利用質譜判別異構體的方法技術

本發明專利技術公開了使用串聯質譜判別二甲基精氨酸異構體的方法。該方法包括如下步驟：電離樣品以產生離子；選擇質荷比（ｍ／ｚ）處于一種ｍ／ｚ范圍的離子；使所選擇的離子碎裂以產生子離子；及通過檢測在ＡＤＭＡ特有ｍ／ｚ下的子離子ｍ／ｚ信號和在ＳＤＭＡ特有ｍ／ｚ下的子離子ｍ／ｚ信號之一或二者，檢測樣品中的不對稱二甲基精氨酸（ＡＤＭＡ）和對稱二甲基精氨酸（ＳＤＭＡ）之一或二者。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】相關申請的交叉引用本申請要求2006年3月2日提交的美國申請60/778483的優先權，該 申請的內容引入本文作為參考。
技術實現思路
本專利技術涉及利用質譜判別分子異構體的方法，等等。例如，本公開涉及 利用串聯質譜檢測二曱基精氨酸異構體之一或二者的方法。這些方法具有很多應用并且可用于檢測樣品(例如來自合成的樣品或來 自受試者的樣品)中的二甲基精氨酸。在診斷情況下，所述方法可用于獲得 受試者(例如人)的代謝分布圖。代謝分布圖是一種信息，該信息包括有關代 謝產物的一雙異構體之一或二者狀態的情報，例如，二曱基精氨酸的兩個異構體不對稱二曱基精氨酸(ADMA)和對稱二曱基精氨酸(SDMA)之一或二 者<formula>formula see original document page 13</formula>(SDMA)。在一些實施方案中，代謝分布圖包括有關其它分子例如其它代謝產物的 情報。所得代謝分布圖可用于評估受試者(例如人)的健康狀況，例如是否存 在諸如血管病癥(如心血管病癥或高血壓病癥)等病癥。一方面，本公開涉及判別二曱基精氨酸異構體的方法。該方法包括如下 步驟電離樣品以產生離子；選擇質荷比(m/z)處于一種m/z范圍的離子；使所選擇的離子碎裂以產生子離子；及通過檢測在ADMA特有的w/z下的子 離子m/z信號和在SDMA特有的m/z下的子離子附/z信號之一或二者，檢測 樣品中的不對稱二曱基精氨酸(ADMA)和對稱二曱基精氨酸(SDMA)之一或二者。另一方面，本公開涉及一種判別二曱基精氨酸異構體的方法，該方法包 括如下步驟電離樣品以產生離子；選4奪質荷比(m/z)處于一種m/z范圍的離 子；使所選擇的離子碎裂以產生子離子；及檢測在w/z約46時的子離子w/z 信號的存在和在w/z約172時的子離子m/z信號的存在之一或二者，其中在 m/z約46時的子離子w/z信號指示樣品包含不對稱二曱基精氨酸(ADMA)， 而在附/z約172時的子離子w/z信號則指示樣品包含對稱二曱基精氨酸 (SDMA)。所述m/z范圍可以為m/z約203 。另一方面，本公開涉及檢測對稱二甲基精氨酸(SDMA)的方法，該方法 包括如下步驟電離樣品以產生離子；選才奪質荷比(m/z)處于一種m/z范圍的 離子；使所選擇的離子碎裂以產生子離子；及檢測樣品中的對稱二甲基精氨 酸(SDMA)，即;險測在w/z約172時的子離子w/z信號。所述m/z范圍可以為 m/z約203。另一方面，本公開涉及檢測不對稱二曱基精氨酸(ADMA)的方法。該方 法包括如下步驟電離樣品以產生離子；選擇質荷比(m/z)處于一種m/z范圍 的離子；使所選擇的離子碎裂以產生子離子；及檢測樣品中的不對稱二曱基 精氨酸(ADMA)，即一企測在 m/z約46時的子離子m/z j"l"號。所述m/z范圍可 以為m/z約203。在上述任一方法的一些實施方案中，可在電離樣品之前向樣品中添加內 標物。內標物可以是或者包含含有至少一個重原子的二曱基精氨酸異構體。 內標物可以包含或可以為具有至少一個重原子的基準性SDMA異構體和具 有至少一個重原子的基準性ADMA異構體，其中所述基準性SDMA和 ADMA異構體彼此具有不同的原子量。另一方面，本公開涉及檢測二曱基精氨酸異構體的方法，該方法包括如 下步驟提供包含一種或多種內標物的樣品，其中至少一種內標物為包含至 少一個重原子的二曱基精氨酸異構體；電離樣品以產生離子；選擇具有與適 于分離二曱基精氨酸異構體(例如天然存在的異構體)的范圍相當的w/z范圍的離子，并選^^處于一個或多個適于分離所述一種或多種內標物的其它m/z范圍的離子；使所選擇的離子碎裂以產生子離子；通過利用子離子檢測一個 或多個只有ADMA才具有的子離子m/z信號和/或一個或多個只有SDMA才 具有的子離子m/z信號，檢測樣品中的不對稱二曱基精氨酸(ADMA)和/或對 稱二曱基精氨酸(SDMA);及檢測所述一種或多種內標物。在一些實施方案中，所述與適于分離二曱基精氨酸異構體的范圍相當 /w/z范圍為m/z約203。在一些實施方案中，樣品可包含第一內標物和第二內 標物，第一內標物為具有至少一個重原子的SDMA異構體，第二內標物為 具有至少一個重原子的ADMA異構體，其中SDMA和ADMA異構體具有 不同的原子量。在一些實施方案中，樣品包含本身為具有至少一個重原子的 SDMA異構體的第一內標物，及本身為具有至少一個重原子的ADMA異構 體的第二內標物，且其中SDMA和ADMA異構體具有相同的原子量。在上述任一方法的一些實施方案中，該方法可進一步包括測量樣品中 SDMA和/或ADMA的含量的步驟。在上述任一方法的一些實施方案中，電離的樣品可以是生物樣品。該生 物樣品可以或也可以包含血液，血清，血漿，淋巴，羊水，唾液，腦脊髓 液，淚液，粘液，尿，痰，或者汗。在上述任一方法的一些實施方案中，電離的樣品可以除二曱基精氨酸之 外還包含化合物。電離的樣品可以包含不在尺寸排阻色譜柱上共遷移 (co-migrate)的"f匕合物。在上述任一方法的一些實施方案中，可以檢測一種或多種另外的分析 物。所述一種或多種另外的分析物可以是代謝的生物分子。所述一種或多種 另外的分析物可以是氨基酸或?；鈮A(acylcarnitine)。所述一種或多種另外 的分析物選自瓜氨酸，二曱胺，精氨酸，鳥氨酸(orthnithine),同型半胱氨 酸，及肌酸。在一些實施方案中，可以利用例如串聯質語測量所述一種或多 種另外的分析物。在上述任一方法的一些實施方案中，在電離樣品之前不化學改性該樣 品。在上述任一方法的一些實施方案中，在電離樣品之前化學改性該樣品。在上述任一方法的一些實施方案中，可以測量w/z約46時的信號水平 和m/z約172時的信號水平，例如，通過測定取決于m/z約46時的子離子 m/z信號和m/z約172時的子離子m/z信號的函數的結果進行測量。另 一方面，本公開涉及診斷以ADMA或SDMA含量的變化為特征的病癥的方法，該方法包括提供受試者的生物樣品；電離該生物樣品以產生離 子；選擇質荷比(m/z)處于一種m/z范圍的離子；使所選擇的離子碎裂以產生 子離子；及測量作為m/z約46時的子離子m/z信號的函數的ADMA含量和 作為m/z約172時的子離子w/z信號的函數的SDMA含量，其中生物樣品中 ADMA和SDMA之一或二者的含量相對于基準樣品中的含量的變化，表示 受試者患有以ADMA或SDMA含量的變化為特征的病癥或者存在患有這種 病癥的風險。所述病癥可用ADMA含量的增加和/或SDMA含量的增加為特 征。以ADMA或SDMA含量的變化為特征的病癥可以是血管病癥和/或高血 壓病癥。高血壓病癥可以是先兆子癇(preeclampsia)。所述w/z范圍可以是w/z 約203。電離的生物樣品除二曱基精氨酸之外還可以包含化合物。受試者可 以是哺乳動物，例如人。血管病癥可以是心血管病癥或高血壓病癥。高血壓 病癥可以是先兆子癇。心血管病癥可以是動脈粥樣硬化。血管病癥可以是糖 尿病，高膽固醇血癥，腎機能不全，或者高血壓。在一些實施方案中，可以 測量在m/z約46時的子離子w/z信號的水平和在m本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種判別二甲基精氨酸異構體的方法，該方法包括：　電離樣品以產生離子；　選擇質荷比（ｍ／ｚ）處于一種ｍ／ｚ范圍的離子；　使所選擇的離子碎裂以產生子離子；及　通過檢測在ＡＤＭＡ特有ｍ／ｚ下的子離子ｍ／ｚ信號和在ＳＤＭＡ特 有ｍ／ｚ下的子離子ｍ／ｚ信號之一或二者，檢測樣品中的不對稱二甲基精氨酸（ＡＤＭＡ）和對稱二甲基精氨酸（ＳＤＭＡ）之一或二者。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：布拉斯瑟達，
申請(專利權)人：珀金埃金默LAS公司，
類型：發明
國別省市：US[美國]