一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法技術

本發明專利技術提供一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，采用高效液相色譜法，以丙烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱，流動相由A相和B相組成，以含有陽離子對的磷酸鹽緩沖液為流動相A，乙腈為流動相B，流動相A：流動相B為90～98：2～10，采用紫外檢測器，檢測波長為210nm～230nm。本發明專利技術的有益效果是該方法可以快速準確檢測還原物中的外型異構體雜質，具有良好的專屬性及靈敏度，流動相便宜易得，操作過程簡單方便，準確性、重復性好。

【技術實現步驟摘要】
一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法
本專利技術屬于藥物領域，尤其是涉及一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法。
技術介紹
異丙托溴銨，是對支氣管平滑肌M受體有較高選擇性的強效抗膽堿藥，松弛支氣管平滑肌作用較強，對呼吸道腺體和心血管系統的作用較弱。用于緩解慢性阻塞性肺病(COPD)引起的支氣管痙攣、喘息癥狀；防治哮喘、尤適用于因用β受體激動藥產生肌肉震顫、心動過速而不能耐受此類藥物的患者。隨著藥品研發水平的提升以及相關制劑的不良反應日益被關注，醫藥監管機構對制劑產品中的有關物質的關注度也在日漸提高。異丙托溴銨原料藥一般用于吸入給藥，安全風險等級較高，更需要對其中的潛在雜質進行檢測。異丙托溴銨原料藥制備過程中，還原物是異丙托溴銨合成中的重要中間體，還原物(結構式如式I所示)的產生過程中，易生成外型異構體(結構式如式II所示)，需對外型異構體含量進行控制。經文獻調研，未查到任何文獻及藥典對異丙托溴銨中間體還原物外型異構體的測定方法進行報道和收載。故本專利技術根據化合物的理化性質，開發了一套液相色譜體系對其進行測定。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種能夠檢測異丙托溴銨中間體(也稱異丙托溴銨還原物)的內型和外型的高效液相色譜方法。本專利技術的技術方案是：一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，采用高效液相色譜法，以丙烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱，流動相由A相和B相組成，以含有陽離子對的磷酸鹽緩沖液為流動相A，乙腈為流動相B，流動相A：流動相B的比例為94～98：2～6，用紫外檢測器，檢測波長為210nm～230nm。所述一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，所述磷酸鹽緩沖液中還含有體積比為1:100～1:150的三乙胺，所述一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，所述陽離子對試劑選自四丙基氯化銨、四丁基氯化銨；所述一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，所述四丙基氯化銨、四丁基氯化銨的濃度為0.005～0.007mol/L；所述含有陽離子對的磷酸鹽緩沖液的pH為4.5～5.5；所述含有陽離子對的磷酸鹽緩沖液的pH為4.8～5.2；所述含有陽離子對的磷酸鹽緩沖液的pH為5.0；所述流動相A：流動相B為95:5；所述流動相A：流動相B為96:4；所述流動相A：流動相B為94:6；所述一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，色譜柱柱溫為45℃～55℃；所述一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，色譜柱柱溫為50℃；所述一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，流動相流速為0.5ml/min～1.5ml/min；所述一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，流動相流速為1.0ml/min；本專利技術具有的優點和積極效果是：在開發該方法時，通過對不同的離子對緩沖液進行篩選，最終選擇陽離子緩沖液四丙基氯化銨和四丁基氯化銨的磷酸鹽緩沖液，加三乙胺能減少拖尾，達到更好的峰形，實驗中發現乙腈比例太大會導致保留時間縮短，還原物和外型異構體無法分開，而乙腈比例太小會導致峰擴散，峰形受影響，而且水的比例太大會縮短柱子的使用壽命；本專利技術的技術方案通過比較各種填充材料色譜柱，最終選擇丙烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱以達到分離還原物和外型異構體。該方法可以快速準確檢測還原物中的外型異構體雜質，具有良好的專屬性及靈敏度，流動相便宜易得，操作過程簡單方便，準確度、重復性好。附圖說明圖1是本專利技術實施例1的高效液相色譜圖；圖2是本專利技術實施例2的高效液相色譜圖；圖3是本專利技術實施例3的高效液相色譜圖；圖4是本專利技術實施例4的高效液相色譜圖；圖5是本專利技術實施例5的高效液相色譜圖；圖6是本專利技術實施例6的高效液相色譜圖；圖7是本專利技術對照實施例1的高效液相色譜圖；圖8是本專利技術對照實施例2的高效液相色譜圖；圖9是本專利技術對照實施例3的高效液相色譜圖；具體實施方式下面將通過實施例對本專利技術作進一步的描述，這些描述并不是對本
技術實現思路
作進一步的限定。本領域的技術人員應理解，對本專利技術的技術特征所作的等同替換，或相應的改進，仍屬于本專利技術的保護范圍之內。溶液配制溶樣液：即流動相，5.0g磷酸二氫鉀，1.36g四丙基氯化銨，8ml三乙胺加入到1L水中，用磷酸調pH至5.0；空白溶液：流動相供試品溶液：取供試品約10mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加流動相溶液稀釋定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，加流動相稀釋定容至刻度，搖勻，作為對照溶液。系統適用性溶液：取還原物99mg，外型異構體0.1mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加入流動相溶液稀釋定容至刻度，搖勻，作為系統適用性溶液。精密量取對照品溶液和供試品溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算，即得含量。實施例1-實施例5進樣為系統適用性溶液；實施例6的系統適用性溶液：取還原物9.0mg，外型異構體1.0mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加入流動相溶液稀釋定容至刻度，搖勻，作為系統適用性溶液。實施例7進樣供試品。對照實施例1-2進樣為系統適用性溶液實施例1系統適用性試驗色譜條件：色譜柱：丙烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(3.0×150mm，3.5μm)流動相A：5.0g磷酸二氫鉀，1.36g四丙基氯化銨，8ml三乙胺加入到1L水中，用磷酸調pH至5.0；流動相B：乙腈流動相A：流動相B＝95:5檢測波長：220nm柱溫：50℃流速：1.0ml/min進樣量：10μl檢測結果：見圖1名稱保留時間分離度還原物外型異構體6.328還原物6.9951.7實施例2色譜條件：色譜柱：丙烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(3.0×150mm，3.5μm)流動相A：5.0g磷酸二氫鉀，1.36g四丙基氯化銨，8ml三乙胺加入到1L水中，用磷酸調pH至5.0；流動相B：乙腈流動相A：流動相B＝96:4檢測波長：220nm柱溫：45℃流速：1.0ml/min進樣量：10μl檢測結果：見圖2名稱保留時間分離度還原物外型異構體7.355還原物8.1961.9實施例3色譜條件：色譜柱：丙烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜本文檔來自技高網...

【技術保護點】
1.一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，其特征在于：采用高效液相色譜法，以丙烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱，流動相由A相和B相組成，以含有陽離子對的磷酸鹽緩沖液為流動相A，乙腈為流動相B，流動相A：流動相B為94～98：2～6，采用紫外檢測器，檢測波長為210nm～230nm。/n

【技術特征摘要】
1.一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，其特征在于：采用高效液相色譜法，以丙烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱，流動相由A相和B相組成，以含有陽離子對的磷酸鹽緩沖液為流動相A，乙腈為流動相B，流動相A：流動相B為94～98：2～6，采用紫外檢測器，檢測波長為210nm～230nm。





2.根據權利要求1所述的一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，其特征在于：所述磷酸鹽緩沖液中還含有體積比為1:100～1:150的三乙胺。


3.根據權利要求1所述的一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，其特征在于：所述陽離子對試劑選自四丙基氯化銨、四丁基氯化銨。


4.根據權利要求3所述的一種異丙托溴銨中間體I的含量和有關物質的檢測方法，其特征在于：所述四丙基氯化銨、四丁基氯化銨的濃度為0.005～0.007mol/L。

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【專利技術屬性】
技術研發人員：李曉東，王宏俠，郭志強，
申請(專利權)人：天津藥業研究院有限公司，
類型：發明
國別省市：天津;12