分析生物組分間非共價作用的方法技術

本發明專利技術涉及一種分析生物組分間非共價作用的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：①用生物素化試劑和放射性同位素分別標記不同的生物組分；②將這兩種已標記好的生物組分置于液相中，使其在一定的條件下相互作用；③然后加入共價交聯于固相支持物的抗生物素（ａｖｉｄｉｎ）或其它類似物ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ，混合后溫育一定的時間后，再用適當緩沖液充分洗滌固相物；④收集固相物、制備凝膠電泳樣品，從而作出凝膠電泳；⑤用上述電泳后的凝膠做放射性自顯影；⑥對經過上述步驟處理過的生物樣品的自顯影的結果進行比較分析，以確定那些放射性同位素標記的分子同生物素標記的分子之間存在特異性的相互作用。（*該技術在2015年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及的是一種，特別是用生物素與放射性同位素聯合使用、標記不同的生物組分，以研究生物分子間相互作用的方法。在生物研究領域中，我們往往需要確定某些特性未知的生物組分之間將會產生什么樣的相互作用。已知的研究方法在準確度方面尚不理想。已知在檢驗生物分子技術中人們通常采用一種放射性同位素標記方法對某個生物組分進行示蹤檢測。另外一種檢驗生物分子的技術是用生物素(biotin)的衍生物標記生物分子，使待檢測生物組分被分離出來的檢測技術。本專利技術的目的是將檢測生物分子技術中的放射性同位素方法與生物素方法聯合使用在分析生物組分間非共價作用檢驗過程中，從而提供一種可準確地對其生物學性質尚未充分了解的兩組生物組分之間相互作用進行分析的方法。本專利技術提出的方法是由如下步驟構成的1、用生物素化試劑和放射性同位素分別標記不同的生物組分；2、將這兩種已標記好的生物組分置于液相中，使其在一定的條件下相互作用；3、然后加入共價交聯于固相支持物的抗生物素(avidin)或其它類似物streptavidin，混合后溫育一定的時間后，再用適當緩沖液充分洗滌固相物；4、收集固相物、制備凝膠電泳樣品，從而作出凝膠電泳；5、用上述電泳后的凝膠做放射性自顯影；6、對經過上述步驟處理過的生物樣品的自顯影的結果進行比較分析，以確定那些放射性同位素標記的分子同生物素標記的分子之間存在特異性的相互作用。具體地說，假若其中一個生物組分為A、另一生物組分為B.在組分A上用生物素化學試劑進行標記，而在組分B上用放射性同位素進行標記。然后在液相中使二者相互作用。如果二者可相互作用，則將產生一個生成物A+B。在該生成物中即含有生物素試劑也含有同位素試劑。于是，當加入共價交聯于固相支持物的抗生物素時，上述生成物因其含有生物素則將與抗生物素作用而生成固相物，對該固相物進行電泳后即可產生凝膠。由于該凝膠是由A+B衍生而來的，因而其中也含有同位素。因此用放射性自顯影即可很容易地檢測到其是否存在。由此可以分析出A與B是否產生了非共價相互作用。由上述敘述可以看出，采用該方法可同時利用了放射性同位素標記方法的高靈敏度及特異性好的優點和生物素化標記的生物分子易分離及易純化的優點，因而提供了一種可準確地檢驗生物組分之間相互作用特性的方法。權利要求1.一種，其特征在于該方法包括如下步驟①、用生物素化試劑和放射性同位素分別標記不同的生物組分；②、將這兩種已標記好的生物組分置于液相中，使其在一定的條件下相互作用；③、然后加入共價交聯于固相支持物的抗生物素(avidin)或其它類似物streptavidin，混合后溫育一定的時間后，再用適當緩沖液充分洗滌固相物；④、收集固相物、制備凝膠電泳樣品，從而作出凝膠電泳；⑤、用上述電泳后的凝膠做放射性自顯影；⑥、對經過上述步驟處理過的生物樣品的自顯影的結果進行比較分析，以確定那些放射性同位素標記的分子同生物素標記的分子之間存在特異性的相互作用。全文摘要本專利技術涉及一種，其特征在于該方法包括如下步驟①用生物素化試劑和放射性同位素分別標記不同的生物組分；②將這兩種已標記好的生物組分置于液相中，使其在一定的條件下相互作用；③然后加入共價交聯于固相支持物的抗生物素(avidin)或其它類似物streptavidin，混合后溫育一定的時間后，再用適當緩沖液充分洗滌固相物；④收集固相物、制備凝膠電泳樣品，從而作出凝膠電泳；⑤用上述電泳后的凝膠做放射性自顯影；⑥對經過上述步驟處理過的生物樣品的自顯影的結果進行比較分析，以確定那些放射性同位素標記的分子同生物素標記的分子之間存在特異性的相互作用。文檔編號G01N27/447GK1142610SQ9510797公開日1997年2月12日 申請日期1995年8月8日 優先權日1995年8月8日專利技術者孫群 申請人:孫群本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種分析生物組分間非共價作用的方法，其特征在于該方法包括如下步驟；　①、用生物素化試劑和放射性同位素分別標記不同的生物組分；?、?、將這兩種已標記好的生物組分置于液相中，使其在一定的條件下相互作用；?、?、然后加入共價交聯于固相支持物的抗生物素（ａｖｉｄｉｎ）或其它類似物ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ，混合后溫育一定的時間后，再用適當緩沖液充分洗滌固相物；?、?、收集固相物、制備凝膠電泳樣品，從而作出凝膠電泳；?、?、用上述電泳后的凝膠做放射性自顯影；?、?、對經過上述步驟處理過的生物樣品的自顯影的結果進行比較分析，以確定那些放射性同位素標記的分子同生物素標記的分子之間存在特異性的相互作用。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：孫群，
申請(專利權)人：孫群，
類型：發明
國別省市：11[中國|北京]