鑒定并表征了ＲＡＥＴ１／ＵＬＢＰ家族蛋白質(zhì)的一個新成員（ＲＡＥＴ１Ｇ），其顯示以高親和力與ＵＬ１６和ＮＫＧ２Ｄ受體結(jié)合。ＲＡＥＴ１Ｇ在正常組織中顯示受限制的表達(dá)但在腫瘤中顯示高水平表達(dá)，在癌細(xì)胞中可被不同剪接以產(chǎn)生可溶性蛋白質(zhì)。ＲＡＥＴ１Ｇ還在炎性疾病如腹部疾病中上調(diào)。ＲＡＥＴ１Ｇ可用作包括癌癥病癥和炎性病癥的疾病病癥的新標(biāo)記物。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】
本專利技術(shù)涉及與細(xì)胞表面受體NKG2D和病毒配體UL16相互作用的蛋白質(zhì)配體。
技術(shù)介紹
C型凝集素樣受體NKG2D在小鼠和人中有大量已定義的I類MHC相關(guān)配體。鼠配體包括視黃酸早期轉(zhuǎn)錄物1(Rae-1)家族、次要組織相容性抗原H60和最近鑒定的MULT1(Cerwenka等，(2000)Immunity12，721-727；Diefenbach等，(2000)Nat.Immunol.1，119-126；Carayannopoulos等(2002)，J.Immunol 169，4079-4083)。人配體包括I類MHC鏈相關(guān)基因MICA和MICB(Bauer等(1999)Science 285，727-729)和UL16結(jié)合蛋白ULBP家族(Cosman等(2001)Immunity14，123-133)。MIC蛋白具有三個結(jié)構(gòu)上與典型的I類MHC分子相似的α結(jié)構(gòu)域，但它們不與肽結(jié)合或與β2微球蛋白結(jié)合。H60、ULBP1-3和Rae-1家族只有MHC樣α1α2結(jié)構(gòu)域。人ULBP和鼠Rae-1蛋白與其他NKG2D配體不同，它們通過GPI錨定在膜上而不是具有跨膜(TM)區(qū)。NKG2D以同型二聚體存在于細(xì)胞表面。多種配體只與NKG2D結(jié)合位點內(nèi)的五個保守“熱點”結(jié)合(McFarland等Immunity(2003)19，803-812；McFarland等Structure(2003)11，411-422)。NKG2D并不僅限于NK細(xì)胞，還表達(dá)于活化的CD8+T細(xì)胞、γδT細(xì)胞和活化的巨噬細(xì)胞(Jamieson等(2002)Immunity 17，19-29)。對NKG2D配體的表達(dá)了解很少。MIC經(jīng)常表達(dá)于上皮來源的腫瘤(Groh等，(1999)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 96，6879-6884)，NKG2D配體在腫瘤的上調(diào)可能是免疫識別和清除惡性細(xì)胞的機(jī)制。對易感于NKG2D依賴性天然殺傷細(xì)胞毒性的腫瘤的研究表明，NKG2D在天然殺傷細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性中的作用與MICA和ULBP在不同組織類型靶細(xì)胞腫瘤表面的表達(dá)和表面密度嚴(yán)格相關(guān)(Pende等(2002)Cancer Res.，62，6178-6186)。在小鼠模型中，所植入的用NKG2D配體轉(zhuǎn)染的腫瘤細(xì)胞喚起潛在的抗腫瘤免疫和體內(nèi)對腫瘤細(xì)胞的排斥(Diefenbach等(2000)Nat.Immunol.1，119-126；Cerwenka等(2001)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98，11521-11526；Diefenbach等(2001)Nature 413，165-171；Girardi等(2001)Science 294，605-609)。NKG2D配體還可能在對病原體(包括巨細(xì)胞病毒(Groh等(2001)Immunol.2，255-260)、結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)(Das等(2001)Immunity 15，83-93)和大腸桿菌(Escherichia coli)(Tieng等(2002)Proc.Natl.Acac.Sci.99，2977-2982))的免疫應(yīng)答中發(fā)揮作用。在NK細(xì)胞表達(dá)NKG2D配體的非肥胖糖尿病(NOD)小鼠中NK細(xì)胞功能受到損害(Ogasawara等，(2003)Immunity 18，41-51)。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中，NKG2D受體與其配體的相互作用受到損害(Groh等，(2003)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 100，9452-9457)。人巨細(xì)胞病毒(hCMV)表達(dá)獨特的長(UL)16糖蛋白可能是hCMV通過干擾NKG2D與其配體結(jié)合來逃避免疫識別的機(jī)制(Cosman等(2001)Immunity 14，123-133；Welte等(2003)Eur.J.Immunol.33，194-203)。不是所有的人MIC和ULBP蛋白都成為靶標(biāo)。MICB、ULBP1和ULBP2與UL16結(jié)合，而MICA和ULBP3則不然。類似的，不同的鼠配體對NKG2D具有不同的親和力(Carayannopoulos等(2002)J.Immunol.169，4079-4083；O′Callaghan等(2001)Immunity 15，201-211；Carayannopoulos等(2002)Eur.J.Immunol.32，597-605)。MIC和ULBP蛋白可以相互獨立的表達(dá)于不同譜系的細(xì)胞，這也與非冗余功能一致(Pende等(2002)Cancer Res.62，6178-6186)。在染色體6p24.2-q25.3簇中已經(jīng)鑒定了大量ULBP相關(guān)基因(RAE1-樣轉(zhuǎn)錄物(RAET1))(Radosavljevic等(2002)Genomics 79，114-123)。這個簇包括若干不同于ULBP1-3的新基因，包括RAET1E(US2003/0195337)。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)涉及名為RAET1G的RAET1/ULBP蛋白質(zhì)家族新成員的鑒定和表征。本文顯示RAET1G與UL16和NKG2D受體結(jié)合，其親和力顯著高于任何目前已經(jīng)報道的ULBP家族蛋白質(zhì)。本專利技術(shù)的一個方面提供編碼多肽的分離核酸，所述多肽含有與附圖說明圖1或圖2的氨基酸序列至少具有87％序列同一性或至少87％序列相似性的氨基酸序列或由其組成。圖1的氨基酸序列(RAETG1)數(shù)據(jù)庫編號為AA022238.1，GI37728026，由數(shù)據(jù)庫編號AY172579.1，GI37728025的序列編碼。圖2的氨基酸序列(RAETG2)數(shù)據(jù)庫編號為AA022239.1，GI37728028并由數(shù)據(jù)庫編號AY172580.1，GI37728027的序列編碼。多肽可以含有與圖1的氨基酸序列具有至少90％序列同一性或相似性、至少95％序列同一性或相似性或至少98％序列同一性或相似性的氨基酸序列或由其組成。在優(yōu)選的實施方案中，多肽可以含有圖1和/或圖2氨基酸序列或由其組成。優(yōu)選地，多肽具有一種或多種RAET1G功能。例如，多肽可以與UL16(編碼序列AY297445、AY297445.1，GI31616608；蛋白質(zhì)序列AAP55721、AAP55721.1；GI31616609)和/或NKG2D(編碼序列AF461811，AF461811.1，GI18182679；蛋白質(zhì)序列AAL65233，AAL65233.1，GI18182680)結(jié)合，優(yōu)選以高親和力(即360nM或更低)結(jié)合。如本文所述的分離核酸可以與圖3或圖4的核酸序列具有高于約85％、高于約90％或高于約95％的序列同一性。核酸可以含有圖3或圖4所示的序列或由其組成，它可以是所示序列的突變體、變體、衍生物或等位基因。該序列可以通過變化區(qū)別于所示序列，所述變化為所示序列中一個或多個核苷酸的一個或多個添加、插入、刪除或替換。取決于遺傳密碼，核酸序列的變化可能在蛋白質(zhì)水平引起氨基酸的變化，或不引起變化。因此，核酸可能含有與圖3或圖4所示序列不同的序列，然而編碼具有相同氨基酸序列的多肽。序列同一性在下文有更詳細(xì)的說明。本專利技術(shù)的核酸可以在嚴(yán)格條件下與圖3和/或圖4所示序列雜交，或者可有在嚴(yán)格條件下與圖3和/或本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
編碼多肽的分離的核酸，所述多肽包含與圖１或圖２的氨基酸序列具有至少８７％序列相似性的氨基酸序列。
【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：J特羅斯達(dá)萊，R伊格爾，L培根，
申請(專利權(quán))人：劍橋大學(xué)技術(shù)服務(wù)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：GB[]
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