一種紫杉醇膠束制備工藝及產物制造技術

本發明專利技術屬于醫藥制劑技術領域，具體為一種紫杉醇膠束制備工藝及產物。本發明專利技術的紫杉醇膠束制備工藝路線簡單，生產成本低。所制備的紫杉醇膠束的體外穩定性較高，在室溫下保持穩定的時間超過12小時，滿足藥物治療的要求。血液穩定性較高、粒徑較小，更易發揮ERP效應。

A Paclitaxel Micelle Preparation Process and Products

【技術實現步驟摘要】
一種紫杉醇膠束制備工藝及產物
本專利技術屬于醫藥制劑
，具體涉及一種紫杉醇膠束制備工藝及產物。
技術介紹
紫杉醇分子式為：C47H51NO14，分子量853.9，熔點213～216℃，具有高度親脂性，不溶于水，是最先從紅豆杉屬植物中分離得到的一種高效、低毒、廣譜的天然抗癌藥物。它是紅豆杉屬植物中的一種復雜的天然次生代謝物，分子結構見下式。紫杉醇是一種微管特異性的具有較高抗癌活性的藥物，銷量常年名列抗腫瘤新藥的榜首，并以20％的速度遞增。1977年，HorwitZ發現紫杉醇抗癌機理在于能夠與微管蛋白結合，促進微管蛋白聚合裝配成微管二聚體，從而抑制細胞中微管的正常生理解聚，使細胞有絲分裂停止在G2期及M期，阻止了癌細胞的快速繁殖。進一步研究發現紫杉醇能夠激活巨噬細胞，導致腫瘤壞死因子受體的減少及其釋放，殺傷或抑制腫瘤細胞；紫杉醇可以誘導細胞凋亡，引起細胞程序性死亡；紫杉醇還能抑制腫瘤細胞的遷移。臨床研究表明，紫杉醇具有廣譜而高效的抗癌活性，對于治療卵巢癌、乳腺癌、子宮癌、胃癌等等療效突出，近來的研究發現它對類風濕性關節炎、老年癡呆癥等亦有一定療效。由于紫杉醇難溶于水，在目前的臨床應用中通常把紫杉醇溶于聚氧乙烯蓖麻油(cremophorEL)與無水乙醇混合溶媒中以增加其水溶性。但乙醇具有一定的細胞毒性，而聚氧乙烯蓖麻油在體內降解時釋放組胺，導致不同程度的過敏反應，亦可引起神經細胞內顆粒釋放及脫髓鞘改變而加重紫杉醇的外周神經毒性。為降低紫杉醇制劑的毒性提高其療效，近年來臨床上陸續開發了紫杉醇的新劑型。其中不含聚氧乙烯蓖麻油注射紫杉醇白蛋白納米混懸液(ABI-007)已在國內外上市。具有不用抗過敏預處理、療效較好、毒性較低等特點；現正在國內進行臨床研究我國研發的紫杉醇脂質體已開始在臨床應用而紫杉醇的前體藥物(DHA-PTX)和聚合物劑型genexol-PM及xyotax也正在臨床前和臨床Ⅰ-Ⅲ期研究中，顯示了良好的前景。但近期的研究發現，無論是由高分子量聚合物形成的粒徑較大的聚合物膠束，還是由低分子量聚合物形成的粒徑較小的聚合物膠束，具有血液穩定性較差的缺點，膠束在進入血液后幾乎馬上解體并釋放攜帶的藥物，最終兩種膠束攜帶的藥物在體內的分布幾乎沒有區別，沒有展示出ERP效應。SavicR等人的研究發現，紫杉醇膠束進入血液后通常在5分鐘內就有超過90％的藥物釋放并往組織擴散(見Langmuir2006,22:3570-8.《Assessmentoftheintegrityofpoly(caprolactone)-b-poly(ethyleneoxide)micellesunderbiologicalconditions:afluorogenic-basedapproach.》)。這一結果與設想由膠束粒子攜帶藥物，到達腫瘤部位再通過EPR效應釋放藥物的理想狀態相去甚遠，即非成熟釋放(Prematurerelease)。導至非成熟釋放的原因一方面由于膠束經過血液稀釋后的濃度低于其臨界膠束濃度(CMC濃度)導致膠束解體，另一方面血液中大量存在的蛋白質會和膠束發生作用導致其團聚并釋放藥物。因此，在設計靜脈注射腫瘤靶向納米載體時必須首先考慮其血液穩定性，只有在提高血液穩定性的前提下才有望利用EPR效應提高藥物的靶向性。現有的紫杉醇膠束的另一個不足之處在于工藝條件較復雜，給大規模工業化增加了難度。例如，蘭州大學劉偉生等人專利技術的紫杉醇-聚合物載藥膠束制備工藝(專利申請號201110255867.8)需要采用恒溫振蕩的工藝條件；北京大學呂萬良等人專利技術的一種紫杉醇納米膠束及其應用(申請號：201110044677.1)在制備過程中需要使用緩沖液保持反應環境的PH值穩定。還有的紫杉醇膠束中含有一定量的乙醇，依然具有一定的細胞毒性。例如山東大學的李凌冰等人專利技術了一種紫杉醇混合膠束制劑及其制備方法(專利申請號201110139712.8)，但是在其混合膠束中依然含有乙醇。
技術實現思路
本專利技術的目的在于克服上述現有技術的不足，提供一種新型的紫杉醇膠束制備工藝，以mPEG-PLA-谷氨酸為膠束載體制備的紫杉醇膠束制劑。采用本專利技術提供的工藝得到的紫杉醇膠束含微量乙醇，其穩定性、平均粒徑等主要指標全面優于現有的紫杉醇膠束。本專利技術提供的一種紫杉醇膠束制劑制備工藝，采用新型表面活性劑mPEG-PLA-谷氨酸為膠束載體，采用薄膜水化法制備紫杉醇膠束制劑。mPEG-PLA-谷氨酸分子結構式如下：其中，a＝11-455，b＝3-300。優選的，本專利技術所述mPEG-PLA-谷氨酸中，聚乙二醇甲醚嵌段的分子量為1000～3000；聚丙交酯嵌段的分子量優選為500～5000。本專利技術中，mPEG-PLA-谷氨酸無明顯的致癌性，無生殖毒性，無致畸、致突變性，在體內可降解為乳酸、PEG、谷氨酸，均可直接排出體外。對小鼠進行急性毒性試驗，小鼠的LD50>2.00g/kg；長毒試驗中，1.00g/kg劑量，1次/天，每周連續給藥2天，停藥5天，連續給藥13周后，恢復4周后觀察，未見明顯毒副作用。本專利技術另一目的在于提供根據所述紫杉醇膠束制劑制備工藝得到的產物，即紫杉醇膠束制劑。所述紫杉醇膠束制劑中殘留的乙醇或乙腈含量少于10ppm，且當根據工藝的要求調整mPEG-PLA-賴氨酸的平均分子量時，所述紫杉醇膠束制劑的平均粒徑在21～41nm之間。優選的，本專利技術中所述紫杉醇膠束制劑中殘留的乙醇或乙腈含量少于10ppm。與現有技術相比，本專利技術具有以下有益效果：1，制備工藝簡單，膠束制劑中無需添加其他輔料亦能保持所制備紫杉醇膠束制劑良好的性能，降低了生產成本。2，采用本工藝制備的紫杉醇膠束制劑的性能優于現有技術，更易發揮ERP效應。包括體外穩定性較高，在室溫下保持穩定的時間超過12小時，低溫下穩性超過168小時；血液穩定性較高，粒穩定性較好等。3，由于選用mPEG-PLA-谷氨酸為載藥輔料，無需進行特別的處理即可以將所述紫杉醇膠束制劑中殘留的有機溶劑控制在10ppm以下。具體實施方式下面結合實施例對本專利技術做詳細的說明，本實施例在以本專利技術技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但本專利技術的保護范圍不限于下述的實施例。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。實施例(1-7)一種紫杉醇膠束制劑的制備工藝，采用薄膜水化法，其包括下列步驟。①按照紫杉醇與mPEG-PLA-谷氨酸不同的投料比(見表1)稱取原料。其中，原料紫杉醇(CAS33069-62-4)由西安瑞林生物科技有限公司生產，純度大于95％，mPEG-PLA-谷氨酸，由專利技術人按照專利號PCT-CN-2013000453所述的工藝自行制備；②將上述原料投入容器中，加入乙醇或乙腈等有機溶劑至完全溶解。30-50℃旋轉蒸發2h至有機溶劑蒸干為止，10-60℃下真空干燥＞12h去除殘留的有機溶劑，得到含紫杉醇的聚合物混合膜。③混合膜于40-60℃水浴至透明狀，加入相同溫度預熱的超純水或生理鹽水、磷酸鹽緩沖液，充分振搖水化，得透明的載藥膠束溶液。④將所述載藥膠束溶液用0.45μm微孔濾膜過濾。實施例1-7分別選擇不同的投料比，以及分別選用不同嵌段分子量的mPEG-PLA-谷氨酸本文檔來自技高網...

【技術保護點】
1.一種紫杉醇膠束制劑制備工藝，其特征在于，包含以下步驟：①按照紫杉醇與mPEG?PLA?賴氨酸不同的投料比稱取原料；②將上述原料投入容器中，加入有機溶劑至完全溶解。30?50℃旋轉蒸發2h至有機溶劑蒸干為止，10?60℃下真空干燥＞12h去除殘留的有機溶劑，得到含紫杉醇的聚合物混合膜；③所述混合膜于40?60℃水浴至透明狀，加入相同溫度預熱的超純水或生理鹽水、磷酸鹽緩沖液，充分振搖水化，得透明的載藥膠束溶液；④所述載藥膠束溶液用0.45μm微孔濾膜過濾，得到紫杉醇膠束制劑。

【技術特征摘要】
1.一種紫杉醇膠束制劑制備工藝，其特征在于，包含以下步驟：①按照紫杉醇與mPEG-PLA-賴氨酸不同的投料比稱取原料；②將上述原料投入容器中，加入有機溶劑至完全溶解。30-50℃旋轉蒸發2h至有機溶劑蒸干為止，10-60℃下真空干燥＞12h去除殘留的有機溶劑，得到含紫杉醇的聚合物混合膜；③所述混合膜于40-60℃水浴至透明狀，加入相同溫度預熱的超純水或生理鹽水、磷酸鹽緩沖液，充分振搖水化，得透明的載藥膠束溶液；④所述載藥膠束溶液用0.45μm微孔濾膜過濾，得到紫杉醇膠束制劑。2.如權利要求1所述的紫杉醇膠束制劑制備工藝，其特征在于：mPEG-PLA-谷氨酸分子結構...

【專利技術屬性】
技術研發人員：顧曉軍，滕鑫，
申請(專利權)人：上海珀理玫化學科技有限公司，
類型：發明
國別省市：上海,31