一種高效液相色譜分析苯丙醇原料及其制劑的方法技術

本發明專利技術公開了一種高效液相色譜（ＨＰＬＣ）分析苯丙醇原料及其制劑的方法，采用此方法可以很好地分離苯丙醇、苯丙酮、苯甲醇、苯乙醇與苯乙酮等物質，控制苯丙醇質量，準確測定苯丙醇原料及其制劑的含量，指示苯丙醇原料及其制劑的穩定性。所采用的色譜柱包括：反相柱、ＣＮ基柱、ＮＨ↓［２］基柱；柱溫：室溫～５０℃；流動相：甲醇－水、乙醇－水、乙腈－水，或甲醇、乙醇、乙腈與水的三元或四元混合組成；流速１ｍｌ／ｍｉｎ；洗脫方式可以是等度也可以是梯度；檢測波長為苯丙醇的最大吸收波長２１５±２ｎｍ、２５８±２ｎｍ。本發明專利技術所建立的ＨＰＬＣ法具有操作簡單、準確度高，專一性強等特點。（*該技術在2024年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及醫藥
，確切地說它是。
技術介紹
苯丙醇，又名利膽醇，收載于中國藥典2000年版，為我國的基本用藥，其膠丸劑屬于OTC品種。苯丙醇于1927年由瓦勃(Warrb)和Cortese首先合成，在德國首次上市。我國于1977年開始生產。本品為油狀液體，味辛甜，極易溶于甲醇，乙醇和氯仿，微溶于水。本品口服后主要分布在腸、肝、膽囊、腎等器官，在肝臟代謝，以代謝物的形式和部分原形藥物從膽汁和尿液中排泄。本品為膽計分泌促進劑。服藥后10分鐘膽汁開始分泌，1-2小時達高峰，3-5小時后作用消失，膽汁分泌平均增加2倍。可減輕腹脹，腹痛，惡心，厭油等癥狀，增加食欲，促進消化。能舒張奧狄斯(Oddis)括約肌，有排結石作用，但不能溶石。能加速膽固醇轉變成膽酸的過程，降低膽固醇。臨床用于膽囊炎、膽道感染、膽石癥、膽道手術后綜合征及慢性肝炎的輔助治療。制備苯丙醇的主要原料為苯丙酮，苯丙醇原料中往往會含有苯丙酮，由于苯丙醇與苯丙酮的沸點接近，前者為219℃，后者為218℃，采用簡單的蒸餾技術難以將兩者分開。中國藥典2000年版收載的檢查苯丙酮的方法為紫外分光光度法，由于苯丙醇與苯丙酮均在所指定的波長處有紫外吸收，該方法無特異性，同時原料中還有苯乙醇與苯乙酮等相關物質，紫外分光光度法不能區分。另外，中國藥典2000年版收載的測定苯丙醇含量方法為容量分析方法，利用酸酐與苯丙醇中羥基反應，計算出苯丙醇含量，此法操作繁瑣，專一性差。雖有文獻采用氣相色譜法測定苯丙醇膠丸中苯丙醇含量(史大軍等氣相色譜法測定苯丙醇含量《藥物分析雜志》2000，20(6)428～429；李瑞萍氣相色譜-質譜法測定苯丙醇膠丸中苯丙醇含量《藥物分析雜志》2003，23(3)170～172)，但至今，國內外尚未見采用高效液相色譜法(HPLC)測定苯丙醇原料及其制劑的含量。另外，文獻報道的氣相色譜法中采用了苯乙酮為內標物，由于苯丙醇中含有苯乙酮雜質，故而采用苯乙酮為內標物不適宜，同時，文獻中也未提及所建立的方法對相關物質苯甲醇、苯乙酮、苯乙醇的分離情況，所采用的溶劑四氯化碳對操作者有極大的毒性，不適合作為常規分析技術。我們所建立的HPLC不僅可以測定苯丙醇原料及其制劑的含量，而且可以同時將苯丙醇、苯丙酮、苯甲醇、苯乙酮、苯乙醇等成分分離開來，使得苯丙醇原料及其制劑的含量測定不受干擾，所用的溶劑為常規溶劑。方法學研究結果表明，空白輔料、軟膠囊的稀釋劑植物油無干擾，所建立的HPLC法的精密度、回收率、穩定性等指標符合分析要求。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供。所采用的色譜柱包括反相柱、CN基柱、NH2基柱； 柱溫室溫～50℃；流動相甲醇-水、乙醇-水、乙腈-水，或甲醇、乙醇、乙腈與水的三元或四元混合組成；流速1ml/min(可以根據具體情況進行適當調整)；洗脫方式可以是等度也可以是梯度；檢測波長為苯丙醇的最大吸收波長215±2nm、258±2nm，也可以是其他合理的波長。所說的反相柱為C18、C8。所說的在C18、C8柱上的流動相甲醇-水的比例為30∶70～90∶10、乙醇-水的比例為30∶70～90∶10、乙腈-水的比例為30∶70～90∶10。在CN基柱、NH2基柱上的流動相甲醇-水的比例為1∶99～20∶80；乙醇-水的比例為1∶99～20∶80；、乙腈-水的比例為1∶99～20∶80。所說的三元或四元混合流動相為甲醇-乙腈-水；乙醇-乙腈-水；甲醇-乙醇-水；甲醇-乙醇-乙腈-水等。本專利技術的優點是采用此方法可以很好地分離苯丙醇、苯丙酮、苯甲醇、苯乙醇、苯乙酮等物質，控制苯丙醇質量，準確測定苯丙醇原料及其制劑的含量，指示苯丙醇原料及其制劑的雜質、穩定性。本專利技術所建立的HPLC法具有操作簡單、準確度高，專一性強等特點。附圖說明圖1為用二級管陣列檢測器(DAD)提取苯丙醇峰的紫外掃描圖。圖2為苯丙醇原料中苯丙醇濃度為5mg/ml時雜質檢查色譜圖。圖3為將苯丙醇制成包合物后，苯丙醇濃度為5mg/ml時雜質檢查色譜圖。圖4為苯丙醇原料藥中可能存在的雜質，即苯甲醇、苯乙醇、苯乙酮、苯丙酮在同一色譜條件下的色譜疊加圖。圖5為苯丙醇原料藥在4500LX光照度環境下光照5天后色譜圖。圖6為苯丙醇包合物在4500LX光照度環境下光照5天后色譜圖。具體實施例方式實施例1檢測波長的確定取用95％乙醇制成0.5mg/ml的苯丙醇溶液20ul注入色譜儀中，以甲醇-水(60∶40)為流動相，于DIKMA Diamonsil ODS(200×4.6mm，5μm)柱上進行分離，用二級管陣列檢測器(DAD)提取苯丙醇峰的紫外掃描圖，見附圖1。由附圖1可知，苯丙醇的最大吸收波長為215±2nm、258±2nm，在252±2nm、264±2nm處也有吸收峰，可以根據具體情況選擇檢測波長，原則上選擇215±2nm或258±2nm作為檢測波長。實施例2苯丙醇在不同反相填料品牌柱中的保留行為。以甲醇-水(60∶40)為流動相，流速為1.0ml·min-1，進樣量為20μl，在257nm處記錄色譜圖，考察在苯丙醇在不同反相C18填料柱中的色譜行為，見表1表1.苯丙醇在不同ODS色譜柱中的保留行為色譜柱填料及規格 柱壓/MPa TR/min 拖尾因子Betasil ODS(200×4.6mm，5μm) 13.9 8.68 1.31Diamonsil ODS(200×4.6mm，5μm) 6.6 8.12 1.16CenturySIL BDS(200×4.6mm，5μm)11.2 7.32 1.32CenturySIL MOS(200×4.6mm，5μm)12.0 8.36 1.26Spherisorb(200×4.6mm，5μm)12.6 8.43 1.41 YWG(250×4.6mm，10μm)13.8 13.12 1.38BOND(200×4.6mm，5μm)11.2 8.86 1.33HYPERSIL(200×4.6mm，5μm)13.2 9.06 1.26ZOBAX(200×4.6mm，5μm) 12.6 8.38 1.35Kromasil(150×4.6mm，5μm)10.6 9.11 1.32由表1可知，現有的C18品牌均可以用于苯丙醇的測定。選擇Diamonsil ODS為色譜柱，分別考察了柱溫20、30、40、50℃，結果表明均能將苯丙醇、苯丙酮分開，主峰的保留時間隨柱溫的升高而縮短，分離度合格。實際應用中，可在20～50℃范圍內或低于或高于此范圍的某一合適的柱溫。實施例3苯丙醇在C8柱中的保留行為以甲醇-水(55∶45)為流動相，流速為1.0m1·min-1，進樣量為20μl時在215mm處記錄色譜圖，結果見表2。表2、苯丙醇在不同C8柱中的保留行為色譜柱填料及規格柱壓/MPa TR/min拖尾因子苯丙醇 苯丙酮CenturySIL C8 BDS(200×4.6mm，5μm) 16.415.3518.88 0.90CenturySIL C8(250×4.6mm，5μm) 18.512.3516.97 1.24Kromasil C8(150×4.6mm，5μm) 11.210.6 13.21 1本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種高效液相色譜分析苯丙醇原料及其制劑的方法，采用的色譜柱包括：反相柱、ＣＮ基柱、ＮＨ２基柱，其特征在于：采用高；柱溫：室溫～５０℃；流動相：甲醇－水、乙醇－水、乙腈－水，或甲醇、乙醇、乙腈與水的三元或四元混合組成；流速１ｍｌ／ｍｉｎ；洗脫方式可以是等度也可以是梯度；檢測波長為苯丙醇的最大吸收波長。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：鄧意輝，吳紅兵，雷杰杰，
申請(專利權)人：沈陽藥科大學，
類型：發明
國別省市：89[中國|沈陽]