一種適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架制造技術(shù)

本實(shí)用新型專利技術(shù)公開了一種適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架，包括環(huán)形磁鐵、板體和背板，其中：所述板體的正面設(shè)置有96個孔，它們的位置和孔徑對應(yīng)于96孔PCR板；在板體的背面，96個正面孔的下方設(shè)有孔徑和深度分別與環(huán)形磁鐵的外徑和厚度相配合的96個孔，96個環(huán)形磁鐵分別放置在這96個背面孔中，而環(huán)形磁鐵的外徑大于正面孔的孔徑；所述背板覆蓋于放入環(huán)形磁鐵后的板體的背面，將環(huán)形磁鐵固定其中。該磁力架能夠?qū)Ω黝惔胖檫M(jìn)行高效分離，通過將磁珠純化與移液自動化工作站相結(jié)合的方式對測序PCR產(chǎn)物進(jìn)行高通量快速的純化，節(jié)約人力，并大大縮短測序時間。

A magnetic frame for Sanger sequencing product purification

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架
本技術(shù)涉及基因序列分析技術(shù)，具體涉及一種適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架，應(yīng)用于自動化工作站和倒扣離心技術(shù)的96孔板測序產(chǎn)物的純化。
技術(shù)介紹
DNA序列分析技術(shù)(簡稱測序技術(shù))是現(xiàn)代生命科學(xué)研究的核心技術(shù)之一，其中Sanger法測序也稱一代測序，具有閱讀長度長、精確度高等二代測序(深度測序)技術(shù)目前仍無法超越的優(yōu)點(diǎn)，是目前使用最普遍的、具有金標(biāo)準(zhǔn)的DNA測序技術(shù)。在測序PCR反應(yīng)中，會產(chǎn)生一系列長短不一并且在3’末端帶有熒光標(biāo)記的PCR產(chǎn)物。如何快速純化測序PCR產(chǎn)物是測序技術(shù)研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。目前測序公司或?qū)嶒?yàn)室常用的純化方法是酒精/醋酸鈉沉淀法和純化柱法，其中沉淀純化法純化時間較長，純化柱法雖然耗時短，但是價格昂貴，一般不適用于大規(guī)模樣品純化。磁珠法純化快速簡捷，回收率高，能有效去除影響測序結(jié)果的熒光染料，被人們越來越多地應(yīng)用，但是在純化過程中需要多次反復(fù)加液和洗脫，從而增加了工作量。如何將磁珠純化與移液自動化工作站相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)測序PCR產(chǎn)物高通量快速的純化，節(jié)約人力并縮短測序時間是目前需要解決的問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本技術(shù)的目的在于提供一種適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架，既能夠滿足BeckmanFX自動化工作站的應(yīng)用要求，同時又能在離心機(jī)中離心使用。本技術(shù)的技術(shù)方案如下：一種適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架，其特征在于，包括環(huán)形磁鐵、板體和背板，其中：所述板體的正面設(shè)置有96個孔，它們的位置和孔徑對應(yīng)于96孔PCR板；在板體的背面，96個正面孔的下方設(shè)有孔徑和深度分別與環(huán)形磁鐵的外徑和厚度相配合的96個孔，96個環(huán)形磁鐵分別放置在這96個背面孔中，而環(huán)形磁鐵的外徑大于正面孔的孔徑；所述背板覆蓋于放入環(huán)形磁鐵后的板體的背面，將環(huán)形磁鐵固定其中。上述磁力架中，所述板體的96個正面孔主要對96孔PCR板起支撐作用，而96個背面孔主要用于鑲嵌環(huán)形磁鐵。所述背板主要對環(huán)形磁鐵起防護(hù)作用。一般的，所述背板通過螺旋釘與板體固定連接。優(yōu)選的，所述板體的正面孔的孔徑為7.40～8.00mm，深度為5.5～6.00mm；背面孔的孔徑為7.5～8.0mm，深度為3.5～4.5mm。所述環(huán)形磁鐵為永磁體。優(yōu)選的，環(huán)形磁鐵的外徑為7.5～8.0mm，內(nèi)徑為3.5～4.0mm，厚度為1.8～2.2mm。所述板體和背板分別為塑料板和合金板。本技術(shù)的磁力架適用于Sanger測序產(chǎn)物的純化，能夠?qū)Ω黝惔胖檫M(jìn)行高效分離，將96孔PCR板置于該磁力架上，平均3分鐘即可完成磁分離的過程，每次磁分離結(jié)束后進(jìn)行清洗或洗脫等操作時，又可以利用倒扣離心技術(shù)去除液體，從而達(dá)到快速分離純化測序產(chǎn)物的目的，節(jié)約時間，提高效率，可廣泛用于生物
利用本技術(shù)的磁力架，通過將磁珠純化與移液自動化工作站相結(jié)合的方式對測序PCR產(chǎn)物進(jìn)行高通量快速的純化，對DNA測序技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)，實(shí)現(xiàn)半自動化高通量的操作，不但節(jié)約了人力，而且大大縮短了測序時間。附圖說明圖1為本技術(shù)磁力架的整體結(jié)構(gòu)頂面示意圖；圖2為本技術(shù)磁力架的底面示意圖；圖3為本技術(shù)磁力架中，環(huán)形磁鐵嵌入板體背面孔中的結(jié)構(gòu)示意圖，其中(a)為板體中孔及嵌入環(huán)形磁鐵的剖視圖，(b)為板體中孔及嵌入環(huán)形磁鐵的立體圖；圖中，1-板體，2-背板，3-環(huán)形磁鐵。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖，通過實(shí)施例對本技術(shù)的96孔板磁力架進(jìn)行詳細(xì)描述。如圖1所示的磁力架是為了解決96孔板測序產(chǎn)物在BeckmanFX工作站上設(shè)計(jì)應(yīng)用的配套裝置，其包括板體1、背板2和環(huán)形磁鐵3，參見圖3，板體1的正面設(shè)有等距矩陣式分布的96個孔，孔徑為7.45mm，深度為6.00mm對96孔PCR板起支撐作用；在板體1背面，相應(yīng)地設(shè)有96個直徑較大的孔，其中鑲嵌環(huán)形磁鐵3；背面孔的孔徑和深度與環(huán)形磁鐵3的外徑和厚度相配合，背面孔的孔徑為8.00mm，深度為4.00mm，環(huán)形磁鐵的外徑為8.00mm，內(nèi)徑為4.00mm，厚度為2.00mm；背板2通過螺絲釘固定連接在板體1背面(見圖2)，對背面孔中的環(huán)形磁鐵起防護(hù)作用。利用上述磁力架對測序PCR產(chǎn)物進(jìn)行高通量快速純化的方法如下：(1)當(dāng)測序產(chǎn)物在96孔PCR板中完成后，通過工作站加入磁珠和酒精，混合均勻后，將裝有磁珠混合液的96孔PCR板放入磁力架的正面孔中進(jìn)行磁分離，在磁場作用下，靜置3分鐘后，樣品中的磁性材料富集于環(huán)形磁鐵周圍的管壁上；(2)通過96孔板離心機(jī)把磁力架和96孔PCR板倒扣在吸水紙上，利用低速×100g的離心力瞬時離心將上清去掉；(3)把帶有96孔PCR板的磁力架再放到自動化工作站上加入80μL濃度為85％的酒精靜置30sec，然后除去上清液；(4)重復(fù)步驟(3)一次，然后除去上清液；(5)從磁力架上取下96孔PCR板，放置到50℃的96孔加熱塊上30sec到1min；(6)再放到工作站上加入30μL滅菌的去離子水，振蕩混勻，瞬時離心，再放到磁力架上，把上清液轉(zhuǎn)移到一塊新的96孔PCR板，即可達(dá)到分離純化目的。需要注意的是，公布實(shí)施例的目的在于進(jìn)一步理解本技術(shù)，但是本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以理解：在不脫離本技術(shù)及所附屬權(quán)利要求的精神和范圍內(nèi)，各種替換和修改都是可能的。因此，本技術(shù)不應(yīng)局限于實(shí)施例所公開的內(nèi)容，本技術(shù)要求保護(hù)的范圍以權(quán)利要求書界定的范圍為準(zhǔn)。本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架，其特征在于，包括環(huán)形磁鐵、板體和背板，其中：所述板體的正面設(shè)置有96個孔，它們的位置和孔徑對應(yīng)于96孔PCR板；在板體的背面，96個正面孔的下方設(shè)有孔徑和深度分別與環(huán)形磁鐵的外徑和厚度相配合的96個孔，96個環(huán)形磁鐵分別放置在這96個背面孔中，而環(huán)形磁鐵的外徑大于正面孔的孔徑；所述背板覆蓋于放入環(huán)形磁鐵后的板體的背面，將環(huán)形磁鐵固定其中。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架，其特征在于，包括環(huán)形磁鐵、板體和背板，其中：所述板體的正面設(shè)置有96個孔，它們的位置和孔徑對應(yīng)于96孔PCR板；在板體的背面，96個正面孔的下方設(shè)有孔徑和深度分別與環(huán)形磁鐵的外徑和厚度相配合的96個孔，96個環(huán)形磁鐵分別放置在這96個背面孔中，而環(huán)形磁鐵的外徑大于正面孔的孔徑；所述背板覆蓋于放入環(huán)形磁鐵后的板體的背面，將環(huán)形磁鐵固定其中。2.如權(quán)利要求1所述的適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架，其特征在于，所述背板通過螺旋釘與板體固定連接。3.如權(quán)利要求1所述的適用于Sanger測序產(chǎn)物純化的磁力架，其特征在于，所述板體...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：董志，李桂瀾，李輝，杜明，
申請(專利權(quán))人：北京大學(xué)，
類型：新型
國別省市：北京,11