一種新的多肽--核糖體蛋白S10 14和編碼這種多肽的多核苷酸制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種新的多肽－核糖體蛋白Ｓ１０１４，編碼此多肽的多核苷酸和經(jīng)ＤＮＡ重組技術(shù)產(chǎn)生這種多肽的方法。本發(fā)明專利技術(shù)還公開了此多肽用于治療多種疾病的方法，如惡性腫瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各類炎癥等。本發(fā)明專利技術(shù)還公開了抗此多肽的拮抗劑及其治療作用。本發(fā)明專利技術(shù)還公開了編碼這種新的核糖體蛋白Ｓ１０１４的多核苷酸的用途。（*該技術(shù)在2019年保護(hù)過期，可自由使用*）

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)屬于生物
，具體地說，本專利技術(shù)描述了一種新的多肽－核糖體蛋白S10 14，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本專利技術(shù)還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。核糖體是細(xì)胞的主要成分之一，其在生物體內(nèi)不斷地沿著mRNA移動(dòng)，以極快的速度合成肽鏈，是生物體將mRNA翻譯成蛋白多肽的主要場所。核糖體蛋白按照一定的順序與rRNA結(jié)合以及蛋白質(zhì)之間的相互結(jié)合，組裝成兩個(gè)核糖體亞基－一個(gè)大亞基和一個(gè)小亞基，其中大亞基約是小亞基的兩倍，而rRNA直接參與mRNA和tRNA的結(jié)合。核糖體和它的輔助因子結(jié)合在一起，擁有蛋白合成各階段所需要的全部酶活性。這些酶活性只有在核糖體整體結(jié)構(gòu)存在的情況下才具備，核糖體蛋白質(zhì)和rRNA都不能單獨(dú)參與蛋白合成反應(yīng)。不論是真核生物還是原核生物，其核糖體都由大小兩個(gè)亞基組成，各種核糖體蛋白質(zhì)在大小亞基內(nèi)都有一定的位置，rRNA是其中的骨架。有的核糖體蛋白直接與rRNA結(jié)合，這些蛋白與rRNA結(jié)合后改變了rRNA的構(gòu)象，從而使另一些蛋白再與rRNA結(jié)合，是維持核糖體構(gòu)象的重要組成成分；而有些核糖體蛋白不直接與rRNA結(jié)合，而是結(jié)合在其他蛋白質(zhì)上，這些蛋白在生物體內(nèi)與其他蛋白協(xié)同作用，使核糖體發(fā)揮正常的生理功能。所有的核糖體蛋白構(gòu)成了一個(gè)獨(dú)立的蛋白家族，即核糖體蛋白家族。核糖體蛋白S10是核糖體小亞基的組成蛋白之一。S10蛋白約由100個(gè)氨基酸殘基組成。在大腸桿菌中，核糖體蛋白S10參與將轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(tRNA)結(jié)合到核糖體上的生理過程，在核糖體翻譯蛋白并將新合成的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)到特定組織的過程中起重要作用。該蛋白的表達(dá)異常可能與一些代謝紊亂癥及一些腫瘤及癌癥等疾病的發(fā)生相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，除植物線粒體核糖體蛋白S10和立克次氏體核糖體蛋白S10外，所有的核糖體蛋白S10都含有如下所示的一致性序列片段-X(3)---X(3)-G-P--X--P-T；該序列片段是蛋白將tRNA結(jié)合到核糖體上的活性位點(diǎn)，tRNA就是通過與該蛋白結(jié)合而結(jié)合到核糖體上，并在核糖體上發(fā)揮其轉(zhuǎn)運(yùn)臂的功能。tRNA在核糖體內(nèi)與新生肽鏈的C末端結(jié)合，并將新生肽鏈轉(zhuǎn)運(yùn)出核糖體。因而，該蛋白的表達(dá)異常將導(dǎo)致新生肽鏈在核糖體內(nèi)的聚集，從而抑制核糖體對肽鏈的合成。生物體內(nèi)蛋白的合成過程及其速度通常由多種調(diào)節(jié)步驟來共同完成，若其中的一些過程表達(dá)異常將破壞整個(gè)系統(tǒng)的平衡。由上可知，核糖體蛋白S10的表達(dá)異常將導(dǎo)致生物體內(nèi)蛋白合成過程異常，從而引發(fā)各種相關(guān)的代謝調(diào)控紊亂性疾病、免疫系統(tǒng)疾病及各種腫瘤及癌癥等。由于如上所述核糖體蛋白S1014蛋白在機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的核糖體蛋白S10 14蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新核糖體蛋白S10 14蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。本專利技術(shù)的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽－核糖體蛋白S10 14以及其片段、類似物和衍生物。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提供含有編碼核糖體蛋白S10 14的多核苷酸的重組載體。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提供含有編碼核糖體蛋白S10 14的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)核糖體蛋白S10 14的方法。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提供針對本專利技術(shù)的多肽－核糖體蛋白S10 14的抗體。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提供了針對本專利技術(shù)多肽－核糖體蛋白S10 14的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提供診斷治療與核糖體蛋白S10 14異常相關(guān)的疾病的方法。本專利技術(shù)涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本專利技術(shù)還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體(a)編碼具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種(a)具有SEQ ID NO:1中111-470位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2546位的序列。本專利技術(shù)另外涉及一種含有本專利技術(shù)多核苷酸的載體，特別是表達(dá)載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細(xì)胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細(xì)胞和回收表達(dá)產(chǎn)物的制備本專利技術(shù)多肽的方法。本專利技術(shù)還涉及一種能與本專利技術(shù)多肽特異性結(jié)合的抗體。本專利技術(shù)還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制核糖體蛋白S10 14蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本專利技術(shù)的多肽。本專利技術(shù)還涉及用該方法獲得的化合物。本專利技術(shù)還涉及一種體外檢測與核糖體蛋白S10 14蛋白異常表達(dá)相關(guān)的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測生物樣品中本專利技術(shù)多肽的量或生物活性。本專利技術(shù)也涉及一種藥物組合物，它含有本專利技術(shù)多肽或其模擬物、激活劑、拮抗劑或抑制劑以及藥學(xué)上可接受的載體。本專利技術(shù)還涉及本專利技術(shù)的多肽和/或多核苷酸在制備用于治療癌癥、發(fā)育性疾病或免疫性疾病或其它由于核糖體蛋白S10 14表達(dá)異常所引起疾病的藥物的用途。本專利技術(shù)的其它方面由于本文的技術(shù)的公開，對本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見的。本說明書和權(quán)利要求書中使用的下列術(shù)語除非特別說明具有如下的含義“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因組或合成的DNA或RNA，它們可以是單鏈或雙鏈的，代表有義鏈或反義鏈。類似地，術(shù)語“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白質(zhì)序列及其片段或部分。當(dāng)本專利技術(shù)中的“氨基酸序列”涉及一種天然存在的蛋白質(zhì)分子的氨基酸序列時(shí)，這種“多肽”或“蛋白質(zhì)”不意味著將氨基酸序列限制為與所述蛋白質(zhì)分子相關(guān)的完整的天然氨基酸。蛋白質(zhì)或多核苷酸“變體”是指一種具有一個(gè)或多個(gè)氨基酸或核苷酸改變的氨基酸序列或編碼它的多核苷酸序列。所述改變可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替換。變體可具有“保守性”改變，其中替換的氨基酸具有與原氨基酸相類似的結(jié)構(gòu)或化學(xué)性質(zhì)，如用亮氨酸替換異亮氨酸。變體也可具有非保守性改變，如用色氨酸替換甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一個(gè)或多個(gè)氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改變導(dǎo)致與天然存在的分子相比，一個(gè)或多個(gè)氨基酸或核苷酸的增加。“替換”是指由不同的氨基酸或核苷酸替換一個(gè)或多個(gè)氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的結(jié)構(gòu)、調(diào)控或生物化學(xué)功能的蛋白質(zhì)。類似地，術(shù)語“免疫學(xué)活性”是指天然的、重組的或合成蛋白質(zhì)及其片段在合適的動(dòng)物或細(xì)胞中誘導(dǎo)特定免疫反應(yīng)以及與特異性抗體結(jié)合的能力。“激動(dòng)劑”是指當(dāng)與核糖體蛋白S10 14結(jié)合時(shí)，一種可引起該蛋白質(zhì)改變從而調(diào)節(jié)該蛋白質(zhì)活性的分子。激動(dòng)劑可以包括蛋白質(zhì)、核酸、碳水化合物或任何其它可結(jié)合核糖體蛋白S10 14的分子。“拮抗劑”或“抑制物”是指當(dāng)與核糖體蛋白S1本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種分離的多肽－核糖體蛋白Ｓ１０ １４，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、類似物或衍生物。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：毛裕民，謝毅，
申請(專利權(quán))人：上海博德基因開發(fā)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：31[中國|上海]