(shù)同時(shí)涉及一種包含蛋白酶體抑制劑以及甲病毒的藥物組合物，包含蛋白酶體抑制劑及甲病毒的藥品套裝，以及蛋白酶體抑制劑與甲病毒在治療腫瘤，特別是對所述甲病毒不敏感的腫瘤中的用途。

Application of proteasome inhibitors and alpha virus in the preparation of antineoplastic agents

The invention belongs to the field of biomedicine and relates to the application of proteasome inhibitor and alphavirus in the preparation of antitumor drugs. It is the first discovery that proteasome inhibitors can be used to prepare alpha virus antitumor synergist. The invention also relates to a pharmaceutical composition comprising a proteasome inhibitor and a virus, a drug package comprising a proteasome inhibitor and a virus, and the use of proteasome inhibitors and a virus in the treatment of tumors, in particular tumors not sensitive to the virus.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
蛋白酶體抑制劑和甲病毒在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用
本專利技術(shù)屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及蛋白酶體蛋白抑制劑與甲病毒的聯(lián)合在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
溶瘤病毒(oncolyticvirus)是一類選擇性的感染并殺傷腫瘤細(xì)胞，而不損傷正常細(xì)胞的可復(fù)制病毒。溶瘤病毒療法(oncolyticvirotherapy)是一種創(chuàng)新的腫瘤靶向治療策略，它利用天然的或經(jīng)基因工程改造的病毒選擇性的感染腫瘤細(xì)胞，并在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制，達(dá)到靶向性溶解、殺傷腫瘤細(xì)胞的作用，但是對正常細(xì)胞沒有損傷。M1病毒(AlphavirusM1)屬于甲病毒屬(Alphavirus)，其在制備抗腫瘤藥物方面具有較好的應(yīng)用效果。例如中國專利技術(shù)專利申請201410425510.3公開了M1病毒能選擇性引起腫瘤細(xì)胞死亡而不影響正常細(xì)胞存活，其在抗腫瘤方面具有非常好的應(yīng)用前景。然而，不同腫瘤對M1病毒的敏感性不一。例如中國專利技術(shù)專利申請201410425510.3所記載的，M1作為抗腫瘤藥物使用時(shí)，對于結(jié)直腸癌、肝癌、膀胱癌和乳腺癌的效果不如胰腺癌、鼻咽癌、前列腺癌和黑色素瘤明顯；而膠質(zhì)瘤、宮頸癌、肺癌則更其次；而胃癌則最不顯著。篩選增加溶瘤病毒腫瘤治療效果的化合物有望增加溶瘤病毒的抗瘤譜及抗瘤強(qiáng)度。專利技術(shù)人此前申請的專利201510990705.7中，將大黃酚及其衍生生物作為溶瘤病毒的抗瘤增效劑，二者組合可以將腫瘤細(xì)胞的存活率降低至39.6％。目前，這種聯(lián)合應(yīng)用的作用機(jī)制尚不明確，也未能知曉未被明確報(bào)道可增效溶瘤病毒如甲病毒的其他物質(zhì)，有哪些可以與其產(chǎn)生增效作用，以及增效的幅度。研究特定溶瘤病毒的增效途徑并不簡單。盡管已有眾多已被報(bào)道的對某些溶瘤病毒具有抗腫瘤增效作用的物質(zhì)，但是，由于不同的溶瘤病毒往往在增效機(jī)制上表現(xiàn)各異，增效途徑難以預(yù)期。藥物對不同病毒復(fù)制或?qū)C(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)具備不同的作用，其機(jī)制的是非常復(fù)雜的，目前已被研究開發(fā)的對特定溶瘤病毒具有增效作用的物質(zhì)多不勝數(shù)，但是，它們由往往只能針對某些病毒具有正面作用，對于另一些病毒不具有作用，或者甚至帶來負(fù)面作用，這給溶瘤病毒增效劑的開發(fā)帶來了很大的挑戰(zhàn)。對于甲病毒來說，其增效途徑的研發(fā)也是面臨同樣的問題。例如，作為被證實(shí)能協(xié)同增效溶瘤棒狀病毒的HDAC抑制劑(Nguye,T.L.,etal.,Chemicaltargetingoftheinnateantiviralresponsebyhistonedeacetylaseinhibitorsrendersrefractorycancerssensitivetoviraloncolysis.Proceedingsofthenationalacademyofsciences,2008.105(39):p.14981-14986.；Shulak,L.,etal.,HistoneDeacetylaseInhibitorsPotentiateVesicularStomatitisVirusOncolysisinProstateCancerCellsbyModulatingNF-kB-DependentAutophagy.JournalofVirology,2014.88(5):p.2927-2940.；Bridle,B.W.,etal.,HDACInhibitionSuppressesPrimaryImmuneResponses,EnhancesSecondaryImmuneResponses,andAbrogatesAutoimmunityDuringTumorImmunotherapy.Moleculartherapy,2013.21(4):p.887-894.)，專利技術(shù)人卻發(fā)現(xiàn)，其被用于與甲病毒聯(lián)用后，卻沒有獲得類似的增效效果。這也是甲病毒增效劑開發(fā)難度大的其中一個(gè)原因。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供一種甲病毒抗腫瘤增效劑。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的在于提供能夠選擇性地增強(qiáng)甲病毒對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，而不影響正常細(xì)胞的抗癌增效劑。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的在于提供蛋白酶體抑制劑在制備甲病毒抗瘤增效劑方面的應(yīng)用。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的在于提供一種抗瘤藥物組合物，其可以使得甲病毒發(fā)揮更好的抗瘤效果。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的在于提供一種針對甲病毒不敏感的腫瘤，安全有效的甲病毒增效藥物。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的在于提供一種更精準(zhǔn)更安全的溶瘤病毒增效療法。本專利技術(shù)發(fā)現(xiàn)蛋白酶體抑制劑可以增強(qiáng)甲病毒的抗腫瘤效果。本專利技術(shù)提供了蛋白酶體抑制劑與甲病毒聯(lián)用的組合物，以及他們在制備抗腫瘤藥物中的用途。蛋白酶體(proteasome)，是在真核生物中普遍存在的一種多催化復(fù)合體。蛋白酶體是細(xì)胞用來調(diào)節(jié)特定蛋白和去除錯(cuò)誤折疊蛋白的主要工具，負(fù)責(zé)將細(xì)胞不需要的或受損傷的靶蛋白快速降解。蛋白酶體抑制劑可以阻斷大量的調(diào)節(jié)蛋白的降解，引起細(xì)胞內(nèi)信號系統(tǒng)的紊亂和超負(fù)荷，導(dǎo)致細(xì)胞生長抑制，最終使腫瘤進(jìn)展過程延緩，甚至停止。包括Bortezomib在內(nèi)的多個(gè)蛋白酶體抑制劑已經(jīng)用于臨床治療惡性腫瘤，且效果顯著。蛋白酶體密度梯度離心的沉降系數(shù)為26s，故又稱其為26s蛋白酶體。26S蛋白酶體由一個(gè)20S核心顆粒和1個(gè)或兩個(gè)19S調(diào)節(jié)顆粒組成。20S核心顆粒由兩個(gè)外層α環(huán)和兩個(gè)內(nèi)層β環(huán)堆疊而成的720kDa中空圓桶亞復(fù)合體，每一層環(huán)由7個(gè)密切相關(guān)的亞基組成并可表示為α1-7β1-7β1-7α1-7。蛋白酶體的活性位點(diǎn)位于20S核心顆粒內(nèi)腔，由β亞基Thr1形成獨(dú)特的單個(gè)殘基催化位點(diǎn)，7種β亞基中有三種由于Thr1的存在具有催化活性：β1(GeneID:5689)、β2(GeneID:5690)和β5(GeneID:5693)。優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑為蛋白酶體的核心顆粒的抑制劑。作為更優(yōu)選的實(shí)施方式，所述的蛋白酶體抑制劑為抑制亞基β1、β2或β5的抑制劑。所述蛋白酶體抑制劑，是指可以抑制蛋白酶體活性、或者抑制其中任意一個(gè)亞基的活性或表達(dá)、或者阻斷亞基的組裝、或降解蛋白酶體的物質(zhì)。所述蛋白酶體抑制劑包括截至目前所公開的蛋白酶體抑制劑，也包括未來被研究出具有相似功能的蛋白酶體抑制劑。專利技術(shù)人的通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了通過抑制蛋白酶體可以顯著增強(qiáng)甲病毒的溶瘤效應(yīng)。專利技術(shù)人采用了蛋白酶體抑制劑(例如Bortezomib)協(xié)同甲病毒(例如M1病毒)作用于腫瘤細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，蛋白酶體抑制劑可以協(xié)同甲病毒增強(qiáng)抗腫瘤效應(yīng)。硼替佐米(Bortezomib))等蛋白酶體抑制劑作為已被研究的藥物之一，其對不同的溶瘤病毒的作用是各異的。有報(bào)道其可增效某些病毒，例如增強(qiáng)水皰性口炎病毒(VSV)(YardeDN,NaceRA,RussellSJ.Oncolyticvesicularstomatitisvirusandbortezomibareantagonisticagainstmyelomacellsinvitrobuthaveadditiveanti-myelomaactivityinvivo.ExpHematol.2013Dec；41(12):1038-49.)、HSV-1(SuryadevaraCM,RiccioneKA,SampsonJH.ImmunotherapyGoneViral:BortezomibandoHSVEnhanceAntitu本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.蛋白酶體抑制劑在制備甲病毒抗腫瘤增效劑或耐藥逆轉(zhuǎn)劑方面的應(yīng)用。

【技術(shù)特征摘要】
1.蛋白酶體抑制劑在制備甲病毒抗腫瘤增效劑或耐藥逆轉(zhuǎn)劑方面的應(yīng)用。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的甲病毒選自M1病毒和蓋塔病毒中的至少一種。3.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蛋白酶體抑制劑為抑制蛋白酶體活性、或者抑制蛋白酶體任意一個(gè)亞基的活性或表達(dá)、或者阻斷蛋白酶體亞基的組裝、或降解蛋白酶體的物質(zhì)；優(yōu)選地，所述蛋白酶體抑制劑為抑制蛋白酶體任意一個(gè)亞基活性或表達(dá)的物質(zhì)；優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自以下化合物或其具有蛋白酶體抑制作用的衍生物、或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體、同分異構(gòu)體：Bortezomib、Carfilzomib、MG-132、ONX-0914、ONX-0912、CEP-18770和MLN-9708；或者優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因敲除材料；或者優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自DNA、RNA、PNA、DNA-RNA雜合體中的一種或幾種；更優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA、核酶中的一種或幾種；更優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑為腫瘤靶向蛋白酶體抑制劑。4.一種治療腫瘤的藥物組合物，包含：(a)蛋白酶體抑制劑；優(yōu)選地，所述蛋白酶體抑制劑為抑制蛋白酶體活性、或者抑制蛋白酶體活任意一個(gè)亞基的活性或表達(dá)、或者阻斷蛋白酶體活亞基的組裝、或降解蛋白酶體的物質(zhì)；優(yōu)選地，所述蛋白酶體抑制劑為抑制蛋白酶體任意一個(gè)亞基活性或表達(dá)的物質(zhì)；優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自以下化合物或其具有蛋白酶體抑制作用的衍生物、或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體、同分異構(gòu)體：Bortezomib、Carfilzomib、MG-132、ONX-0914、ONX-0912、CEP-18770和MLN-9708；或者優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因敲除材料；或者優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自DNA、RNA、PNA、DNA-RNA雜合體中的一種或幾種；更優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA、核酶中的一種或幾種；更優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑為腫瘤靶向蛋白酶體抑制劑；(b)甲病毒；優(yōu)選地，所述的甲病毒選自M1病毒和蓋塔病毒中的至少一種。5.一種藥品套裝，包含：(a)蛋白酶體抑制劑；優(yōu)選地，所述蛋白酶體抑制劑為抑制蛋白酶體活性、或者抑制蛋白酶體活任意一個(gè)亞基的活性或表達(dá)、或者阻斷蛋白酶體活亞基的組裝、或降解蛋白酶體的物質(zhì)；優(yōu)選地，所述蛋白酶體抑制劑為抑制蛋白酶體任意一個(gè)亞基活性或表達(dá)的物質(zhì)；優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自以下化合物或其具有蛋白酶體抑制作用的衍生物、或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體、同分異構(gòu)體：Bortezomib、Carfilzomib、MG-132、ONX-0914、ONX-0912、CEP-18770和MLN-9708；或者優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因敲除材料；或者優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自DNA、RNA、PNA、DNA-RNA雜合體中的一種或幾種；更優(yōu)選地，所述的蛋白酶體抑制劑選自siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA、核酶中的一種或幾種；更優(yōu)選地，所述的蛋白...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：顏光美，張海鵬，朱文博，林園，龔守芳，梁劍開，蔡靜，劉春強(qiáng)，梁華娟，陶龍，張小康，
申請(專利權(quán))人：廣州威溶特醫(yī)藥科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：廣東,44