一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝制造技術

本發明專利技術公開了一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝，在浸潤后的虎杖粉中加入酒酵母、糖化酶、黑曲酶，在28～50℃的容器內，恒溫發酵6～24h，使白藜蘆醇的類似物轉化成白藜蘆醇；將發酵好的材料進行你留加壓低溫滲流；然后經過濃縮回收乙醇、溶解去雜、氧化鋁柱層析、結晶與重結晶，得到純度為99％以上的白藜蘆醇。本發明專利技術將白藜蘆醇的純度提高到99％以上，將產品收率從0.5％?0.9％提高到1.2％以上，并將白藜蘆醇產品白度達到80度以上，提高產品質量，真正應用于工業生產，可縮短生產周期，提高生產效率。

A preparation process of 99% resveratrol from Polygonum cuspidatum

The invention discloses a preparation process for preparing 99% resveratrol from Polygonum cuspidatum. Saccharomyces cerevisiae, glucoamylase and melasome are added to the soaked powder of Polygonum cuspidatum, and the resveratrol analogues are converted into Resveratrol by constant temperature fermentation for 6-24 hours in a container at 28-50 C. The fermented material is then concentrated and recycled into ethanol and dissolved. Resveratrol with purity over 99% was obtained by column chromatography, crystallization and recrystallization of impurities and alumina. The invention improves the purity of resveratrol to over 99%, the yield of resveratrol from 0.5%0.9% to over 1.2%, and the whiteness of resveratrol product to over 80 degrees, improves the product quality, and can be applied in industrial production, shortens the production cycle and improves the production efficiency.

【技術實現步驟摘要】
一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝
本專利技術屬于生物化學領域，具體來說，是從虎杖中提取白藜蘆醇的工藝。
技術介紹
白藜蘆醇是活性較強的多酚類化合物，是一種重要的植物抗毒素，對抑制癌細胞、降低血脂、防治心血管疾病、抗氧化、延緩衰老等作用比較明顯，被喻為繼紫杉醇之后的又一新的綠色抗癌藥物。在1939年首次發現白藜蘆醇，20世紀70年代首次發現葡萄中含有這種物質，后來人們發現虎杖、花生、桑椹等植物中也含有這種成分。天然白藜蘆醇是一種天然活性成分，它能以游離態(順式、反式)和糖苷結合態(順式、反式)2種形式在植物(如中藥材虎杖)中分布及生物合成，且均具有抗氧化效能。目前國內白藜蘆醇生產企業大多數采用虎杖為原料進行提取，其采用的工藝路線是：虎杖藥材生→物轉化→醇提濃縮→活性炭脫色或萃取→干柱柱層析(硅膠或氧化鋁)→結晶與重結晶。此工藝路線的最終產品白藜蘆醇收率一般只有0.5-0.9％，顏色略帶米黃或灰白色，白度在70度左右，白藜蘆醇的純度均在97-98％，市場上當成98％白藜蘆醇銷售。其價格與99％有較大的差距，如何提高收率和產品含量，同時把產品顏色白度提高到80度以上。是本領域技術人員和企業期待解決的問題。
技術實現思路
本專利技術目的是旨在提供了一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝，將白藜蘆醇的純度提高到99％以上，將產品收率從0.5％-0.9％提高到1.2％以上，并將白藜蘆醇產品白度達到80度以上，提高產品質量，真正應用于工業生產，可縮短生產周期，提高生產效率。為實現上述技術目的，本專利技術采用的技術方案如下：一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝，包括如下步驟：(1)酶轉化：加水浸潤虎杖粉；用專用酶將浸潤后的虎杖粉置于溫度控制在28～50℃的容器內，恒溫發酵6～24h，使白藜蘆醇的類似物轉化成白藜蘆醇，專用酶為酒酵母+糖化酶+黑曲酶；(2)逆流加壓低溫滲漏：發酵好的虎杖材料均勻裝入滲漏柱，徑高比1:4-5，總共加入虎杖重量3～5倍的乙酸乙酯和石油醚混合試劑，慢慢通過虎杖層，得滲漏液；(3)濃縮與回收乙醇；將虎杖滲漏液濃縮回收試劑至無試劑，得浸膏；(4)溶解去雜；采用60-80％乙醇常溫溶解浸膏，過濾，得濾液；(5)層析：將濾液進氧化鋁層析柱，待全部液體進完氧化鋁柱以后，再用80-95％乙醇洗脫，至檢測沒有白藜蘆醇時為止；(6)結晶與重結晶；(7)將結晶低溫真空干燥得成品，白藜蘆醇≥99％。優選的，酒酵母、糖化酶、黑曲酶的配比為2:2:1。優選的，乙酸乙酯和石油醚的重量配比為6-4:1。作為本專利技術一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝的一種優選，在步驟(1)之前對虎杖根粉進行干燥，并粉碎到90％以上能通過20目篩。作為本專利技術一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝的另一種優選，所述專用酶與所述虎杖粉的投料比為1：99-101。作為本專利技術一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝的又一種優選，所述虎杖粉與所述水的投料比為10：2-3。作為本專利技術一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝的再一種優選，步驟(1)中的發酵溫度為45°，恒溫發酵15小時。作為本專利技術一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝的又一種優選，在步驟(5)中，將濾液進氧化鋁層析柱，自有液體流出時開始分段收集，自流出紅至黑色液體時更換氧化鋁柱；待全部液體進完氧化鋁柱以后，再用用80-95％乙醇洗脫，至檢測沒有白藜蘆醇時為止。有益效果：(1)提高了成品98％白藜蘆醇的產量，將產量從0.5～0.9％提高到1.2％以上，相比提高0.3～0.7％，即每噸同等原料可多得99％白藜蘆醇3～7kg，創造新的價值4800～10200元。(2)提高了99％白藜蘆醇產品的色澤，去除了普通品種所帶的米黃色至灰白色，使最終產品白度達到80％以上的高品質白藜蘆醇。(3)減少了萃取這一步，簡化了生產操作與生產環節，縮短生產周期23％，使得大生產容易控制和實現，提高了勞動安全與保護。具體實施方式為了使本領域的技術人員可以更好地理解本專利技術，下面結合實施例對本專利技術技術方案進一步說明。實施例1(1)取干燥的虎杖根500kg，粉碎到通過20目篩≥90％；(2)酶轉化：加水150kg浸潤虎杖粉，加入2kg酒酵母、2kg糖化酶、1kg黑曲酶至浸潤后的虎杖粉中，攪拌均勻，置于溫度控制在45℃的容器內，恒溫發酵15小時，使白藜蘆醇的類似物轉化成白藜蘆醇；(3)逆流加壓低溫滲漏：發酵好的虎杖材料均勻裝入滲漏柱，徑高比1:4，總共加入虎杖重量4倍的乙酸乙酯和石油醚混合試劑，慢慢通過虎杖層，得滲漏液；其中乙酸乙酯和石油醚的配比為6:1；(4)濃縮與回收乙醇；將虎杖滲漏液濃縮回收試劑至無試劑，得浸膏；(5)溶解去雜；采用70％乙醇常溫溶解浸膏，攪拌30分鐘，過濾，得濾液；(6)層析：將濾液進氧化鋁層析柱，自有液體流出時開始分段收集，自流出紅至黑色液體時更換氧化鋁柱；待全部液體進完氧化鋁柱以后，再用用85％乙醇洗脫，至檢測沒有白藜蘆醇時為止；(7)結晶與重結晶：將氧化鋁柱上的洗脫液濃縮至醇濃度至45％時進行結晶與重結晶，20度靜置10小時，然后過濾，重結晶；(8)將結晶低溫真空干燥得產品6.15kg，經檢測白藜蘆醇含量為99.3％，白度82度。實施例2(1)取干燥的虎杖根500kg，粉碎到通過20目篩≥90％；(2)酶轉化：加水145kg浸潤虎杖粉，加入2kg酒酵母、2kg糖化酶、1kg黑曲酶至浸潤后的虎杖粉中，攪拌均勻，置于溫度控制在42℃的容器內，恒溫發酵17小時，使白藜蘆醇的類似物轉化成白藜蘆醇；(3)逆流加壓低溫滲漏：發酵好的虎杖材料均勻裝入滲漏柱，徑高比1:5，總共加入虎杖重量5倍的乙酸乙酯和石油醚混合試劑，慢慢通過虎杖層，得滲漏液；其中乙酸乙酯和石油醚的配比為4:1；(4)濃縮與回收乙醇；將虎杖滲漏液濃縮回收試劑至無試劑，得浸膏；(5)溶解去雜；采用70％乙醇常溫溶解浸膏，攪拌30分鐘，過濾，得濾液；(6)層析：將濾液進氧化鋁層析柱，自有液體流出時開始分段收集，自流出紅至黑色液體時更換氧化鋁柱；待全部液體進完氧化鋁柱以后，再用用85％乙醇洗脫，至檢測沒有白藜蘆醇時為止；(7)結晶與重結晶：將氧化鋁柱上的洗脫液濃縮至醇濃度至38％時進行結晶與重結晶，20度靜置15小時，然后過濾，重結晶；(8)將結晶低溫真空干燥得產品6.15kg，經檢測白藜蘆醇含量為99.3％，白度82度。以上對本專利技術提供的一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝進行了詳細介紹。具體實施例的說明只是用于幫助理解本專利技術的方法及其核心思想。應當指出，對于本
的普通技術人員來說，在不脫離本專利技術原理的前提下，還可以對本專利技術進行若干改進和修飾，這些改進和修飾也落入本專利技術權利要求的保護范圍內。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
1.一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝，其特征在于，包括如下步驟：(1)酶轉化：加水浸潤虎杖粉；用專用酶將浸潤后的虎杖粉置于溫度控制在28～50℃的容器內，恒溫發酵6～24h，使白藜蘆醇的類似物轉化成白藜蘆醇，專用酶為酒酵母、糖化酶、黑曲酶；(2)逆流加壓低溫滲漏：發酵好的虎杖材料均勻裝入滲漏柱，徑高比1:4?5，總共加入虎杖重量3～5倍的乙酸乙酯和石油醚混合試劑，慢慢通過虎杖層，得滲漏液；(3)濃縮與回收乙醇；將虎杖滲漏液濃縮回收試劑至無試劑，得浸膏；(4)溶解去雜；采用60?80％乙醇常溫溶解浸膏，過濾，得濾液；(5)層析：將濾液進氧化鋁層析柱，待全部液體進完氧化鋁柱以后，再用80?95％乙醇洗脫，至檢測沒有白藜蘆醇時為止；(6)結晶與重結晶；(7)將結晶低溫真空干燥得成品，白藜蘆醇≥99％。

【技術特征摘要】
1.一種從虎杖中制備純度99％白藜蘆醇的制備工藝，其特征在于，包括如下步驟：(1)酶轉化：加水浸潤虎杖粉；用專用酶將浸潤后的虎杖粉置于溫度控制在28～50℃的容器內，恒溫發酵6～24h，使白藜蘆醇的類似物轉化成白藜蘆醇，專用酶為酒酵母、糖化酶、黑曲酶；(2)逆流加壓低溫滲漏：發酵好的虎杖材料均勻裝入滲漏柱，徑高比1:4-5，總共加入虎杖重量3～5倍的乙酸乙酯和石油醚混合試劑，慢慢通過虎杖層，得滲漏液；(3)濃縮與回收乙醇；將虎杖滲漏液濃縮回收試劑至無試劑，得浸膏；(4)溶解去雜；采用60-80％乙醇常溫溶解浸膏，過濾，得濾液；(5)層析：將濾液進氧化鋁層析柱，待全部液體進完氧化鋁柱以后，再用80-95％乙醇洗脫，至檢測沒有白藜蘆醇時為止；(6)結晶與重結晶；(7)將結晶低溫真空干燥得成...

【專利技術屬性】
技術研發人員：李冠枚，
申請(專利權)人：廣東冠龍生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：廣東,44