沙棘中三萜酸的提取純化方法和三萜酸及三萜皂苷和應用技術

本發明專利技術提供了一種沙棘中三萜酸的提取純化方法和三萜酸及三萜皂苷和應用，涉及提取純化技術領域。沙棘中三萜酸的提取純化方法包括如下步驟：(a)用有機溶劑提取沙棘果皮中的熊果酸、齊墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用堿溶液處理提取液，再用酸溶液處理提取液，得到熊果酸和齊墩果酸固體，將熊果酸和齊墩果酸固體溶于有機溶劑中，得到混合溶液；(c)用大孔樹脂吸附混合溶液中的熊果酸和齊墩果酸，吸附結束后用洗脫劑洗脫，濃縮，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC對粗品中的熊果酸和齊墩果酸進行分離。本發明專利技術對熊果酸和齊墩果酸的分離效果好，熊果酸的純度高達97.6％以上，齊墩果酸的純度高達98.2％以上。

Extraction and Purification of Triterpene Acids from Hippophae rhamnoides L. and Application of Triterpene Acids and Triterpene Saponins

The invention provides a method for extracting and purifying triterpene acids from seabuckthorn, triterpene acids and triterpene saponins and their applications, and relates to the technical field of extraction and purification. The extraction and purification methods of triterpene acids in Seabuckthorn include the following steps: (a) extracting ursolic acid, oleanolic acid and their derivatives from seabuckthorn pericarp with organic solvents to obtain the extract; (b) first treating the extract with alkali solution, then treating the extract with acid solution to obtain ursolic acid and oleanolic acid solids, and dissolving ursolic acid and oleanolic acid solids in organic solvents to obtain a mixed solution; (b) C) Ursolic acid and oleanolic acid in mixed solution were adsorbed by macroporous resin, then eluted and concentrated with eluent after adsorption; (d) Ursolic acid and oleanolic acid in crude product were separated by HPLC or HSCCC. The method has good separation effect for ursolic acid and oleanolic acid, and the purity of ursolic acid is over 97.6% and that of oleanolic acid is over 98.2%.

【技術實現步驟摘要】
沙棘中三萜酸的提取純化方法和三萜酸及三萜皂苷和應用
本專利技術涉及提取純化
，尤其是涉及一種沙棘中三萜酸的提取純化方法和三萜酸及三萜皂苷和應用。
技術介紹
沙棘作為一種地方特色作物品種，其防沙固沙，為當地社會經濟發展帶來良好的經濟學和社會學價值。沙棘中的三萜酸多以游離狀態或成苷或成酯的形式存在于植物中，幾乎不溶于水或難溶于水。沙棘中的三萜酸主要為熊果酸和齊墩果酸，具有保肝護肝、降低血糖和抗皮膚氧化等功效。但是目前提取純化沙棘中的熊果酸和齊墩果酸分離效果不好，純度低。有鑒于此，特提出本專利技術。
技術實現思路
本專利技術的第一目的在于提供一種沙棘中三萜酸的提取純化方法，以緩解現有技術中存在的提取純化沙棘中熊果酸和齊墩果酸的分離效果不好，純度低等技術問題。本專利技術提供的沙棘中三萜酸的提取純化方法，包括如下步驟：(a)用有機溶劑提取沙棘果皮中的熊果酸、齊墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用堿溶液處理提取液，再用酸溶液處理提取液，得到熊果酸和齊墩果酸固體，將熊果酸和齊墩果酸固體溶于有機溶劑中，得到混合溶液；(c)用大孔樹脂吸附混合溶液中的熊果酸和齊墩果酸，吸附結束后用洗脫劑洗脫，濃縮，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC對粗品中的熊果酸和齊墩果酸進行分離，得到純化的熊果酸和齊墩果酸。進一步的，所述步驟(c)中，所述大孔樹脂包括D101大孔樹脂、HPD500大孔樹脂、HPD600大孔樹脂、X-5大孔樹脂、NKA-9大孔樹脂或S-8大孔樹脂中的至少一種；優選的，所述大孔樹脂為D101大孔樹脂和X-5大孔樹脂，所述D101大孔樹脂和X-5大孔樹脂的質量比為(1-5)：(10-15)，進一步優選為(1-3)：(13-15)。進一步的，所述步驟(c)中，所述混合溶液流經大孔樹脂的流速為3-5BV/h，優選為4-5BV/h；和/或，所述洗脫劑包括乙醇或甲醇中的至少一種，優選為乙醇，進一步優選為70-90％乙醇；和/或，所述洗脫劑的pH為6-8，優選為7。進一步的，所述步驟(d)中，采用HPLC分離，所述HPLC分離條件包括：采用C18色譜柱，等度洗脫，流動相：乙腈-0.6％磷酸水溶液，兩者體積比為(75-85)：(15-25)，用三乙胺調節pH至6-8，流速：15-25mL/min，紫外檢測波長：205-215nm，柱溫：12-18℃；優選的，所述流動相：乙腈-0.6％磷酸水溶液，兩者體積比為(75-80)：(20-25)，用三乙胺調節pH至7-8，流速：15-20mL/min，紫外檢測波長：210-215nm，柱溫：15-18℃。進一步的，所述步驟(a)中，采用回流提取或超聲波提取，優選為超聲波提取；優選的，所述超聲波提取時間為20-40min，進一步優選為30-40min；優選的，所述有機溶劑包括乙醇、甲醇、丙酮或乙醚中的至少一種，進一步優選為乙醇，更進一步優選為70-90％乙醇。進一步的，所述步驟(b)中，先用1-2mol/L堿溶液調節pH至10-12，再用1-2mol/L酸溶液調節pH至2-4；優選的，所述堿溶液包括氫氧化鈉溶液或氫氧化鉀溶液中的至少一種；優選的，所述酸溶液包括硫酸、鹽酸或磷酸中的至少一種。進一步的，所述步驟(a)中，所述沙棘果皮經干燥，粉碎得到；優選的，所述沙棘果皮的干燥溫度為60-85℃，干燥時間為20-40min；進一步優選為所述干燥溫度為75-85℃，和/或，所述干燥時間為30-40min；優選的，所述沙棘果皮粉碎后的粒徑為80-100目，優選為90-100目。本專利技術的第二目的在于提供一種沙棘中三萜酸，三萜酸包括熊果酸和齊墩果酸，熊果酸和齊墩果酸分離效果好，純度高。本專利技術提供的沙棘中三萜酸由上述提取純化方法得到，所述三萜酸包括熊果酸和齊墩果酸。本專利技術的第三目的在于提供一種三萜皂苷，不僅能夠防止三萜酸的活性部位被氧化，還具有良好的溶解性，生物利用度高，在護肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗動脈粥樣硬化等方面具有優異的效果。本專利技術提供的三萜皂苷，主要由如下原料制備而成：由上述提取純化方法得到的三萜酸或上述三萜酸和多羥基糖類，所述多羥基糖類包括葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸中的至少一種；優選的，所述三萜皂苷包括單糖三萜皂苷、二糖三萜皂苷或三糖三萜皂苷中的至少一種。本專利技術的第四目的在于提供一種三萜酸或三萜皂苷在制備藥物或保健品中的應用。本專利技術將三萜酸或三萜皂苷應用于制備藥物或保健品中，可用于護肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗動脈粥樣硬化等，長期服用能夠保持體型，延緩衰老，增強機體免疫力。與現有技術相比，本專利技術具有以下有益效果：本專利技術提供的沙棘中三萜酸的提取純化方法采用有機溶劑對沙棘果皮中熊果酸、齊墩果酸及其衍生物進行充分提取，采用堿溶液和酸溶液對提取液進行處理，得到熊果酸和齊墩果酸的混合物，采用大孔樹脂富集純化熊果酸和齊墩果酸，得到純度較高的熊果酸和齊墩果酸，最后采用HPLC或HSCCC對熊果酸和齊墩果酸進行分離。采用本專利技術的方法對熊果酸和齊墩果酸的分離效果好，熊果酸的純度高達97.6％以上，齊墩果酸的純度高達98.2％以上。本專利技術提供的沙棘中三萜酸包括熊果酸和齊墩果酸，熊果酸和齊墩果酸分離效果好，純度高。本專利技術提供的三萜皂苷，不僅能夠防止三萜酸的活性部位被氧化，還具有良好的溶解性，生物利用度高，在護肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗動脈粥樣硬化等方面具有優異的效果。本專利技術將三萜酸或三萜皂苷應用于制備藥物或保健品中，可用于護肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗動脈粥樣硬化等，長期服用能夠保持體型，延緩衰老，增強機體免疫力。附圖說明為了更清楚地說明本專利技術具體實施方式或現有技術中的技術方案，下面將對具體實施方式或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖是本專利技術的一些實施方式，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。圖1為本專利技術的熊果酸的結構式；圖2為本專利技術的齊墩果酸的結構式；圖3為本專利技術的熊果酸三糖皂苷的結構式；圖4為本專利技術的齊墩果酸三糖皂苷的結構式。具體實施方式下面將結合附圖對本專利技術的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例是本專利技術一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本專利技術中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本專利技術保護的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規產品。根據本專利技術的第一個方面，本專利技術提供了一種沙棘中三萜酸的提取純化方法，包括如下步驟：(a)用有機溶劑提取沙棘果皮中的熊果酸、齊墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用堿溶液處理提取液，再用酸溶液處理提取液，得到熊果酸和齊墩果酸固體，將熊果酸和齊墩果酸固體溶于有機溶劑中，得到混合溶液；(c)用大孔樹脂吸附混合溶液中的熊果酸和齊墩果酸，吸附結束后用洗脫劑洗脫，濃縮，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC對粗品中的熊果酸和齊墩果酸進行分離，得到純化的熊果酸和齊墩果酸。在步驟(a)中，由于沙棘果皮中的熊果酸、齊墩果酸及其衍生物幾乎不溶于水，而熊果酸、齊墩果酸及其衍生物在有機溶劑中的溶解性良好，所以本文檔來自技高網...

【技術保護點】
1.一種沙棘中三萜酸的提取純化方法，其特征在于，包括如下步驟：(a)用有機溶劑提取沙棘果皮中的熊果酸、齊墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用堿溶液處理提取液，再用酸溶液處理提取液，得到熊果酸和齊墩果酸固體，將熊果酸和齊墩果酸固體溶于有機溶劑中，得到混合溶液；(c)用大孔樹脂吸附混合溶液中的熊果酸和齊墩果酸，吸附結束后用洗脫劑洗脫，濃縮，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC對粗品中的熊果酸和齊墩果酸進行分離，得到純化的熊果酸和齊墩果酸。

【技術特征摘要】
1.一種沙棘中三萜酸的提取純化方法，其特征在于，包括如下步驟：(a)用有機溶劑提取沙棘果皮中的熊果酸、齊墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用堿溶液處理提取液，再用酸溶液處理提取液，得到熊果酸和齊墩果酸固體，將熊果酸和齊墩果酸固體溶于有機溶劑中，得到混合溶液；(c)用大孔樹脂吸附混合溶液中的熊果酸和齊墩果酸，吸附結束后用洗脫劑洗脫，濃縮，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC對粗品中的熊果酸和齊墩果酸進行分離，得到純化的熊果酸和齊墩果酸。2.根據權利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(c)中，所述大孔樹脂包括D101大孔樹脂、HPD500大孔樹脂、HPD600大孔樹脂、X-5大孔樹脂、NKA-9大孔樹脂或S-8大孔樹脂中的至少一種；優選的，所述大孔樹脂為D101大孔樹脂和X-5大孔樹脂，所述D101大孔樹脂和X-5大孔樹脂的質量比為(1-5)：(10-15)，進一步優選為(1-3)：(13-15)。3.根據權利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(c)中，所述混合溶液流經大孔樹脂的流速為3-5BV/h，優選為4-5BV/h；和/或，所述洗脫劑包括乙醇或甲醇中的至少一種，優選為乙醇，進一步優選為70-90％乙醇；和/或，所述洗脫劑的pH為6-8，優選為7。4.根據權利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取純化方法，其特征在于，所述步驟(d)中，采用HPLC分離，所述HPLC分離條件包括：采用C18色譜柱，等度洗脫，流動相：乙腈-0.6％磷酸水溶液，兩者體積比為(75-85)：(15-25)，用三乙胺調節pH至6-8，流速：15-25mL/min，紫外檢測波長：205-215nm，柱溫：12-18℃；優選的，所述流動相：乙腈-0.6％磷酸水溶液，兩者體積比為(75-80)：(20-25)，用三乙胺調節pH至7-8，流速：...

【專利技術屬性】
技術研發人員：龔晨，于雪，李婷，吳鵬，
申請(專利權)人：青海清華博眾生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：青海,63