一種新的多肽——人tre致癌基因蛋白10.78和編碼這種多肽的多核苷酸制造技術

本發明專利技術公開了一種新的多肽－人ｔｒｅ致癌基因蛋白１０．７８，編碼此多肽的多核苷酸和經ＤＮＡ重組技術產生這種多肽的方法。本發明專利技術還公開了此多肽用于治療多種疾病的方法，如骨骼腫瘤、其它腫瘤、炎癥、免疫性疾病等。本發明專利技術還公開了抗此多肽的拮抗劑及其治療作用。本發明專利技術還公開了編碼這種新的人ｔｒｅ致癌基因蛋白１０．７８的多核苷酸的用途。（*該技術在2020年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于生物
，具體地說，本專利技術描述了一種新的多肽--人tre致癌基因蛋白10.78，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本專利技術還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。及非同尋常的骨骼外尤文氏肉瘤中顯示了一種連貫的染色體易位t(11；22)(q24；q12)(Aurias etal.,1983；Turc-Carel et al.,1983)，但在小圓細胞組織的其他腫瘤中未觀察到這一現象。因而，迄今為止，t(11；22)被認為是診斷尤文氏肉瘤唯一陽性且可靠的標準(Sandberg et al.,1988)。臨床觀察顯示染色體易位導致異常地轉錄激活基因從而啟動或引發惡性狀態。這一重要的具有致瘤效應的基因被稱為tre致癌基因，在人體尤文氏肉瘤細胞中發現，并可在NIH3T3細胞中產生，但在人體其他細胞中未曾發現。Tre是一種從轉染人尤文氏肉瘤DNA的NIH3T3細胞中分離得到的重組基因。它由三種衍生自人染色體5,18及17的主要基因成分組成。Tre-2是tre致癌基因的一種新的轉錄單位，位于人染色體17q的著絲粒近側區，該轉錄單位相同的或多態的或腫瘤特異的的模型存在于人體的各種癌細胞中，但在正常的組織衍生細胞中沒有表達。tre致癌基因編碼的蛋白是一種高度親水性蛋白，具有兩個帶電簇，因而具有與核苷酸結合的特性(Tatsuya Nakamura,JanaHillova,Oncogene(1992),7,733-741)。通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本專利技術的多肽的表達譜與人tre致癌基因蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本專利技術被命名為人tre致癌基因蛋白10.78。由于如上所述人tre致癌基因蛋白10.78蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人tre致癌基因蛋白10.78蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人tre致癌基因蛋白10.78蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。本專利技術的一個目的是提供分離的新的多肽--人tre致癌基因蛋白10.78以及其片段、類似物和衍生物。本專利技術的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼人tre致癌基因蛋白10.78的多核苷酸的重組載體。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼人tre致癌基因蛋白10.78的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。本專利技術的另一個目的是提供生產人tre致癌基因蛋白10.78的方法。本專利技術的另一個目的是提供針對本專利技術的多肽--人tre致癌基因蛋白10.78的抗體。本專利技術的另一個目的是提供了針對本專利技術多肽--人tre致癌基因蛋白10.78的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。本專利技術的另一個目的是提供診斷治療與人tre致癌基因蛋白10.78異常相關的疾病的方法。本專利技術涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本專利技術還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體(a)編碼具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種(a)具有SEQ ID NO:1中853-1149位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1697位的序列。本專利技術另外涉及一種含有本專利技術多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本專利技術多肽的方法。本專利技術還涉及一種能與本專利技術多肽特異性結合的抗體。本專利技術還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制人tre致癌基因蛋白10.78蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本專利技術的多肽。本專利技術還涉及用該方法獲得的化合物。本專利技術還涉及一種體外檢測與人tre致癌基因蛋白10.78蛋白異常表達相關的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測生物樣品中本專利技術多肽的量或生物活性。本專利技術也涉及一種藥物組合物，它含有本專利技術多肽或其模擬物、激活劑、拮抗劑或抑制劑以及藥學上可接受的載體。本專利技術還涉及本專利技術的多肽和/或多核苷酸在制備用于治療癌癥、發育性疾病或免疫性疾病或其它由于人tre致癌基因蛋白10.78表達異常所引起疾病的藥物的用途。本專利技術的其它方面由于本文的技術的公開，對本領域的技術人員而言是顯而易見的。本說明書和權利要求書中使用的下列術語除非特別說明具有如下的含義“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因組或合成的DNA或RNA，它們可以是單鏈或雙鏈的，代表有義鏈或反義鏈。類似地，術語“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白質序列及其片段或部分。當本專利技術中的“氨基酸序列”涉及一種天然存在的蛋白質分子的氨基酸序列時，這種“多肽”或“蛋白質”不意味著將氨基酸序列限制為與所述蛋白質分子相關的完整的天然氨基酸。蛋白質或多核苷酸“變體”是指一種具有一個或多個氨基酸或核苷酸改變的氨基酸序列或編碼它的多核苷酸序列。所述改變可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替換。變體可具有“保守性”改變，其中替換的氨基酸具有與原氨基酸相類似的結構或化學性質，如用亮氨酸替換異亮氨酸。變體也可具有非保守性改變，如用色氨酸替換甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一個或多個氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改變導致與天然存在的分子相比，一個或多個氨基酸或核苷酸的增加。“替換”是指由不同的氨基酸或核苷酸替換一個或多個氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的結構、調控或生物化學功能的蛋白質。類似地，術語“免疫學活性”是指天然的、重組的或合成蛋白質及其片段在合適的動物或細胞中誘導特定免疫反應以及與特異性抗體結合的能力。“激動劑”是指當與人tre致癌基因蛋白10.78結合時，一種可引起該蛋白質改變從而調節該蛋白質活性的分子。激動劑可以包括蛋白質、核酸、碳水化合物或任何其它可結合人tre致癌基因蛋白10.78的分子。“拮抗劑”或“抑制物”是指當與人tre致癌基因蛋白10.78結合時，一種可封閉或調節人tre致癌基因蛋白10.78的生物學活性或免疫學活性的分子。拮抗劑和抑制物可以包括蛋白質、核酸、碳水化合物或任何其它可結合人tre致癌基因蛋白10.78的分子。“調節”是指人tre致癌基本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種分離的多肽－人ｔｒｅ致癌基因蛋白１０．７８，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、類似物或衍生物。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：毛裕民，謝毅，
申請(專利權)人：上海博德基因開發有限公司，
類型：發明
國別省市：31[中國|上海]